Рнкб иб: банковские услуги для физических лиц и бизнеса

Рнкб иб: банковские услуги для физических лиц и бизнеса

Comments 0 Comment

Содержание

Школу информационной безопасности в партнерстве с «Мирандой-медиа» проводят в Ялте

Симферополь, 30 июля. Крыминформ. Летняя школа по информационной безопасности начала работу в Ялте. Партнером проекта выступил ведущий оператор связи Крыма – ООО «Миранда-медиа», передает пресс-служба компании.

«В Ялте стартовала работа Второй летней школы по информационной безопасности. Студенты ведущих российских вузов, осуществляющих подготовку в области информационной безопасности, обучаются предотвращению несанкционированного доступа к информации, созданию безопасности граждан от передачи конфиденциальных данных, сохранению государственной тайны. Ялтинская летняя школа проходит в рамках федеральной программы «Информационная безопасность», – говорится в сообщении.

Школа объединила студентов из Владивостока, Новосибирска, Екатеринбурга, Сыктывкара, Москвы, Ставрополя, Таганрога, Калининграда, Архангельска, Симферополя. Для них в течение трех недель будут проходить лекции, тренинги, олимпиады, мастер-классы и конкурсы.

«В таком формате будущие IT-специалисты набираются опыта и знаний. И это очень важно, так как профессионалы данного профиля очень востребованы, – рассказал заведующий кафедрой компьютерной инженерии и моделирования Виктор Милюков, организатор летней школы. – Студенты начинают работать уже на третьем-четвертом курсах, и в условиях всеобщей компьютеризации, когда специалисты постоянно работают над совершенствованием инструментов, которые отслеживают, предотвращают, устраняют несанкционированный доступ в базы и сети, крайне важны такие встречи, как наша Летняя школа по информационной безопасности».

Участников мероприятия научат отражать кибератаки и сохранять персональные данные людей. Для них работают практики компаний производителей и разработчиков сферы информационной безопасности. Постоянным партнером летней школы выступил ведущий оператор связи Крыма – «Миранда-медиа».

«Во время Летней школы планируется проведение студенческой научной конференции по информационной безопасности, в частности, секций «Техническая защита информации», «Безопасность компьютерных сетей» и «Безопасность критических инфраструктур». Это близкие для нас темы, так как информационная безопасность является одним из драйверов развития нашей компании, – отметила директор по связям с общественностью «Миранда-медиа» Виктория Саулова. – Мы предоставляем нашим клиентам защищенные каналы связи и другие услуги, постоянно работаем над совершенствованием продукта и понимаем, что успешное будущее в киберпространстве – это защищенная информация, безопасность пользователя. Поэтому ежегодно мы поддерживаем Летнюю школу по информационной безопасности, которая обучает IT специалистов».

Соорганизатором мероприятия также стал Московский технический университет связи и информатики.

27 июля – 5 августа – ВТОРАЯ ВСЕРОССИЙСКАЯ СТУДЕНЧЕСКАЯ ЛЕТНЯЯ ШКОЛА ПО ИНФОРМАЦИОННОЙ БЕЗОПАСНОСТИ

На базе Физико-технического института КФУ им. В.И. Вернадского и филиала КФУ Гуманитарно – педагогической академии в г. Ялте 27 июля – 5 августа 2021 г. при поддержке Федерального учебно-методического объединения в системе высшего образования по ИБ (ФУМО ВО ИБ) состоится Вторая Всероссийская студенческая Летняя школа по информационной безопасности (ИБ).

В работе Летней школы примут участие 80 студентов Российских вузов, осуществляющих подготовку в области информационной безопасности и 15 тренеров.
В программе летней школы лекционные занятия, тренинги, олимпиады, мастер классы, игровые занятия, конкурсы.

Организатором летней школы выступает кафедра компьютерной инженерии и моделирования Физико-технического института КФУ им. В.И. Вернадского. Соорганизатор Летней школы – Московский технический университет связи и информатики (МТУСИ) в рамках Федеральной программы “Информационная безопасность”.

Партнеры Летней школы:  ОАО «ИнфоТеКС» (г.Москва) – ведущий отечественный разработчик и производитель высокотехнологичных программных и программно-аппаратных средств защиты информации, группа компаний “Эшелон” (г.Москва)  – разработчик комплексных решений для обеспечения информационной безопасности малого, среднего и крупного бизнеса,  “Код безопасности” (г.Москва) – разработчик широко известных продуктов Secret Net, Континент, Соболь и др., “Миранда-медиа» – ведущий Крымский провайдер телекоммуникационных услуг, “IW Group” – компания разработчик мобильных и Web приложений, ПАО банк РНКБ, ООО “СерчИнформ” (г.Москва) – крупнейший разработчик SIEM, DLP и DCAP систем, “TP Link Россия” – крупнейшая компания производитель маршрутизаторов, ООО “АйТи Новация”, Краснодар, Симферополь – компания системный интегратор в области ИБ, “JoyDev” (Севастополь) – кампания разработчик мобильных приложений и решений в области информационной безопасности.

Во время Летней школы планируется студенческая научная конференция по информационной безопасности (планируются секции “Техническая защита информации”, “Безопасность компьютерных сетей” и “Безопасность критических инфраструктур”).

Открытие Первой Всероссийской студенческой Летней школы по информационной безопасности  состоится 27 июля 2021 года в 11:00 по адресу: г. Ялта, ул. Халтурина, 14,
учебный корпус Института экономики и управления Гуманитарно-педагогической академии Крымского федерального университета им. В.И. Вернадского.

 

Контактное лицо от организаторов:

Заведующий кафедрой компьютерной инженерии
и моделирования Милюков Виктор Васильевич
e-mail: [email protected]

Злоумышленники ловят банкиров на слове :: Финансы :: Газета РБК

ЦБ выявил новую высокотехнологичную схему мошенничества в финансовом секторе

ЦБ после утечки данных покупателей маркетплейса Joom выявил схему, когда мошенники использовали номера телефонов и последние цифры карт банковских клиентов для получения сведений об их счетах через голосовое меню одного из банков

Фото: Сергей Коньков / ТАСС

ЦБ предупредил банки о схеме, которая позволила злоумышленникам получить дополнительные сведения о клиентах одной из кредитных организаций и впоследствии использовать их для мошенничества с применением методов социальной инженерии. Злоумышленники обращались с подмененных номеров клиентов в систему интерактивного голосового меню при звонке в банк, написал в письме в адрес кредитных организаций Центр мониторинга и реагирования на компьютерные атаки в кредитно-финансовой сфере (ФинЦЕРТ) Банка России. РБК ознакомился с письмом, его подлинность подтвердили два источника на банковском рынке.

Использованная схема позволила мошенникам узнать информацию об остатках на счетах своих потенциальных жертв. В дальнейшем эти данные применялись при мошеннических звонках клиентам в целях кражи денежных средств с банковских карт, следует из письма.

Как пояснил РБК представитель ЦБ, такое мошенничество стало возможным из-за того, что один из банков не соблюдал рекомендации по противодействию мобильному мошенничеству и защите клиентов от несанкционированного доступа к их конфиденциальной информации через IVR (систему интерактивного голосового меню), которые были даны в 2019 году.

ЦБ и Visa предупредили банки об утечке данных 55 тыс. карт

Как мошенники использовали голосовое меню

ЦБ расследовал инцидент, после того как один из банков сообщил о резком росте числа звонков своим клиентам от мошенников, которым было известно об остатках денежных средств на счетах, следует из письма. В результате было установлено следующее:

  • Мошенники совершали телефонные звонки в систему IVR (интерактивное голосовое меню), подменяя телефонные номера клиентов. При звонке с номера клиента они запрашивали у системы сведения по остаткам денежных средств на картах клиентов, вводя для этого последние четыре цифры номеров этих банковских карт.

  • После этого мошенники, используя методы социальной инженерии (психологические методы, направленные на обман клиентов), звонили своим жертвам, представляясь сотрудниками банка. Как говорится в письме, «для преодоления барьера недоверия и успешного применения иных методов социальной инженерии» они использовали информацию об остатках денежных средств.

  • Номера телефонов клиентов и номера принадлежащих им банковских карт были скомпрометированы и распространялись в интернете. Источник получения этих данных однозначно не установлен, однако, как считают в ЦБ, мошенники могли их получить в том числе из клиентской базы маркетплейса Joom, которая ранее оказалась в открытом доступе, следует из письма.

Данные карт клиентов ВТБ попали в открытый доступ

Как утекли данные клиентов Joom

В конце августа ЦБ и платежная система Visa предупредили банки о том, что в Сети распространяется база 55 тыс. клиентов маркетплейса Joom, которая в том числе содержит данные о банковских картах, номерах телефона и Ф.И.О. покупателей. Среди данных оказались сведения о клиентах Сбербанка, Россельхозбанка, «Открытия», Райффайзенбанка, МКБ, Тинькофф Банка, Росбанка, Почта Банка, Киви Банка, Абсолют Банка, «Ак Барса», Промсвязьбанка, Ситибанка, ЮниКредит банка, банков «Санкт-Петербург», «Уралсиб», «Зенит», «Ренессанс Кредит», РНКБ, МТС-банка, УБРиРа и других российских, а также зарубежных банков. Часть банков решили перевыпустить карты пострадавшим клиентам или усилить контроль за операциями по ним. Вскоре в интернет из скомпрометированной базы Joom попали данные 31 тыс. клиентов ВТБ.

На то, что мошенникам была известна информация об остатке на счете, жаловались клиенты Райффайзенбанка, писали «Известия». При этом в Сети появилась база данных 27 тыс. его клиентов, которая также была частью базы Joom. Райффайзенбанк подтверждает компрометацию только 2 тыс. карт, сказал РБК его представитель. 4 сентября Райффайзенбанк предупредил об участившихся звонках клиентам от мошенников, но исключал утечку данных из самого банка.

Что рекомендовал ЦБ

После обнаружения мошенничества ФинЦЕРТ ЦБ еще раз указал на необходимость следовать рекомендуемым мерам, пояснил представитель регулятора: «Банки при обслуживании клиентов в системе телефонного банкинга в автоматическом режиме должны использовать дополнительный параметр аутентификации, например секретный код, который устанавливается клиентом при заключении договора. Кроме того, последние четыре цифры номера карты не могут являться дополнительным параметром аутентификации. Соблюдение таких рекомендаций позволит банкам предотвратить подобные инциденты».

В самом письме отмечается, что безопасным идентификатором не может считаться и телефонный номер клиента из-за проблемы с подменой номеров и утечек клиентских данных. Банкам также следует обеспечить синхронизацию обращений в системы интерактивного голосового меню с системами антифрода (борьбы с мошенничеством) и выявлять аномальную активность клиентов после использования интерактивного голосового меню.

Joom заявил об отсутствии угрозы средствам клиентов из-за утечки

РБК направил запрос в крупнейшие банки. Представитель Райффайзенбанка рассказал, что получение данных о балансе через систему IVR — достаточно распространенный на банковском рынке функционал. «К сожалению, мы видим, что мошенники стали все чаще использовать подложные номера телефонов клиентов для получения доступа к некоторым данным», — пояснил он, добавив, что сейчас данные по остатку счета направляются на контактный номер клиента через СМС или пуш-сообщение. Такой способ, по словам представителя банка, полностью закрывает сценарий раскрытия информации посредством подмены номера мошенниками при звонке через IVR.

ВТБ, который использует функцию интерактивного голосового меню, настроил систему безопасности таким образом, чтобы максимально защищать клиентов при использовании данной услуги, сказал представитель банка. «Яндекс.Деньги» не фиксировали роста числа звонков мошенников клиентам, а для запроса баланса по карте необходимы логин и пароль, в отдельных случаях также может быть запрос СМС или одноразового пароля, отметил представитель компании. МКБ не отметил жалоб клиентов на подобные звонки.

Банк «Открытие» для своих клиентов, которые были в базе Joom, установил запрет на получение финансовой информации через голосовой помощник с самого начала.

РНКБ для предоставления баланса с помощью IVR использует доверенный номер телефона и последние четыре цифры номера карты, но при этом не фиксирует резкого роста мошеннических звонков своим клиентам. Также банк рассматривает возможность применения для этих целей биометрии.

Интерактивное голосовое меню дает возможность узнать баланс счета, сменить PIN-код и т.д., отмечает руководитель направления «Информационная безопасность» ИТ-компании КРОК Андрей Заикин. «Между тем для расширения функционала требуется интеграция со все большим количеством систем внутри банка, что влечет за собой дополнительные риски с точки зрения информационной безопасности (ИБ). Ведь один метод защиты, примененный в одном приложении, может полностью закрыть угрозу ИБ, а в другом приложении сработать не так эффективно», — предупреждает он.

Лучше давать голосовому помощнику дополнительный функционал только при использовании заранее заданного специального кода, а не только номера телефона и последних цифр карты, говорит Заикин, и многие банки уже это делают. Банки могут установить в голосовом меню для проверки клиента СМС или push-уведомления, отмечает ведущий эксперт «Лаборатории Касперского» Сергей Голованов.

Данные 55 тысяч клиентов российских банков попали в открытый доступ

Центробанк сообщил об утечке крупной базы данных, в которой содержалась информация о 55 тысяч банковских карт россиян, сообщают российские СМИ. Известно, что среди пострадавших есть постоянные покупатели маркетплейса Joom. При этом слитую базу можно скачать на форумах даркнета совершенно бесплатно.

Центробанк сообщил об утечки данных 55 тысяч карт, сообщает РБК со ссылкой на источники. Известно, что карты принадлежат пользователям маркетплейса Joom.

Базу данных с конфиденциальной информацией можно найти в открытом доступе в интернете. При этом на многих площадках даркнета она распространяется совершенно бесплатно.

В ней можно найти первые шесть и последние четыре цифры номера карты, срок ее действия, банк-эмитент, а также ФИО, телефон, электронную почту и адрес проживания пользователя.

Отмечается, что в базе фигурируют клиенты Сбербанка, Россельхозбанка, Райффайзенбанка, Тинькофф банка, Росбанка, Почта банка, Промсвязьбанка и ряда других российских и иностранных кредитных организаций.

В Joom подтвердили факт утечки, добавив, что она произошла в марте текущего года. Однако тогда представители сервиса заявили лишь о «как минимум тысяче» пострадавших из России и Белоруссии.

«Подтвердить информацию об объеме в 55 тысяч мы не можем: сперва нам нужно изучить опубликованную базу и проанализировать ее на предмет соответствия нашим данным», — сказал представитель интернет-магазина в комментарии для издания.

По словам представителей ИБ-компаний, те данные, которые попали в общий доступ, могут быть использованы киберпреступниками для атак с применением социальной инженерии, когда мошенники обманывают своих жертв, представляясь сотрудниками банков и используя персональную информацию из открытых баз. 

Как заявил в конце прошлого года первый заместитель руководителя департамента информационной безопасности Банка России Артем Сычев, социальная инженерия используется в 97% случаев кражи денег с карт.

Также социальная инженерия активно применяется злоумышленниками против пользователей мессенджеров и других сервисов мгновенного обмена сообщениями. Как рассказали в Роскачестве, подавляющее большинство мошенников в WhatsApp играет на чувствах и эмоциях своих жертв, заставляя их перейти по зараженной ссылке или скачать вредоносный файл. При этом после перехода по опасной ссылке с жертвой может произойти все что угодно — от кражи персональных данных до вывода денежных средств с ее карты.

«Если вас просят предоставить сугубо личную информацию, например, номер банковской карты, счета, дату рождения, пароли — это ловушка. Никто и никогда не будет запрашивать у вас такие данные из благих побуждений», — предупредил заместитель руководителя Роскачества Илья Лоевский.

В апреле СМИ сообщили о продаже личных данных миллионов россиян, оформлявших микрокредиты в 2017–2019 годах. По словам продавца, разместившего базу в даркнете, он обладает информацией о 12 млн граждан России, включающей в себя паспортные данные, даты рождения, номера телефонов, адреса электронной почты, номера электронных кошельков и размер займа. При этом все имеющиеся данные были получены из одного источника. Тогда эксперты предположили, что утечка личных данных россиян могла произойти в результате выгрузки с сервера баз данных, который обслуживает информационную систему финансового супермаркета или МФО, но определить, какая именно компания допустила утечку, не представляется возможным.

вызовы и препятствия на пути к цифровым банкам

ИКТ в финансовом секторе: вызовы и препятствия на пути к цифровым банкам

26 сентября 2019 года в Москве CNews проводит конференцию «ИКТ в финансовом секторе: вызовы и препятствия на пути к цифровым банкам»

Банковский сектор – наиболее технологичный сегмент российской экономики. Требования регуляторов и борьба за клиента в условиях ужесточающейся конкуренции, вынуждают банки оперативно внедрять технологические инновации.
По оценкам аналитиков Deloitte российский рынок финансовых технологий в 2018 г. вырос на 12%. По мнению экспертов рынок имеет большой потенциал: 76% компаний положительно оценивают текущее состояние рынка с точки зрения финансового благополучия бизнеса, а 60% – видят серьезные перспективы развития с оптимизмом смотрят на перспективы развития рынка.
Главным драйвером развития финансовых технологий в России остаются банки, инвестирующие внушительные средства в технологическую модернизацию.
О том, на каких технологиях и инструментах сфокусированы банки, как идет цифровизация отрасли и когда традиционные кредитные организации уступят место необанкам, расскажут спикеры конференции.

Состояние и перспективы рынка

• Импортозамещение в финансовых организациях: реальное положение дел

• Как растет сегмент цифровых банков

• Финтех-революция: как банки сотрудничают со стартапами

• Смогут ли необанки перевернуть финансовый рынок

• Требования регулятора, как драйвер цифровизации банков

• Переход на XBRL: как подготовиться заранее

Фокус на безопасность

• Искусственный интеллект против фрода

• Бреши в онлайн-банкинге: угроза пользователю и банку

• Ключевые факторы безопасности ДБО

• Помогут ли требования Банка России к кибербезопасности

• Как скоро банки смогут доверить безопасность облачным решениям

Автоматизация бизнес-процессов

• От АБС к второстепенным процессам: как меняется фокус автоматизации в банках

• RPA в действии: как роботы помогают банкам повышать операционную эффективность

• Какие прикладные инструменты для повышения эффективности бизнес-процессов выбирают банки

Инструменты и технологии

• Микросервисные платформы как шаг на пути к банковским экосистемам

• Отдать разработку АБС на аутсорс: риски и выгоды

• Перспективы удаленной идентификации и «умной» аутентификации пользователей

• Как развиваются дистанционные каналы предоставления услуг в банках

• Когда банки начнут промышленное внедрение блокчейн-технологий

подробнее

спикеры

партнёры

Информационные партнёры

Участники

Банк РНКБ (ПАО)
Аналитик
ПАО РОСБАНК
Руководитель проектов
АО «Специализированный депозитарий «ИНФИНИТУМ»
Руководитель аналитического департамента
АО Ишбанк
CIO
АО КБ «ФорБанк»
CIO
ПАО Московская биржа
Бизнес-аналитик
Газпромбанк
Аналитик
АО КБ «Ассоциация»
CIO
ПАО «Банк УРАЛСИБ»
Директор ИТ
Страховой дом «ВСК»
Руководитель ИТ
Skolkovo Ventures
Директор по развитию бизнеса
АТОН
Руководитель ИТ
АКБ «Ланта-Банк» (АО)
Начальник УИТ
ООО ИК Велес Капитал
Руководитель проектов
Акционерное общество «БКС Банк»
Менеджер ИТ
Банк «ФК ОТКРЫТИЕ»
Заместитель директора ИТ
Московская биржа
Директор ИТ
СК Согласие
Заместитель директора ИТ
Ренессанс Капитал
Директор по маркетингу
Юникредит банк
Руководитель проектов
Банк (АО) Национальная Факторинговая Компания
Заместитель генерального директора
АО Гознак
Руководитель проектов
ВТБ
Руководитель ИТ
Rusnarbank
CIO
ВТБ Страхование
Руководитель отдела бизнес-процессов
ПАО РОСБАНК
Руководитель проектов
ПАО РОСБАНК
Руководитель проектов
СПАО «Ингосстрах»
Главный менеджер ИТ
АО ВРБ
Директор ИТ
ООО «банк Раунд»
Руководитель ДИТ
АКБ «Абсолют Банк» (ПАО)
Менеджер по развитию бизнеса
СДК Гарант
Руководитель ИТ
АО «Альфа Банк»
Аналитик
Банк ВТБ (ПАО)
Начальник ОИТ
ПАО СК «Росгосстрах»
Главный менеджер ИТ
АО ВРБ
Директор ИТ
Банк Открытие
CIO
АО «ИШБАНК»
Заместитель начальника ДИТ
АО КБ «ИС Банк»
Заместитель начальника УИТ
банк СКС
CIO
РОСБАНК
Аналитик
Росбанк
Директор по развитию
ООО «Билд Проджект Системс»
Заместитель генерального директора
Федеральное казначейство
Заместитель начальника УИТ
Федеральное казначейство
Специалист ИТ
Федеральное казначейство
Специалист УИТ
Федеральное казначейство
Аналитик
Федеральное казначейство
Аналитик
АО «Банк Интеза»
CIO
Банк МБА-Москва
CIO
АО ЮниКредит Банк
Главный менеджер ИТ
АО «НС-Банк»
Заместитель директора ИТ
ПАО «БАНК СГБ»
Специалист ИТ
American Express Bank
CIO
Русский стандарт банк
CIO
АО ОТП Банк
Начальник УИТ
БКС Банк
Руководитель ДИТ
РОСБАНК
Аналитик
Банк ВТБ
Заместитель руководителя УИТ
Выберу.ру
Журналист
МигКредит
Руководитель аналитического департамента
АКБ «Ланта-Банк» (АО)
Начальник УИТ
ООО «Америкэн Экспресс Банк»
Заместитель директора ИТ
Банк ВТБ
Главный технический специалист
ООО «Скания Лизинг»
Руководитель ИТ
Банк ВТБ
Директор ИТ
JCB International
Технический директор
ВТБ
Менеджер по продукту
ФК Открытие
Руководитель проектов
ПАО РОСБАНК
Менеджер ИТ
Фольксваген Банк
Технический директор
ООО «Согласие»
Менеджер управления ИБ
РНКБ Банк (ПАО)
Аналитик
ПАО Банк Зенит
Главный менеджер УИТ
Alfa Bank
Аналитик
Банк «ФК ОТКРЫТИЕ»
Заместитель руководителя ДИТ
Colvir Software Solutions
Директор по развитию продуктов
Colvir Software Solutions
Директор по продажам
ПАО «АкБарс Банк»
Руководитель проектов
Быстроденьги
CIO
АКБ «Абсолют Банк» (ПАО)
Руководитель отдела по работе с клиентами
ПАО Росбанк
Бизнес-аналитик
АО «ВРБ»
Бизнес-аналитик
ООО ВТБ Капитал Брокер
CIO
РСХБ
Исполнительный директор
Альфа-БАнк
Аналитик
НС Банк
Руководитель отдела по работе с клиентами
ОА «БайкалИнвестБанк»
CIO
ПАО «Промсвязьбанк»
Аналитик
Райффейзенбанк
Начальник отдела бизнес-процессов
Руснарбанк
CIO
СЕВЕРГАЗБАНК
Заместитель руководителя ДИТ
Абсолют банк
Аналитик
АКБ «ФОРА-БАНК»
Руководитель проектов
ООО КБ «Альба Альянс»
Менеджер управления ИБ
Сбербанк
Администратор БД
PJSC «Credit Bank of Moscow»
Руководитель проектов
ООО «Агентство страховых технологий»
CIO
Инвестиционный банк ВЕСТА
Бизнес-аналитик
ООО «Зетта Страхование»
Заместитель генерального директора
БНП Париба Банк
CIO
ВТБ
Начальник ОИТ
Инвестиционный банк «Веста»
Руководитель отдела бизнес-процессов
АО КБ «ИС Банк»
Заместитель начальника УИТ
OOO «Insurance company CARDIF»
CIO
Райффайзенбанк
руководитель отдела разработки хранилищ данных и приложений для бизнес-анализа и учета
Транскапиталбанк
Начальник УИТ
Инвестторгбанк
CIO
Фольксваген Банк РУС
Руководитель проектов
МикроКапитал
Директор ИТ
банк СКС
CIO
ПАО «МКБ»
Директор по развитию
НАЦИОНАЛЬНОЕ РЕЙТИНГОВОЕ АГЕНТСТВО
Директор ДИБ
ПАО «ПРОМСВЯЗЬБАНК»
Руководитель проектов
Контрольно-счетная палата Москвы
Руководитель проектов
АО КБ «ИС Банк»
Менеджер управления ИБ
ФНС России
Заместитель начальника УИТ
Банк «ВБРР» (АО)
Менеджер по развитию
АО «СберТех»
Ведущий специалист управления внутреннего контроля
АО Россельхозбанк
Бизнес-аналитик
Промсвязьбанк
Руководитель ИТ
АО Россельхозбанк
Аналитик
Банк ГПБ (АО)
Исполнительный директор
ПАО «Росбанк»
Менеджер ИТ
OOO НКО «Мобильная карта»
Председатель правления
Байтерек
Руководитель проектов
Сбербанк Факторинг
Руководитель ИТ
АО АКБ «ЕВРОФИНАНС МОСНАРБАНК»
Директор ДИТ
СПАО «Ингосстрах»
Менеджер по продукту
ГК Сбербанк
Руководитель проектов
Инвест-Форсайт
Журналист
РНКО «Р-ИНКАС»
Руководитель ИТ
Ассоциация банков России (Ассоциация «Россия»)
Аналитик
ООО «Компания БКС»
Менеджер ИТ
СПАО «Ингосстрах»
Менеджер ИТ
ООО РСХБ — Интех
Главный специалист ИТ

Загрузить еще участников

Программа мероприятия

10.10-10.25Михаил Кротов, Менеджер по продажам, VeritasРазумное управление ресурсами хранения организации с помощью Veritas Aptare
10.25-10.40Роман Павлов, Архитектор бизнес-решений в области аналитики больших данных и IoT, Hitachi VantaraБорьба с мошенничеством и не только — как монетизировать ФЗ115
10.40-10.55Екатерина Забродова, Chief Project Officer, Umbrella ITРеволюция vs эволюция. Стартапы в корпорациях
10.55-11.10Сергей Путятинский, Заместитель председателя правления, Московский кредитный банкВызовы и препятствия на пути к цифровым банкам
11.10-11.25Денис Гузовский, Директор департамента ИТ эксплуатации, Банк «Открытие»Требования регулятора, как драйвер цифровизации банков
11.25-11.40Наталья Роменская, Директор по цифровой трансформации, Банк ВТБRPA в действии: как роботы помогают банкам повышать операционную эффективность
112.35-12.50Илья Батай, CIO, Альфа-КапиталВзаимодействие ИТ и бизнеса. Как жить вместе?
12.50-13.05Татьяна Гордиенко, Исполнительный директор центра управления развития казначейства, ГазпромбанкИнновационный подход к технологии управления комплексной автоматизации. Применение архитектурного подхода при реализации проектов
113.05-13.20Александр Бычков, Директор ДИТ, КБ «Геобанк»Цифровая трансформация внутренних процессов банка
113.20-13.35Ярослав Кабаков, Директор по стратегии, Группа ФИНАМРазвитие цифрового брокеринга

Подпишитесь на анонсы наших мероприятий

Мероприятия Архив мероприятий

Все права защищены © 1995 — 2021 CNews

Держатели карт РНКБ расплатились за новогодние покупки дважды

У севастопольцев, накануне Нового года расплачивавшихся картами РНКБ за услуги и покупки в местных магазинах, а также снимавших наличные в банкоматах, дважды списали деньги. У некоторых баланс стал отрицательным. Об этом горожане сегодня массово сообщают в соцсетях, в том числе — в официальной группе РНКБ Вконтакте.
Вот типичное сообщение:

«31.12 были сняты денежные средства в банкомате, смс пришло сразу, деньги были списаны. Сегодня, 05.01 пришло смс о снятии такого же количества средств, и карта теперь в минусе, хотя все обязательные платежи были оплачены. Как такое может быть?»

На первые претензии официальный представитель банка отвечал, что это может быть связано с задержкой смс-сообщений со стороны оператора связи и советовал обратиться в контакт-центр банка по телефону.

«Банк РНКБ, повторил звонок 56 раз, и даже робот начальных слов не говорит, а просто идут секунды с молчанием. Спасибо за помощь, легче дождаться рабочего дня и совершить визит в отделение банка», — отвечали держатели карт.

Представитель РНКБ сначала предложил проявить настойчивость и дождаться ответа оператора перегруженной линии, но чуть позже предоставил объяснение (синтаксис сохранён во избежание неточной трактовки): 

«Приносим свои извинения за доставленные неудобства. Массовый сбой по операциям прошедшим перед Новым годом в pos-терминалах Генбанка пришел запрос на двукратное списание по суммам. Специалисты Банка занимаются разрешение данного вопроса. Причины и сроки устанавливаются»​.

Исходя из этого сообщения, можно предположить, что проблема касается тех, кто расплачивался или обналичивал деньги в терминалах Генбанка, но остаётся непонятным, от какого из двух банков пришли запросы на повторное списание.  Также пока неизвестно, какие действия необходимо предпринять тем, кого коснулся этот сбой.

Саша Ахтемко

Хакеры выложили переговоры крупнейшего банка Крыма и Банка Москвы

В сеть попали переговоры лиц, которых «Шалтай Болтай» называет вице-президентом, начальником службы безопасности Банка Москвы Виталием Никишаевым, членом совета директоров РНКБ Алексеем Гостевым и председателем совета директоров РНКБ Русланом Арефьевым.

Все трое обсуждали оперативные и административные вопросы, касающиеся РНКБ, притом якобы Арефьев и Гостев консультировались по данному поводу с Никишаевым. В частности, в беседе между «Никишаевым» и «Арефьевым» шла речь о выдвижении «Гостева» в совет директоров РНКБ. Переговоры, по данным хакеров, велись летом 2014 года, после того, как Банк Москвы вышел из капитала РНКБ, пишет top.rbc.ru.

Согласно информации на официальном сайте РНКБ, в совет директоров действительно входит Алексей Гостев, а председателем совета является Руслан Арефьев. Пресс-служба Банка Москвы подтвердила, что в банке работает Виталий Никишаев, который занимает должность вице-президента, начальника службы безопасности. Однако подлинность их голосов на записи пока никто не подтвердил.

«Мне просто озвучили, что Совмин [Крыма] хочет видеть Гостева. Ну, изначально они хотели, чтобы он был директором по безопасности… Ну я, в принципе, поговорил и сказал, что пока что мы уже выстроили некую вертикаль, что ее ломать не стоит… В принципе, они его позиционируют как вот там от антикоррупционного комитета, что он будет как бы там, со стороны Совмина там, смотреть за нами… Товарищ не возражает, но вот я как бы с вами…», — говорит человек, обозначенный в материалах «Шалтая» как Арефьев.

«Кто становится членом совета директоров?» — спрашивает человек, названный Никишаевым.

«Гостев… Они хотели, чтобы он вообще стал директором департамента, но знаете, у нас уже есть директор департамента, вот вертикаль уже выстроена, то есть это будет там неправильная как бы с нескольких сторон…»

«Ну… я вчера с (неразборчиво) разговаривал там на другие темы по Крыму, этого он не касался, но ты смотри, Алексей, он это самое, там он очень близок к [Сергею] Аксенову [глава республики Крым]… Это как бы факт. Вот они, естественно, его там двигают. Но у нас, мы и так, я ему уже там отвел позицию практически в Крыму главного. Но поскольку у нас головная контора пока находится в Москве, назначен директор… управляет этот самый, руководитель управления, то как-то здесь… цепочка, ты правильно говоришь, она рушится. Вот…»

До 26 марта прошлого года РНКБ представлял из себя маленький московский банк, который на 100% принадлежал Банку Москвы. Но официально был продан группе лиц — в связи с решением о его выходе в Крым. Сейчас банк РНКБ, согласно информации на его сайте, принадлежит ЗАО «РНКБ-Холдинг», бенефициаром которого является ООО «Комплексные энергетические решения» (принадлежит ООО «Прайд» и ООО «Стройэнергорезерв»).

«Банк Москвы вышел из капитала РНКБ в марте 2014 года и в настоящее время не оказывает какого-либо влияния на деятельность данного банка», — констатировал официальный представитель Банка Москвы. Виталий Никишаев, по сообщению пресс-службы Банка Москвы, пока не прокомментировал, подлинные ли записи, обнародованные «Анонимным интернационалом». Банк РНКБ, как сообщил представитель его пресс-службы, не комментирует эту ситуацию.

Крупные банки России до сих пор официально в Крыму не работают, опасаясь попасть под санкции (за исключением банка «Россия», который и так находится под санкциями). Зато мелкие и средние банки увидели для себя выгоду в разворачивании на полуострове бизнеса, заполнив тем самым пустующую нишу (вхождение российских банков на полуостров сопровождалось закрытием там украинских банков, не имевших возможности осуществлять в регионе операционную деятельность).

РНКБ стал первым российским банком, вышедшим на крымский рынок, и сегодня он является крупнейшим на полуострове. Согласно информации на сайте ЦБ, у РНКБ сейчас 275 офисов, подавляющее большинство из них расположены на территории Крыма и Севастополя.

Введение

Введение

Было высказано предположение, что тенденция к развитию диабета является результатом метаболических нарушений в функционировании генов, которые эволюционировали как «бережливые» [1], чтобы регулировать эффективное использование запасов топлива во время пира и голодания. Это одна из наиболее известных гипотез, объясняющих генетическую предрасположенность к диабету 2 типа (СД2). Кроме того, низкий уровень секреции инсулина или высокая инсулинорезистентность были предложены для направления большего количества энергии в инсулиннезависимые ткани (мозг и красные кровяные тельца) и меньше в инсулинозависимые ткани (скелетные мышцы, печень, жировые клетки и брюшные клетки). внутренности) [2].Было высказано предположение, что во время голодания низкий уровень инсулина / инсулинорезистентность делает больше глюкозы доступным для мозга [3], что, согласно недавней гипотезе, получило дальнейшее преимущество из-за сдвига баланса от относительно мышечного образа жизни к образу жизни. более мозгозависимый [4], эволюционная адаптация. Было высказано предположение, что многие гены играют роль в этой эволюции [5] — [8]. Согласно недавней литературе [9] — [11], человеческие сиртуины, особенно SIRT1, по-видимому, участвуют и играют функциональную роль в этом процессе.

Сиртуин SIRT1 человека, гистондеацетилаза NAD + , регулируется стрессом и статусом питания [12], регулируя многие факторы транскрипции, которые модулируют эндокринную передачу сигналов и клеточный метаболизм в различных физиологических контекстах. Роль SIRT1 была продемонстрирована в путях определения питательных веществ и передачи сигналов инсулина, а также в регуляции стрессовых реакций, которые определяют выживаемость клеток, апоптоз и пролиферацию [13]. Предполагается, что для гомеостаза глюкозы, частично с помощью β-клеток поджелудочной железы [14], SIRT1 действует как потенциальный главный переключатель в функциях β-клеток [15], в модуляции секреции инсулина [16], [17] и в регуляции активности факторов транскрипции и ко-регуляторов транскрипции, которые участвуют в регуляции экспрессии генов в β-клетках поджелудочной железы [15].SIRT1 регулирует секрецию инсулина, подавляя разобщающий белок 2 (UCP2) [16]. Он влияет на метаболизм глюкозы в клетках печени, активируя коактиватор транскрипции PGC1α с последующей экспрессией глюконеогенных генов и репрессией гликолитических генов. [18]. Во время голодания или ограничения калорий SIRT1 участвует в регуляции путей [13], [19] по-разному в тканях, повышая регуляцию в печени (повышенный выход глюкозы за счет глюконеогенеза) и белой жировой ткани (высвобождение свободных жирных кислот) и подавляя регуляцию в β-клетки поджелудочной железы (меньшая секреция инсулина) [20].Эта дифференциальная активность способствует направлению выработки глюкозы в основном в мозг. Однако в условиях ad libitum (или свободного кормления) экспрессия SIRT1 увеличивается в β-клетках поджелудочной железы, что вызывает усиленную и эффективную глюкозо-стимулированную секрецию инсулина (GSIS) [15], [17] путем репрессии UCP2 [16].

Наши исследования СД2 в Северной Индии [21] — [23] предполагают интерактивную роль полиморфизмов генов-кандидатов в митохондриальной НАДН-дегидрогеназе (mt-ND3) 10398G> A, коактиватор-1 рецептора, активируемого пролифератором пероксисом (PGC1α) (п.Thr394Thr или p.Gly482Ser) и UCP2-866G> A, в основном участвующие в активности β-клеток поджелудочной железы, влияющих на GSIS. Ключевая роль экспрессии SIRT1 в функциях β-клеток поджелудочной железы дала нам повод для дальнейшей оценки возможной интерактивной роли области промотора SIRT1. SIRT1 может действовать как «ген бережливости» в азиатских популяциях, в основном среди индийцев, у которых меньше случаев ожирения, но более высокая распространенность СД2 в более молодом возрасте [24], вероятно, из-за выраженной дисфункции ранней секреции инсулина в отношении к инсулинорезистентности [25].В настоящем исследовании также оценивались другие полиморфизмы, которые, как сообщается, связаны с T2D: регуляторная субъединица фосфатидилинозитол-3-киназы (PIK3R1), p.Met326Ile (rs3730089), субстрат рецептора инсулина 1 (IRS1), p.Gly971Arg (rs1801278) и регуляторная субъединица фосфунитазы 1. 3 (PPP1R3) p.Asp905Tyr (rs1799999) в генах-кандидатах, известных как ключевые узлы клеточной передачи сигналов ниже инсулина и составляющих инсулинорезистентность.

Материалы и методы

В этом исследовании были проанализированы в общей сложности 1542 хорошо изученных образца (692 случая СД2 и 850 здоровых людей), принадлежащих к индоевропейской лингвистической группе из Северной Индии (Пенджаб с Джамму и Кашмиром).Диагноз СД2 был поставлен в соответствии с критериями Всемирной организации здравоохранения и с учетом уровня глюкозы натощак> 126 мг / дл. Подробная информация о сборе образцов, а также критерии включения и исключения представлены в наших предыдущих исследованиях [21] — [23]. Клинические данные и другая информация об исследуемых образцах приведены в таблице S1.

Заявление об этике

Письменное информированное согласие было получено от всех участников. Данные были проанализированы анонимно, и исследование было одобрено этическим комитетом Университета Джавахарлала Неру.

Генотипирование полиморфизмов

Геномная ДНК была выделена из периферической крови с помощью стандартного протокола, используемого в лабораториях. Мы секвенировали 1,46 т.п.н. перед сайтом начала трансляции гена SIRT1 и наблюдали одиннадцать SNP (rs12778366, rs3758391, rs7476338, rs35706870, rs3740051, rs34639502, rs34842975, rs932658, rs35994005735, rs). Однако только 7 SNP (rs12778366, rs3758391, rs35706870, rs3740051, rs932658, rs3740053 и rs2394443) были обнаружены полиморфными в популяции Северной Индии (таблица S2 и рис.1). Для этого олигонуклеотиды были сконструированы с помощью программы PRIMER 3 [26]. Пару праймеров (прямой 5 ‘ACGCAACCAAAGATGGTTTT 3’ и обратный 5 ‘CTTCCAACTGCCTCTCTGG 3’) использовали для амплификации всей области. Общая полученная реакционная смесь для ПЦР составляла 12,5 мкл, содержащая ~ 80 нг матричной ДНК, 6,25 пмоль каждого праймера, 300 мкМ dNTP, 1,5 мМ MgCl 2 , 1X реакционный буфер и 0,4 единицы фермента Taq pol ( Бангалор Геней, Индия). Условия цикла были следующими: денатурация при 95 ° C в течение 1 мин, затем отжиг при 62 ° C в течение 1 мин, а затем удлинение при 72 ° C в течение 1 минуты.5 мин, повторение 32 цикла с последующим заключительным этапом удлинения при 72 ° C в течение 10 мин. Продукты ПЦР первоначально проверяли в 1,5% агарозном геле, секвенировали с помощью ABI Prism 3100 – Avant Genetic Analyzer (Applied Biosystems, США) и анализировали в программе SeqScape v2.1.1 (Applied Biosystems). Два внутренних праймера (прямой 5 ‘TGCACGTGAGAAAACTGAGG 3’ и обратный 5 ‘ACCTTTGACGTGGAGGTTTG 3’) также использовали вместе с внешними праймерами для полного секвенирования без каких-либо пробелов. Генотипические данные mt-ND3 (rs2853826), вариантов PGC1α (rs2970847 и rs81

) и UCP2 (rs659366) для образцов были взяты из нашей более ранней публикации [21].Ранее определенные методы ПЦР и рестрикционного переваривания из литературы были использованы для скрининга других полиморфизмов гена-кандидата: PIK3R1 p.Met326Ile (rs3730089), IRS1 p.Gly971Arg (rs1801278) и PPP1R3 p.Asp905Tyr (rs1799999). Для контроля качества и подтверждения рестрикционного переваривания было выполнено прямое секвенирование для скрининга этих полиморфизмов в 250 случайно выбранных образцах, которые показали 100% соответствие, что свидетельствует об отсутствии ошибок в методах рестрикционного переваривания.

10.1371 / журнал.pone.0048621.g001Рисунок 1

Промоторная область гена SIRT1.

На рисунке представлены подробности 11 промоторных полиморфизмов гена SIRT1, охватываемых областью 1,46 т.п.н. выше сайта начала трансляции. 4 SNP, помеченные знаком «X», не показали полиморфизма в исследуемой популяции. Значения D ‘представлены в виде графика, чтобы показать неравновесие по сцеплению между 7 наблюдаемыми полиморфными маркерами. Также представлены частоты наблюдаемых гаплотипов и детали выбранных SNP меток и соответствующих аллелей, захваченных среди 7 полиморфных маркеров.

Статистический анализ

Равновесие Харди – Вайнберга проверяли в каждом вариантном локусе в таблице сопряженности наблюдаемых и прогнозируемых частот генотипов с использованием критерия хи-квадрат. Категориальные переменные сравнивались с использованием критерия хи-квадрат (χ 2 ). Непрерывные данные были показаны как среднее ± стандартное отклонение. Логистический регрессионный анализ использовался для определения независимых и интерактивных ассоциаций аллельного и генотипического статуса исследуемых полиморфизмов с СД2.Также были внесены поправки на возраст, пол, индекс массы тела (ИМТ) и центр сбора образцов. Поправка Бонферрони была принята для проверки множественных гипотез.

Взаимодействие между различными генотипами (разными генами) было установлено в основном с помощью бинарной логистической регрессии в статистическом пакете для программы социальных наук (SPSS версии 13.0; SPSS, Чикаго, Иллинойс). Комбинации генотипов риска и защиты для mt-ND3 rs2853826, PGC1α rs81

и UCP2 rs659366GG были впервые установлены (таблица S2), о чем также сообщалось в нашем предыдущем исследовании [21].Кроме того, рассматривая SIRT1 в качестве восходящего кандидата, индивидуумы с генотипическим фоном SIRT1 rs12778366 (-1400) (TT, TX, CX) были классифицированы, а генотипические распределения риска и защиты нижестоящих генов-кандидатов: mt-ND3 rs2853826, PGC1α rs81

и UCP2. rs659366GG, оценивались в этих фонах индивидуально и вместе. Эти распределения в случаях и контроле использовались для оценки отношения нечетности (OR) при 95% доверительном интервале (CI) и соответствующих значениях p. Эмпирические значения p были также оценены для всех генотипов риска по сравнению с защитными генотипами mt-ND3 rs2853826, PGC1α rs81

и UCP2 rs659366 в генотипических фонах SIRT1 rs12778366 (-1400) (TT, TX, CX) с помощью логистической регрессии с использованием адаптивных пермутаций PLINK [27] (максимум 1000000 перестановок).Неравновесие по сцеплению между вариантами в области 1,4 т.п.н. выше сайта начала трансляции гена SIRT1, выявление однонуклеотидных полиморфизмов (SNP) метки в регионе и ассоциация гаплотипических заболеваний были выполнены с использованием программного обеспечения Haploview 4.0 (www.hapmap. org). Статистическая мощность этого исследования для каждого полиморфизма была оценена с использованием программного обеспечения PS версии 2.1.31 [28]. Статистический анализ в основном проводился с использованием статистического пакета для программы социальных наук (SPSS версии 13.0; SPSS, Чикаго, Иллинойс).

Функциональная характеристика полиморфизмов промоторной области SIRT1 с использованием двойного люциферазного анализа

Дистальная область перед сайтом начала трансляции гена SIRT1, охватывающая SNP rs12778366, rs3758391, rs7476338 и rs35706870, была амплифицирована от лиц с уже генотипированным происхождением и с использованием следующие праймеры: прямой 5 ‘ACGCAACCAAAGATGGTTTT 3’ и обратный 5 ‘ACCTTTGACGTGGAGGTTTG 3’. Амплифицированные продукты клонировали в векторе клонирования TOPO (Invitrogen, Carisbad, CA).Затем их переваривали SacI и XhoI (New England Biolabs, США) для клонирования в вектор-промотор pGL3 (Promega, Madison, WI). Вектор pGL3-Promoter содержит промотор SV40 перед геном люциферазы и помогает идентифицировать элементы энхансера. Та же самая область была также клонирована в базовом векторе pGL3 (Promega, Madison, WI), чтобы установить, проявляет ли эта область минимальную промоторную активность, поскольку в этом векторе отсутствуют эукариотические промоторные и энхансерные последовательности. Секвенирование (ABI Prism 3100 – Avant Genetic Analyzer, Applied Biosystems) было выполнено для подтверждения положительных клонов и аллельного статуса упомянутых SNP.Репортерная система анализа двойной люциферазы (люцифераза светлячка и люцифераза Renilla) (Promega) была использована для выполнения анализов люциферазы (в трех повторах) для различных комбинаций аллелей упомянутых полиморфизмов. Активность репортерного гена корректировали на фоновую люминесценцию, а затем на различия в плотности клеток и эффективности трансфекции путем деления активности люциферазы светлячка на активность люциферазы Renilla. Подробная методология временной трансфекции клеточной линии карциномы шейки матки человека (клетки HeLa) и анализа люциферазы представлена ​​в другом месте [29].Проксимальный участок к сайту начала трансляции (охватываемый праймерами: прямой 5 ‘TGCACGTGAGAAAACTGAGG 3’ и обратный 5 ‘CTTCCAACTGCCTCTCTGG 3’) был клонирован в базовом векторе pGL3 (Promega, Madison, WI), но варианты в этом районе не показали значительной разницы. в активности люциферазы (данные не показаны).

Результаты Генотипическое распределение полиморфизмов промоторной области SIRT1

Из 11 генотипированных SNP промоторной области гена SIRT1 только 7 SNP (rs12778366, rs3758391, rs35706870, rs3740051, rs932658, rs37400 Indian53) были обнаружены в северном полиморфном полиморфе. популяция (таблица S2 и рис.1). Все полиморфизмы наблюдались с высокой LD (D’≥0,79) (рис. 1). Гаплотипы у 1542 человек были проанализированы с помощью программы Haploview. Всего было обнаружено восемь гаплотипов (таблица S3 и рис. 1). Гаплотип «TCAACAC» в семи полиморфных SNP (rs12778366, rs3758391, rs35706870, rs3740051, rs932658, rs3740053 и rs2394443) наблюдался с самой высокой частотой 0,481 в популяции Северной Индии. Ни один из гаплотипов не показал значительной разницы в частотном распределении между случаями и контролем (Таблица S3).Четыре тега SNP (рис. 1) выявили 100% аллелей (в области 1,46 т.п.н. выше сайта начала трансляции гена SIRT1) со средним значением r 2 , равным 1,0 в исследуемой группе населения. rs12778366 и rs35706870 были неинформативными для любых других SNP, тогда как rs3758391 мог захватывать аллели на rs932658, rs2394443 и rs3758391; rs3740053 был информативным для захвата аллелей rs3740053 и rs3740051 (рис. 1).

Функциональная характеристика полиморфизмов промоторной области SIRT1 Было выполнено

люциферазных анализов для изучения возможной роли полиморфизмов промоторной области SIRT1 в профиле экспрессии гена SIRT1 (рис.2). Мы одновременно тестировали аллели rs12778366 T> C, rs3758391 T> C и rs35706870 A> C как гаплотипы, и были изучены следующие комбинации: все дикие «TTA» (WWW), мутантные по rs12778366; другие дикие «CTA» (MWW), мутант по rs3758391; остальной дикий «TCA» (WMW), мутант по rs35706870; и другие дикие «TTC» (WWM). Наблюдаемые относительные люциферазные активности гаплотипов сравнивали со всеми дикими гаплотипами (WWW). Было замечено, что только гаплотипы MWW показали высокую значимость (p = 0.0004) снижение (> 50%) экспрессии репортерного гена люциферазы (рис. 2). Аналогичная область с гаплотипом (WWW) была также клонирована в базовом векторе pGL3, в котором отсутствуют эукариотические промоторные и энхансерные последовательности. Этот клон не проявлял люциферазной активности, утверждая, что эта область не содержит минимального промотора (активности) гена SIRT1, следовательно, проявляет только энхансерную активность.

10.1371 / journal.pone.0048621.g002 Рисунок 2

Наблюдаемая относительная активность люциферазы.

Показаны относительные активности гаплотипов (с аллелями при rs12778366 T> C, rs3758391 T> C и rs35706870 A> C, соответственно). Комбинации: мутанта (M) по rs12778366 с остальным диким (W), т.е. MWW = «CTA»; мутант по rs3758391 и остающийся диким, т.е. WMW = «TCA»; и мутант по rs35706870 с остальным диким, т.е. WWM = «TTC», сравнивали со всеми дикими, т.е. WWW = «TTA».

Независимый и интерактивный анализ полиморфизмов

Переоценка ассоциации mt-ND3 rs2853826, вариантов PGC1α (rs2970847 и rs81

) и полиморфизмов UCP2 rs659366 с T2D (Таблица S2) в случаях и контролях, генотипированных на полиморфизмы в предложенных гены в настоящем исследовании показали аналогичные значимые ассоциации, как сообщалось ранее [21].PIK3R1 rs3730089, IRS1 rs1801278 и PPP1R3 rs1799999, о которых сообщалось, что они связаны с T2D в литературе, не выявили какой-либо ассоциации в исследованных образцах (Таблица S2).

Для интерактивного анализа было выбрано 1312 образцов (603 случая и 709 контролей) с полной генотипической информацией по всем изученным SNP. Первоначально сравнивали генотипические комбинации любых двух генов. В независимом анализе ни один из полиморфизмов / гаплотипов SIRT1 как таковых не показал значительных различий в распределении между случаями и контролем (Таблица S3).Однако в интерактивном анализе генотипический фон SIRT1 rs12778366 (-1400) (с учетом SIRT1 как восходящего кандидата), по-видимому, показал влияние на OR при анализе генотипов mt-ND3 rs2853826 и UCP2 rs659366 (Таблица 1). Как сообщалось ранее [21], при объединении и сравнении всех трех комбинаций генотипов риска — mt-ND3 rs2853826 A, PGC1α rs81

XA и UCP2 rs659366 GG — с соответствующими комбинациями защитных генотипов наблюдается интерактивный эффект (скорректированное OR = 6.88, 4,30–10,97 при 95% ДИ; p = 6,18 × 10 −13 ) (таблица 1). Интересно, что аддитивный риск увеличивался, когда аналогичное сравнение между генотипами риска и защитными генотипами оценивалось на фоне генотипа SIRT1 rs12778366 TT (скорректированное OR = 8,91, 4,62–17,17 при 95% доверительном интервале; p = 6,5 × 10 −11 ), и этот риск снизился в SIRT1 rs12778366 TX (скорректированное OR = 6,68, 3,92–11,37 при 95% доверительном интервале; p = 2,71 × 10 −12 ) и CX (скорректированное отношение OR = 3,74, 1,54–9,10 при 95% доверительном интервале; p = 8,7 × 10 −4 ) фонов генотипа.На фоне CC это взаимодействие не могло быть выполнено из-за очень малого размера выборки (таблица 1).

10.1371 / journal.pone.0048621.t001 Таблица 1

Интерактивная оценка отношения шансов генотипов mt-ND3 rs2853826, PGC1α rs81

, UCP2 rs659366 в фонах генотипов SIRT1 rs12778366.
n = 1312 образцов (603 случая и 709 контрольных)
OR в фоновом генотипе SIRT1 rs12778366
Полиморфизм гена протестирован Независимое ОШ (95% ДИ), значение p TT (n = 879) TX (n = 1255) CX (n = 433) CC (n = 57)
MT-ND3 RS2853826 A против G 1.48 (1,22–1,82), p = 1,0 × 10 −4 1,47 (1,13–1,92), p = 4,0 × 10 −3 1,38 (1,11–1,38), p = 4,0 × 10 −3 NS NS
PGC1α rs81

 XA против GG 2,67 (2,13–3,33), p = 4,9 × 10 −12 1,94 (1,44–2,60), p = 1,18 × 10 −8 2.12 (1,65–2,72), p = 3,65 × 10 −9 2,18 (1,38–3,45), p = 8,0 × 10 −4 NS
UCP2 rs659366 GG по сравнению с XA 1,45 (1,18–1,78), p = 4,68 × 10 −4 1,75 (1,34–2,29), p = 4,42 × 10 −5 1,60 (1,28–2,0), p = 3,79 × 10 −5 NS NS
* mt-ND3 rs2853826, PGC1α rs81

 и UCP2 rs659366 весь риск (A, XA и GG соответственно) против всех защитных (G, GG и XA соответственно) [эмпирические значения p] 6.88 (4,30–10,97) a , p = 6,18 × 10 −13 [p e = 1,0 × 10 −6 ] 8,91 (4,62–17,17) b , p = 6,5 × 10 −11 [p e = 1,0 × 10 −6 ] 6,68 (3,92–11,37) c , p = 2,71 × 10 −12 [p e = 1,0 × 10 −6 ] 3,74 (1,54–9,10) d , p = 4,0 × 10 −3 [p e = 8,7 × 10 −4 ] NA

Значения P и отношения шансов оцениваются с помощью бинарной логистической регрессии с использованием возраста, пола, ИМТ и центра сбора в качестве ковариант.

NS = Незначительно, NA = Нет данных

*

всех генотипических комбинаций риска (mt-ND3 rs2853826 A, PGC1α rs81

XA, UCP2 rs659366 GG) сравнивали со всеми защитными генотипическими комбинациями (mt-ND3 rs2853826 G, PGC1α rs81

GG, UCP2 rs659366 XA). a = не зависит от фона SIRT1 (n = 292) и фоновых генотипов SIRT1, b = TT (n = 185), c = TX (n = 276) d = CX (n = 107)

e = эмпирические значения p были оценены с помощью логистической регрессии с использованием адаптивных перестановок PLINK (максимум 1000000 перестановок).

Обсуждение

Сложные заболевания, такие как СД2, в последние годы достигли масштабов эпидемии в Азии, особенно в Индии. Это объясняется преобладанием малоподвижного образа жизни и высококалорийной диеты, которые влияют на физиологию человека и уровень экспрессии генов, участвующих в основном в топливном обмене. Следовательно, уместно понять молекулярные основы СД2 и найти потенциальные гены со специфическим генотипическим фоном, обеспечивающие восприимчивость к заболеванию.

SIRT1 активируется в режиме ограничения калорий, который подходит для благоприятного отбора в преобладающих в эволюции условиях застолья и голода. Предполагается, что SIRT1 регулирует несколько нижестоящих генов [13], [15], [20] для поддержания гомеостаза глюкозы в организме. Предыдущие исследования, в том числе наше [21] — [23], показали, что специфические генотипы этих нижестоящих генов с аддитивным взаимодействием приводят к риску развития СД2 [21]. Настоящее исследование показывает, что высокоэкспрессируемый генотип «TT» полиморфизма промоторной области (rs12778366), очевидный с помощью анализа люциферазы in vitro, может влиять на профиль экспрессии SIRT1.На этом фоне генотипы риска mt-ND3 rs2853826, PGC1α rs81

и UCP2 rs659366 показали повышенное влияние на риск развития СД2.

SIRT1 влияет на метаболизм глюкозы в клетках печени путем активации коактиватора транскрипции PGC1α с последующей экспрессией глюконеогенных генов и репрессией гликолитических генов. [18] Кроме того, он участвует в различных путях регуляции [13], [19] в тканях за счет его активации в печени (увеличение выхода глюкозы за счет глюконеогенеза) и белой жировой ткани (высвобождение свободных жирных кислот), а также за счет подавления в поджелудочной железе. β-клетки (меньше секреции инсулина) [20].Эта дифференцированная активность приводит к направлению выхода глюкозы, главным образом, в мозг. Однако в условиях ad libitum экспрессия SIRT1 увеличивается в β-клетках поджелудочной железы [20], что индуцирует усиленный и эффективный GSIS [15], [17] путем репрессии UCP2 [16]. Таким образом, SIRT1 может быть потенциально экономным геном [1], и эта гипотеза может найти подтверждение в недавних наблюдениях, в которых сообщалось, что варианты SIRT1 влияют на риск диабета во взаимодействии с пренатальным воздействием голода [10]. Мы предполагаем, что в процессе эволюции генотип ТТ SIRT1 rs12778366 (-1400) был выбран благоприятно.Это также способствовало низкому уровню секреции инсулина в β-клетках поджелудочной железы при голодании, чтобы направить больше энергии в инсулиннезависимые ткани (мозг и красные кровяные тельца) и меньше — в инсулинозависимые ткани (скелетные мышцы, печень, жировые клетки и т. Д.). и внутренние органы брюшной полости) [2] или сделать больше глюкозы доступным для мозга [3] в качестве эволюционной адаптации из-за сдвига баланса от относительно мышечного образа жизни к более зависимому от мозга [4]. По этой причине в популяции встречается более 80% аллеля Т.Однако этот отбор, который произошел в условиях голодания, оказался причиной беспокойства, потому что в ситуациях ad libitum β-клетки поджелудочной железы будут производить больше инсулина [20] на фоне генотипа TT SIRT1 rs12778366 и будут создать цикл гиперинсулинемии и гипергликемии, если эффективная панкреатическая система не поддерживает гомеостаз глюкозы. Этот гомеостаз, однако, кажется несбалансированным, когда условия генотипа мтДНК и низкая доступность UCP2 побуждают митохондрии продуцировать более активные формы кислорода (АФК) и постепенно повреждают β-клетки, таким образом, со временем развиваясь в T2D.Из наших результатов очевидно, что фон SNP rs12778366 TT показал высокий аддитивный риск (скорректированное OR = 8,91, 4,62-17,17 при 95% доверительном интервале; p = 6,5 × 10 -11 ), когда сообщаемый риск по сравнению с комбинациями защитного генотипа в Сравнивались варианты mt-ND3, PGC1α и UCP2. Вероятное дозозависимое снижение риска наблюдалось, когда генотипы риска mt-ND3 rs2853826 A, PGC1α rs81

XA и UCP2 rs659366 GG оценивались в rs12778366 TX (скорректированный OR = 6,68, 3,92–11,37 при 95% доверительном интервале; p = 2.71 × 10 −12 ) и rs12778366 CX (скорректированное OR = 3,74, 1,54–9,10 при 95% доверительном интервале; p = 8,7 × 10 −4 ). В наших предыдущих исследованиях [21] — [23] мы также показали, что mt-ND3 rs2853826 A, PGC1α rs81

XA и UCP2 rs659366 GG индивидуально и интерактивно обеспечивают риск развития СД2, что объясняется функциональной ролью генов. Mt-ND3 rs2853826 A ассоциирован с повышением продукции митохондриальных АФК [30]. Сообщалось, что UCP2 обеспечивает защитный эффект против АФК, в частности супероксидов митохондриального происхождения [31], [32].PGC1α участвует в митохондриальном биогенезе, адаптивном термогенезе (обзор [33]), как сообщается, играет важную роль в экспрессии UCP2 в β-клетках поджелудочной железы [34] и участвует в индукции ферментов, детоксифицирующих АФК [35]. Это может указывать на то, что относительно низкие генотипы продуцентов SIRT1 rs12778366 (TX / CX / CC) могут обеспечивать защиту, вероятно, из-за меньшего подавляющего эффекта на UCP2, что позволяет эффективно удалять ROS из β-клеток. Однако этого защитного эффекта, вероятно, недостаточно, чтобы избежать полного риска, создаваемого генотипами риска mt-ND3 rs2853826 A, PGC1α rs81

XA и UCP2 rs659366 GG, вызывая повреждение β-клеток поджелудочной железы.

В заключение, наше исследование предполагает важность понимания контекста «мозаики генотипов» вариаций, связанных с определением риска в гене, и характера его взаимодействия с другими генами в пути. Мы предполагаем, что в биологических путях T2D будет несколько слоев разных генотипов известных и неизвестных генов. На экспрессию SIRT1 могут влиять другие функциональные варианты гена. Следовательно, для выводов необходимо тщательное изучение вариаций гена SIRT1 в популяции Северной Индии и расширение настоящей работы на более широкий набор данных.Также было бы интересно посмотреть, будут ли эти наблюдения повторяться в других группах населения. Тем не менее такое исследование, как наше, помимо полногеномных ассоциативных исследований, помогает собрать части мозаики одну за другой и способствует пониманию феноменологии патологии болезни в контексте эволюционного отбора генотипов. в разных группах населения.

Интерактивный эффект полиморфизма промоторной области SIRT1 на восприимчивость к диабету 2 типа у населения Северной Индии

PLoS One.2012; 7 (11): e48621.

,
1
,
2
,
1
,
3
,
*
,
1
,
1
,
4
,
4
 и
1
,
*

Экта Рай

1
Национальный центр прикладной генетики человека, Школа наук о жизни, Университет Джавахарлала Неру, Нью-Дели, Индия,

2
Отделение иммунологии, Юго-западный медицинский центр Юта, Даллас, Техас, Соединенные Штаты Америки,

Сваркар Шарма

1
Национальный центр прикладной генетики человека, Школа наук о жизни, Университет Джавахарлала Неру, Нью-Дели, Индия,

3
Отдел исследований, Техасская больница шотландского обряда, Даллас, Техас, Соединенные Штаты Америки,

Сурабхи Каул

1
Национальный центр прикладной генетики человека, Школа наук о жизни, Университет Джавахарлала Неру, Нью-Дели, Индия,

Камал Джайн

1
Национальный центр прикладной генетики человека, Школа наук о жизни, Университет Джавахарлала Неру, Нью-Дели, Индия,

Кавалджит Матару

4
Департамент генетики человека, Университет Гуру Нанак Дев, Амритсар, Пенджаб, Индия,

Амарджит С.Bhanwer

4
Департамент генетики человека, Университет Гуру Нанак Дев, Амритсар, Пенджаб, Индия,

Рамешвар Н. К. Бамезай

1
Национальный центр прикладной генетики человека, Школа наук о жизни, Университет Джавахарлала Неру, Нью-Дели, Индия,

Цинъян Хуан, редактор

1
Национальный центр прикладной генетики человека, Школа наук о жизни, Университет Джавахарлала Неру, Нью-Дели, Индия,

2
Отделение иммунологии, Юго-западный медицинский центр Юта, Даллас, Техас, Соединенные Штаты Америки,

3
Отдел исследований, Техасская больница шотландского обряда, Даллас, Техас, Соединенные Штаты Америки,

4
Департамент генетики человека, Университет Гуру Нанак Дев, Амритсар, Пенджаб, Индия,

Центрально-китайский педагогический университет, Китай,

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Задуманы и выполнены эксперименты: РНКБ СС АСБ. Проведенные эксперименты: ER SK KJ KM. Проанализированы данные: ER SS. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты анализа: РНКБ АСБ. Написал бумагу: ЭР СС РНКБ.

Поступила 15 июля 2012 г .; Принято 1 октября 2012 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии надлежащего указания автора и источника.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Дополнительные материалы
Таблица S1:
Клинические и другие демографические данные случаев и контроля в настоящем исследовании.

(DOC)

GUID: 8BE2B465-5176-48FB-8BF2-55C57D7DF871

Таблица S2:
Распределение изученных SNP у пациентов с СД2 и контрольной группы в Северной Индии.

(DOC)

GUID: 0DCCEE12-1641-4029-8E9B-C9DFF6BCCBC5

Таблица S3:
Гаплотипическое частотное распределение
SIRT1
Полиморфизм области промотора в случаях и контроле из северной индийской популяции.

(DOC)

GUID: B210E5B9-0786-451A-84C1-57BB89E33A3B

Abstract

Наши предыдущие исследования выявили гены, в основном участвующие в активности β-клеток поджелудочной железы при восприимчивости к диабету 2 типа (T2D) на Севере Индийское население. Недавняя литература о роли SIRT1 в качестве потенциального главного переключателя, модулирующего секрецию инсулина и регулирующего экспрессию генов в β-клетках поджелудочной железы, подтвердила оценку полиморфизма промоторной области SIRT1 в популяции Северной Индии, что является основным направлением настоящего исследования. учиться.1542 образца (692 пациента с СД2 и 850 контрольных) секвенировали для области 1,46 т.п.н. выше сайта начала трансляции гена SIRT1 . Мы выполнили функциональную характеристику полиморфизмов промоторной области SIRT1 с помощью люциферазного анализа и наблюдали однонуклеотидный полиморфизм (SNP), rs12778366, в ассоциации с экспрессией SIRT1. Мы предполагаем, что ТТ, генотип с высокой экспрессией SNP rs12778366 в промоторной области SIRT1 и присутствующий у> 80% населения Северной Индии, был предпочтительным в условиях циклов развития голод-пир, что оказалось причина беспокойства при нынешнем сидячем образе жизни в условиях ad libitum .Анализ ассоциации «случай-контроль» не выявил участия rs12778366 в СД2 как таковой в исследуемой популяции. Однако ранее сообщенные нами комбинации генотипов риска mt- ND3 , PGC1α и UCP2 -866, по сравнению с комбинациями защитных генотипов, на фоне высокоэкспрессирующего генотипа TT SIRT1 SNP rs12778366 , показал очень высокий аддитивный риск [скорректированное отношение шансов (OR) = 8,91; p = 6,5 × 10 −11 ]. Уровень риска был значительно низким на генотипическом фоне TX (OR = 6.68; p = 2,71 × 10 −12 ) и CX (OR = 3,74; p = 4,0 × 10 −3 ). Кроме того, мы проверили другие зарегистрированные полиморфизмы, связанные с T2D: PIK3R1 rs3730089, IRS1, rs1801278 и PPP1R3 rs1799999, которые не выявили какой-либо значимой связи у населения Северной Индии. В данной статье подчеркивается важность взаимодействия генов в биологических путях СД2, сложного заболевания, связанного с образом жизни.

Введение

Было высказано предположение, что тенденция к развитию диабета является результатом метаболических нарушений в функционировании генов, которые развивались как «бережливые» [1], чтобы регулировать эффективное использование запасов топлива во время пира и голодных циклов.Это одна из наиболее известных гипотез, объясняющих генетическую предрасположенность к диабету 2 типа (СД2). Кроме того, низкий уровень секреции инсулина или высокая инсулинорезистентность были предложены для направления большего количества энергии в инсулиннезависимые ткани (мозг и красные кровяные тельца) и меньше в инсулинозависимые ткани (скелетные мышцы, печень, жировые клетки и брюшные клетки). внутренности) [2]. Было высказано предположение, что во время голодания низкий уровень инсулина / инсулинорезистентность делает больше глюкозы доступным для мозга [3], что, согласно недавней гипотезе, получило дальнейшее преимущество из-за сдвига баланса от относительно мышечного образа жизни к образу жизни. более мозгозависимый [4], эволюционная адаптация.Было высказано предположение, что многие гены играют роль в этой эволюции [5] — [8]. Согласно недавней литературе [9] — [11], человеческие сиртуины, особенно SIRT1, по-видимому, участвуют и играют функциональную роль в этом процессе.

Человеческий сиртуин SIRT1, гистондеацетилаза NAD + , регулируется стрессом и статусом питания [12], регулируя многие факторы транскрипции, которые модулируют передачу сигналов эндокринной системы и клеточный метаболизм в различных физиологических контекстах. Роль SIRT1 была продемонстрирована в путях определения питательных веществ и передачи сигналов инсулина, а также в регуляции стрессовых реакций, которые определяют выживаемость клеток, апоптоз и пролиферацию [13].Предполагается, что для гомеостаза глюкозы, частично с помощью β-клеток поджелудочной железы [14], SIRT1 действует как потенциальный главный переключатель в функциях β-клеток [15], в модуляции секреции инсулина [16], [17] и в регуляции активности факторов транскрипции и ко-регуляторов транскрипции, которые участвуют в регуляции экспрессии генов в β-клетках поджелудочной железы [15]. SIRT1 регулирует секрецию инсулина, подавляя разобщающий белок 2 (UCP2) [16]. Он влияет на метаболизм глюкозы в клетках печени, активируя коактиватор транскрипции PGC1 α с последующей экспрессией глюконеогенных генов и репрессией гликолитических генов.[18]. Во время голодания или ограничения калорий SIRT1 участвует в регуляции путей [13], [19] по-разному в тканях, повышая регуляцию в печени (повышенный выход глюкозы за счет глюконеогенеза) и белой жировой ткани (высвобождение свободных жирных кислот) и подавляя регуляцию в β-клетки поджелудочной железы (меньшая секреция инсулина) [20]. Эта дифференциальная активность способствует направлению выработки глюкозы в основном в мозг. Однако в условиях ad libitum (или свободного кормления) экспрессия SIRT1 увеличивается в β-клетках поджелудочной железы, что вызывает усиленную и эффективную глюкозо-стимулированную секрецию инсулина (GSIS) [15], [17] путем репрессии UCP2 [16]. .

Наши исследования СД2 в Северной Индии [21] — [23] предполагают интерактивную роль полиморфизмов генов-кандидатов в митохондриальной НАДН-дегидрогеназе (mt-ND3) 10398G> A, коактиватор-1 рецептора, активируемого пролифератором пероксисом (PGC1 α ) (p.Thr394Thr или p.Gly482Ser) и UCP2-866G> A, в основном участвующие в активности β-клеток поджелудочной железы, влияя на GSIS. Ключевая роль экспрессии SIRT1 в функциях β-клеток поджелудочной железы дала нам повод для дальнейшей оценки возможной интерактивной роли области промотора SIRT1 . SIRT1 потенциально может действовать как «ген бережливости» в азиатских популяциях, в основном у индийцев, у которых меньше случаев ожирения, но более высокая распространенность СД2 в более молодом возрасте [24], вероятно, из-за выраженной дисфункции ранней секреции инсулина. в отношении инсулинорезистентности [25]. В настоящем исследовании также оценивались другие полиморфизмы, которые, как сообщается, связаны с T2D: регуляторная субъединица фосфатидилинозитол-3-киназы (PIK3R1) p.Met326Ile (rs3730089), субстрат 1 рецептора инсулина (IRS1) p.Gly971Arg (rs1801278) и регуляторная субъединица 3 протеинфосфатазы 1 (PPP1R3) p.Asp905Tyr (rs1799999) в генах-кандидатах, известных как ключевые узлы клеточной передачи сигналов ниже инсулина и составляющие инсулинорезистентность.

Материалы и методы

В этом исследовании было проанализировано в общей сложности 1542 хорошо изученных образца (692 случая СД2 и 850 здоровых людей из контрольной группы), принадлежащих к индоевропейской лингвистической группе из Северной Индии (Пенджаб с Джамму и Кашмиром). Диагноз СД2 был поставлен в соответствии с критериями Всемирной организации здравоохранения и с учетом уровня глюкозы натощак> 126 мг / дл.Подробная информация о сборе образцов, а также критерии включения и исключения представлены в наших предыдущих исследованиях [21] — [23]. Клинические данные и другая информация об исследуемых образцах приведены в таблице S1.

Заявление об этике

Письменное информированное согласие было получено от всех участников. Данные были проанализированы анонимно, и исследование было одобрено этическим комитетом Университета Джавахарлала Неру.

Генотипирование полиморфизмов

Геномная ДНК была выделена из периферической крови с помощью стандартного протокола, используемого в лабораториях.Мы секвенировали 1,46 т.п.н. перед сайтом начала трансляции гена SIRT1 и наблюдали одиннадцать SNP (rs12778366, rs3758391, rs7476338, rs35706870, rs3740051, rs34639502, rs3484237975, rs93265835, rs35534 и rs355). Однако только 7 SNP (rs12778366, rs3758391, rs35706870, rs3740051, rs932658, rs3740053 и rs2394443) были обнаружены полиморфными в популяции Северной Индии (Таблица S2 и). Для этого олигонуклеотиды были сконструированы с помощью программы PRIMER 3 [26]. Пару праймеров (прямой 5 ‘ ACGCAACCAAAGATGGTTTT 3′ и обратный 5 ‘ CTTCCAACTGCCTCTCTGG 3′) использовали для амплификации всей области.Общая полученная реакционная смесь для ПЦР составляла 12,5 мкл, содержащая ∼80 нг матричной ДНК, 6,25 пмоль каждого праймера, 300 мкМ dNTP, 1,5 мМ MgCl 2 , 1X реакционный буфер и 0,4 единицы Taq pol. фермент (Bangalore Genei, Индия). Условия цикла были следующими: денатурация при 95 ° C в течение 1 мин, затем отжиг при 62 ° C в течение 1 мин, а затем удлинение при 72 ° C в течение 1,5 мин, повторение 32 цикла с последующим этапом окончательного удлинения при 72 ° C. ° C в течение 10 мин. Продукты ПЦР изначально проверялись в 1.5% агарозный гель, секвенированный с помощью ABI Prism 3100 – Avant Genetic Analyzer (Applied Biosystems, США) и проанализированный в программном обеспечении SeqScape v2.1.1 (Applied Biosystems). Два внутренних праймера (прямой 5 ‘ TGCACGTGAGAAAACTGAGG 3′ и обратный 5 ‘ ACCTTGACGTGGAGGTTTG 3′) также использовали вместе с внешними праймерами для полного секвенирования без каких-либо пробелов. Генотипические данные mt- ND3 (rs2853826), вариантов PGC1α (rs2970847 и rs81

) и UCP2 (rs659366) для образцов были взяты из нашей более ранней публикации [21].Для скрининга полиморфизмов других генов-кандидатов были использованы ранее определенные ПЦР и методики рестрикционного переваривания из литературы: PIK3R1 p.Met326Ile (rs3730089), IRS1 p.Gly971Arg (rs1801278) и PPP1R3 1799p.Asp Для контроля качества и подтверждения рестрикционного переваривания было выполнено прямое секвенирование для скрининга этих полиморфизмов в 250 случайно выбранных образцах, которые показали 100% соответствие, что свидетельствует об отсутствии ошибок в методах рестрикционного переваривания.

Промоторная область гена SIRT1 .

На рисунке представлены подробности 11 промоторных полиморфизмов гена SIRT1 , охватываемых областью 1,46 т.п.н. выше сайта начала трансляции. 4 SNP, помеченные знаком «X», не показали полиморфизма в исследуемой популяции. Значения D ‘представлены в виде графика, чтобы показать неравновесие по сцеплению между 7 наблюдаемыми полиморфными маркерами. Также представлены частоты наблюдаемых гаплотипов и детали выбранных SNP меток и соответствующих аллелей, захваченных среди 7 полиморфных маркеров.

Статистический анализ

Равновесие Харди – Вайнберга было проверено на каждом вариантном локусе в таблице сопряженности наблюдаемых и прогнозируемых частот генотипов с использованием критерия хи-квадрат. Категориальные переменные сравнивались с использованием критерия хи-квадрат (χ 2 ). Непрерывные данные были показаны как среднее ± стандартное отклонение. Логистический регрессионный анализ использовался для определения независимых и интерактивных ассоциаций аллельного и генотипического статуса исследуемых полиморфизмов с СД2.Также были внесены поправки на возраст, пол, индекс массы тела (ИМТ) и центр сбора образцов. Поправка Бонферрони была принята для проверки множественных гипотез.

Взаимодействие между различными генотипами (разными генами) было установлено в основном с помощью бинарной логистической регрессии в статистическом пакете для программы социальных наук (SPSS версии 13.0; SPSS, Чикаго, Иллинойс). Комбинации генотипов риска и защиты для mt- ND3, rs2853826, PGC1α, rs81

и UCP2, rs659366GG, были впервые установлены (Таблица S2), о чем также сообщалось в нашем предыдущем исследовании [21].Кроме того, рассматривая SIRT1 в качестве восходящего кандидата, индивидуумы с генотипическим фоном SIRT1 rs12778366 (-1400) (TT, TX, CX) были классифицированы, а генотипические распределения риска и защиты нижестоящих генов-кандидатов: mt- ND3 rs2853826, PGC1α rs81

и UCP2 rs659366GG были оценены на этих фонах индивидуально и вместе. Эти распределения в случаях и контроле использовались для оценки отношения нечетности (OR) при 95% доверительном интервале (CI) и соответствующих значениях p .Эмпирические значения p были также оценены для всех генотипов риска по сравнению с защитными генотипами mt-ND3 rs2853826, PGC1 α rs81

и UCP2 rs659366 в генотипических фонах SIRT1 rs12778366 (-1400) (TT, TX, CX) с использованием логистической регрессии. [27] адаптивные перестановки (максимум 1 000 000 перестановок). Неравновесие по сцеплению между вариантами в области 1,4 т.п.н. выше сайта начала трансляции гена SIRT1, обнаружение однонуклеотидных полиморфизмов (SNP) метки в регионе и ассоциация гаплотипических заболеваний были выполнены с использованием Haploview 4.0 (www.hapmap.org). Статистическая мощность этого исследования для каждого полиморфизма была оценена с использованием программного обеспечения PS версии 2.1.31 [28]. Статистический анализ в основном проводился с использованием статистического пакета для программы социальных наук (SPSS версии 13.0; SPSS, Чикаго, Иллинойс).

Функциональная характеристика полиморфизмов промоторной области SIRT1 с использованием двойного люциферазного анализа

Дистальная область выше сайта начала трансляции гена SIRT1 , охватывающая SNPs rs12778366, rs3758391, амплифицированная rs747633870 и уже генотипированная с rs35 и известный генотипический фон с использованием следующих праймеров: прямой 5 ‘ ACGCAACCAAGATGGTTTT 3′ и обратный 5 ‘ ACCTTTGACGTGGAGGTTTG 3′.Амплифицированные продукты клонировали в векторе клонирования TOPO (Invitrogen, Carisbad, CA). Затем их переваривали SacI и XhoI (New England Biolabs, США) для клонирования в вектор-промотор pGL3 (Promega, Madison, WI). Вектор pGL3-Promoter содержит промотор SV40 перед геном люциферазы и помогает идентифицировать элементы энхансера. Та же самая область была также клонирована в базовом векторе pGL3 (Promega, Madison, WI), чтобы установить, проявляет ли эта область минимальную промоторную активность, поскольку в этом векторе отсутствуют эукариотические промоторные и энхансерные последовательности.Секвенирование (ABI Prism 3100 – Avant Genetic Analyzer, Applied Biosystems) было выполнено для подтверждения положительных клонов и аллельного статуса упомянутых SNP. Репортерная система анализа двойной люциферазы (люцифераза светлячка и люцифераза Renilla) (Promega) была использована для выполнения анализов люциферазы (в трех повторах) для различных комбинаций аллелей упомянутых полиморфизмов. Активность репортерного гена корректировали на фоновую люминесценцию, а затем на различия в плотности клеток и эффективности трансфекции путем деления активности люциферазы светлячка на активность люциферазы Renilla.Подробная методология временной трансфекции клеточной линии карциномы шейки матки человека (клетки HeLa) и анализа люциферазы представлена ​​в другом месте [29]. Проксимальный участок к сайту начала трансляции (охватываемый праймерами: прямой 5 ‘ TGCACGTGAGAAAACTGAGG 3′ и обратный 5 ‘ CTTCCAACTGCCTCTCTGG 3′) был клонирован в базовый вектор pGL3 (Promega, Madison, WI), но варианты в этом районе не показывают существенной разницы в активности люциферазы (данные не показаны).

Результаты

Генотипическое распределение полиморфизмов промоторной области

SIRT1

Из 11 генотипированных SNP промоторной области гена SIRT1 только 7 SNP (rs12778366, rs3758391, rs353768400, rs35705365, rs35375365 и rs2394443) были обнаружены полиморфными в популяции Северной Индии (Таблица S2 и).Все полиморфизмы наблюдались с высокой LD (D’≥0,79) (). Гаплотипы у 1542 человек были проанализированы с помощью программы Haploview. Всего наблюдали восемь гаплотипов (Таблица S3 и). Гаплотип «TCAACAC» в семи полиморфных SNP (rs12778366, rs3758391, rs35706870, rs3740051, rs932658, rs3740053 и rs2394443) наблюдался с самой высокой частотой 0,481 в популяции Северной Индии. Ни один из гаплотипов не показал значительной разницы в частотном распределении между случаями и контролем (Таблица S3).Четыре тега SNP () выявили 100% аллелей (в области 1,46 т.п.н. выше сайта начала трансляции гена SIRT1 ) со средним значением r
2 из 1,0 в исследуемой группе населения. rs12778366 и rs35706870 были неинформативными для любых других SNP, тогда как rs3758391 мог захватывать аллели на rs932658, rs2394443 и rs3758391; rs3740053 был информативным для захвата аллелей rs3740053 и rs3740051 ().

Функциональная характеристика полиморфизмов промоторной области

SIRT1

Люциферазные анализы были выполнены для изучения возможной роли полиморфизмов промоторной области SIRT1 в профиле экспрессии гена SIRT1 ().Мы одновременно тестировали аллели rs12778366 T> C, rs3758391 T> C и rs35706870 A> C как гаплотипы, и были изучены следующие комбинации: все дикие «TTA» (WWW), мутантные по rs12778366; другие дикие «CTA» (MWW), мутант по rs3758391; остальной дикий «TCA» (WMW), мутант по rs35706870; и другие дикие «TTC» (WWM). Наблюдаемые относительные люциферазные активности гаплотипов сравнивали со всеми дикими гаплотипами (WWW). Было замечено, что только гаплотипы MWW показали высокую значимость ( p = 0.0004) снижение (> 50%) экспрессии репортерного гена люциферазы (). Аналогичная область с гаплотипом (WWW) была также клонирована в базовом векторе pGL3, в котором отсутствуют эукариотические промоторные и энхансерные последовательности. Этот клон не проявлял люциферазной активности, утверждая, что эта область не содержит минимального промотора (активности) гена SIRT1 , следовательно, проявляет только энхансерную активность.

Наблюдаемая относительная активность люциферазы.

Показаны относительные активности гаплотипов (с аллелями при rs12778366 T> C, rs3758391 T> C и rs35706870 A> C, соответственно).Комбинации: мутанта (M) по rs12778366 с остальным диким (W), т.е. MWW = «CTA»; мутант по rs3758391 и остающийся диким, т.е. WMW = «TCA»; и мутант по rs35706870 с остальным диким, т.е. WWM = «TTC», сравнивали со всеми дикими, т.е. WWW = «TTA».

Независимый и интерактивный анализ полиморфизмов

Повторная оценка ассоциации mt-ND3 rs2853826, вариантов PGC1 α (rs2970847 и rs81

) и полиморфизмов UCP2 rs659366 с T2D (таблица S2) в случаях и контроле генотипированные по полиморфизму в предлагаемых генах в настоящем исследовании, показали аналогичные значимые ассоциации, как сообщалось ранее [21].PIK3R1 rs3730089, IRS1 rs1801278 и PPP1R3 rs1799999, о которых сообщалось, что они связаны с T2D в литературе, не выявили какой-либо ассоциации в исследованных образцах (Таблица S2).

Для интерактивного анализа было выбрано 1312 образцов (603 случая и 709 контролей) с полной генотипической информацией по всем изученным SNP. Первоначально сравнивали генотипические комбинации любых двух генов. В независимом анализе ни один из полиморфизмов / гаплотипов SIRT1 per se не показал значительных различий в распределении между случаями и контролем (Таблица S3).Однако в интерактивном анализе генотипический фон SIRT1 rs12778366 (-1400) (рассматривая SIRT1 как восходящего кандидата), по-видимому, показал влияние на OR при анализе генотипов mt-ND3 rs2853826 и UCP2 rs659366 (). Как сообщалось ранее [21], при объединении и сравнении всех трех комбинаций генотипов риска — mt-ND3 rs2853826 A, PGC1 α rs81

XA и UCP2 rs659366 GG — с соответствующими комбинациями защитных генотипов, был получен дополнительный интерактивный эффект (скорректированное OR = 6.88, 4,30–10,97 при 95% ДИ; p = 6,18 × 10 −13 ) (). Интересно, что аддитивный риск увеличивался, когда аналогичное сравнение между генотипами риска и защиты оценивалось на фоне генотипа SIRT1 rs12778366 TT (скорректированное OR = 8,91, 4,62–17,17 при 95% доверительном интервале; p = 6,5 × 10 −11 ), и этот риск уменьшился в SIRT1 rs12778366 TX (скорректированное OR = 6,68, 3,92–11,37 при 95% доверительном интервале; p = 2,71 × 10 −12 ) и CX (скорректированное OR = 3.74, 1,54–9,10 при 95% доверительном интервале; p = 8,7 × 10 −4 ) фонов генотипа. В фоновом режиме CC это взаимодействие не могло быть выполнено из-за очень малого размера выборки ().

Таблица 1

Интерактивная оценка отношения шансов mt- ND3 rs2853826, PGC1α rs81

, UCP2 rs659366 генотипов в SIRT1 генотипах rs1277.

5 6 –10,97) a , p = 6,18 × 10 −13 [p e = 1.0 × 10 −6 ]

n = 1312 образцов (603 случая и 709 контрольных)
OR на генотипном фоне SIRT1 rs12778366
Полиморфизм гена протестирован Независимое OR (95% ДИ) , значение p TT (n = 879) TX (n = 1255) CX (n = 433) CC (n = 57)
mt- ND3 rs2853826 A Vs G 1.48 (1,22–1,82), p = 1,0 × 10 −4 1,47 (1,13–1,92), p = 4,0 × 10 −3 1,38 (1,11–1,38), p = 4,0 × 10 — 3 NS NS
PGC1α rs81

 XA Vs GG 2,67 (2,13–3,33), p = 4,9 × 10 −12 1,94 (1,44–2,60), p = 1,18 × 10 −8 2,12 (1,65–2,72 ), p = 3,65 × 10 −9 2,18 (1,38–3,45), p = 8,0 × 10 −4 NS
UCP2 rs659366 GG по сравнению с XA 1.45 (1,18–1,78), p = 4,68 × 10 −4 1,75 (1,34–2,29), p = 4,42 × 10 −5 1,60 (1,28–2,0), p = 3,79 × 10 — 5 NS NS
* mt- ND3 rs2853826, PGC1α rs81

 и UCP2 rs659366 все риски (A, XA и GG соответственно) по сравнению со всеми защитными (G, GG и XA соответственно) [эмпирические значения p.88 8,91 (4,62–17,17) b , p = 6,5 × 10 −11 [p e = 1,0 × 10 −6 ] 6,68 (3,92–11,37 ) c , p = 2,71 × 10 −12 [p e = 1,0 × 10 −6 ] 3,74 (1,54–9,10) d , p = 4,0 × 10 −3 [ p e = 8,7 × 10 −4 ] NA

Обсуждение

Сложные заболевания, такие как T2D, в последние годы достигли масштабов эпидемии в Азии, особенно в Индии.Это объясняется преобладанием малоподвижного образа жизни и высококалорийной диеты, которые влияют на физиологию человека и уровень экспрессии генов, участвующих в основном в топливном обмене. Следовательно, уместно понять молекулярные основы СД2 и найти потенциальные гены со специфическим генотипическим фоном, обеспечивающие восприимчивость к заболеванию.

SIRT1 активируется в режиме ограничения калорий, что соответствует критериям благоприятного отбора в преобладающих в эволюции условиях застолья и голода.Предполагается, что SIRT1 регулирует несколько нижестоящих генов [13], [15], [20] для поддержания гомеостаза глюкозы в организме. Предыдущие исследования, в том числе наше [21] — [23], показали, что специфические генотипы этих нижестоящих генов с аддитивным взаимодействием приводят к риску развития СД2 [21]. Настоящее исследование показывает, что генотип «ТТ» с высокой экспрессией полиморфизма промоторной области (rs12778366), очевидный с помощью анализа люциферазы in vitro , может влиять на профиль экспрессии SIRT1.На этом фоне генотипы риска mt-ND3 rs2853826, PGC1 α rs81

и UCP2 rs659366 показали повышенное влияние на риск развития СД2.

SIRT1 влияет на метаболизм глюкозы в клетках печени путем активации коактиватора транскрипции PGC1 α с последующей экспрессией глюконеогенных генов и репрессией гликолитических генов. [18] Кроме того, он участвует в различных путях регуляции [13], [19] в тканях за счет его активации в печени (увеличение выхода глюкозы за счет глюконеогенеза) и белой жировой ткани (высвобождение свободных жирных кислот), а также за счет подавления в поджелудочной железе. β-клетки (меньше секреции инсулина) [20].Эта дифференцированная активность приводит к направлению выхода глюкозы, главным образом, в мозг. Однако в условиях ad libitum экспрессия SIRT1 увеличивается в β-клетках поджелудочной железы [20], что индуцирует усиленный и эффективный GSIS [15], [17] путем репрессии UCP2 [16]. Таким образом, SIRT1 может быть потенциально экономным геном [1], и эта гипотеза может найти подтверждение в недавних наблюдениях, в которых сообщалось, что варианты SIRT1 влияют на риск диабета во взаимодействии с пренатальным воздействием голода [10].Мы предполагаем, что в процессе эволюции генотип ТТ SIRT1 rs12778366 (-1400) был выбран благоприятно. Это также способствовало низкому уровню секреции инсулина в β-клетках поджелудочной железы при голодании, чтобы направить больше энергии в инсулиннезависимые ткани (мозг и красные кровяные тельца) и меньше — в инсулинозависимые ткани (скелетные мышцы, печень, жировые клетки и т. Д.). и внутренние органы брюшной полости) [2] или сделать больше глюкозы доступным для мозга [3] в качестве эволюционной адаптации из-за сдвига баланса от относительно мышечного образа жизни к более зависимому от мозга [4].По этой причине в популяции встречается более 80% аллеля Т. Однако этот отбор, который произошел в условиях голодания, оказался причиной беспокойства, поскольку в ситуациях ad libitum β-клетки поджелудочной железы будут производить больше инсулина [20] на фоне генотипа TT SIRT1. rs12778366 и вызовет цикл гиперинсулинемии и гипергликемии, если эффективная панкреатическая система не поддерживает гомеостаз глюкозы.Этот гомеостаз, однако, кажется несбалансированным, когда условия генотипа мтДНК и низкая доступность UCP2 побуждают митохондрии продуцировать более активные формы кислорода (АФК) и постепенно повреждают β-клетки, таким образом, со временем развиваясь в T2D. Из наших результатов видно, что фон SNP rs12778366 TT показал высокий аддитивный риск (скорректированное OR = 8,91, 4,62–17,17 при 95% доверительном интервале; p = 6,5 × 10 −11 ), когда сообщаемый риск по сравнению с защитным генотипом Сравнивались комбинации в вариациях mt-ND3, PGC1 , α и UCP2.Вероятное дозозависимое снижение риска наблюдалось, когда генотипы риска mt- ND3 rs2853826 A, PGC1α, rs81

XA и UCP2 rs659366 GG оценивались в rs12778366 TX (скорректированный OR = 6,68, 3,92–3,92% CI; p = 2,71 × 10 −12 ) и rs12778366 CX (скорректированное OR = 3,74, 1,54–9,10 при 95% CI; p = 8,7 × 10 −4 ) фонов. В наших предыдущих исследованиях [21] — [23] мы также показали, что mt- ND3 rs2853826 A, PGC1α rs81

XA и UCP2 rs659366 GG индивидуально и в интерактивном режиме обеспечивают риск развития СД2. роль генов.Mt- ND3 rs2853826 A был связан с повышенным продуцированием митохондриальных АФК [30]. Сообщалось, что UCP2 обеспечивает защитный эффект против АФК, в частности супероксидов митохондриального происхождения [31], [32]. PGC1α участвует в митохондриальном биогенезе, адаптивном термогенезе (обзор [33]), как сообщается, играет важную роль в экспрессии UCP2 в β-клетках поджелудочной железы [34] и участвует в индукции ферментов, детоксифицирующих АФК [35]. Это может указывать на то, что относительно низкие генотипы-продуценты SIRT1 rs12778366 (TX / CX / CC) могут обеспечивать защиту, вероятно, из-за меньшего подавляющего эффекта на UCP2, позволяя эффективно удалять ROS из β-клеток.Однако этого защитного эффекта, вероятно, недостаточно, чтобы избежать полного риска, создаваемого генотипами риска mt- ND3 rs2853826 A, PGC1α, rs81

XA и UCP2 rs659366 GG, вызывая повреждение β-клеток поджелудочной железы.

В заключение, наше исследование свидетельствует о важности понимания контекста «мозаики генотипов» вариаций, связанных с определением риска в гене, и характера его взаимодействия с другими генами на пути. Мы предполагаем, что в биологических путях T2D будет несколько слоев разных генотипов известных и неизвестных генов.На экспрессию SIRT1 могут влиять другие функциональные варианты гена. Следовательно, для выводов необходимо тщательное изучение вариаций гена SIRT1 в популяции Северной Индии и расширение настоящей работы на более широкий набор данных. Также было бы интересно посмотреть, будут ли эти наблюдения повторяться в других группах населения. Тем не менее такое исследование, как наше, помимо полногеномных ассоциативных исследований, помогает собрать части мозаики одну за другой и способствует пониманию феноменологии патологии болезни в контексте эволюционного отбора генотипов. в разных группах населения.

Дополнительная информация

Таблица S1

Клинические и другие демографические данные случаев и контроля в настоящем исследовании.

(DOC)

Таблица S2

Распределение изученных SNP у пациентов с СД2 и контрольной группы в Северной Индии.

(DOC)

Таблица S3

Гаплотипическое частотное распределение
SIRT1
Полиморфизм области промотора в случаях и контроле из северной индийской популяции.

(DOC)

Благодарности

Авторы благодарят всех участников исследования за их поддержку.

Отчет о финансировании

Грант DBT для RNKB (NCAHG) и AJSB (GNDU Amritsar) в рамках многоцентрового проекта DBT (BT / PR / 8846 / MED / 12/327/2007). UGC, Индия, грант Национального центра прикладной генетики человека. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Список литературы

2.Суинберн Б.А. (1996) Гипотеза экономного генотипа: как она выглядит через 30 лет? Диабет Мед
13: 695–699. [PubMed] [Google Scholar] 3.
Reaven GM (1998) Гипотеза: мышечная инсулинорезистентность — это («не очень») экономный генотип. Диабетология
41: 482–484. [PubMed] [Google Scholar] 6.
Riedel MJ, Steckley DC, Light PE (2005) Текущее состояние полиморфизма E23K Kir6.2: последствия для диабета 2 типа. Hum Genet
116: 133–145. [PubMed] [Google Scholar] 7. Summermatter S, Mainieri D, Russell AP, Seydoux J, Montani JP, et al.. (2007) Экономный метаболизм, который способствует накоплению жира после ограничения калорийности: роль фосфатидилинозитол-3-киназы в скелетных мышцах и AMP-активируемой протеинкиназы. Фасеб Дж. [PubMed] 8.
Чакраварти М.В., Бут Ф.В. (2004) Еда, упражнения и «бережливые» генотипы: соединение точек на пути к эволюционному пониманию современных хронических заболеваний. J Appl Physiol
96: 3–10. [PubMed] [Google Scholar] 9.
Донг Й., Го Т., Трауриг М., Мейсон С.К., Кобес С. и др. (2011) SIRT1 связан со снижением острой секреции инсулина и повышением риска развития диабета 2 типа у индейцев пима в зависимости от пола.Мол Генет Метаб
104: 661–665. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 10.
Botden IP, Zillikens MC, de RooijSR, Langendonk JG, Danser AH и др. (2012) Варианты гена SIRT1 могут влиять на риск диабета во взаимодействии с пренатальным воздействием голода. Уход за диабетом
35: 424–426. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 11.
Шенк С., Маккарди К.Э., Филп А., Чен М.З., Холлидей М.Дж. и др. (2011) Sirt1 увеличивает чувствительность к инсулину скелетных мышц у мышей во время ограничения калорийности. J Clin Invest
121: 4281–4288.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 12.
Коэн Х.Й., Миллер С., Биттерман К.Дж., Уолл Н.Р., Хеккинг Б. и др. (2004) Ограничение калорийности способствует выживанию клеток млекопитающих за счет индукции деацетилазы SIRT1. Наука
305: 390–392. [PubMed] [Google Scholar] 13.
Ян Т., Фу М., Пестелл Р., Сове А.А. (2006) SIRT1 и эндокринная передача сигналов. Тенденции метаболизма эндокринола
17: 186–191. [PubMed] [Google Scholar] 14.
Saltiel AR, Kahn CR (2001) Передача сигналов инсулина и регуляция метаболизма глюкозы и липидов. Природа
414: 799–806.[PubMed] [Google Scholar] 15.
Leibiger IB, Berggren PO (2005) Роль SIRTain в функции бета-клеток поджелудочной железы. Cell Metab
2: 80–82. [PubMed] [Google Scholar] 16.
Бордон Л., Мотта М.С., Пикард Ф., Робинсон А., Джала США и др. (2006) Sirt1 регулирует секрецию инсулина путем репрессии UCP2 в бета-клетках поджелудочной железы. PLoS Biol
4: e31. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 17.
Мойнихан К.А., Гримм А.А., Плугер М.М., Бернал-Мизрахи Э., Форд Э. и др. (2005) Повышенная доза Sir2 млекопитающих в бета-клетках поджелудочной железы усиливает индуцированную глюкозой секрецию инсулина у мышей.Cell Metab
2: 105–117. [PubMed] [Google Scholar] 18.
Роджерс Дж. Т., Лерин С., Хаас В., Гайги С. П., Шпигельман Б. М. и др. (2005) Контроль гомеостаза глюкозы питательными веществами с помощью комплекса PGC-1alpha и SIRT1. Природа
434: 113–118. [PubMed] [Google Scholar] 19.
Bordone L, Guarente L (2005) Ограничение калорий, SIRT1 и метаболизм: понимание долголетия. Нат Рев Мол Cell Biol
6: 298–305. [PubMed] [Google Scholar] 20.
Gomez-Cabrera MC, Zaragoza R, Pallardo FV, Vina JR (2007) Регулирование SIRT1 сигнальных путей инсулина в печени, белой жировой ткани и поджелудочной железе во время голодания или ограничения калорий.Тенденции метаболизма эндокринола
18: 91–92, ответ автора 93. [PubMed] [Google Scholar] 21.
Рай Э., Шарма С., Коул А., Бхат А. К., Бханвер А. Дж. И др. (2007) Взаимодействие между полиморфизмами p.Thr394Thr и p.Gly482Ser UCP2-866G / A, мтДНК 10398G / A и PGC1alpha p.Thr394Thr и p.Gly482Ser при восприимчивости к диабету 2 типа у населения Северной Индии. Hum Genet
122: 535–540. [PubMed] [Google Scholar] 22.
Бхат А., Коул А., Рай Э., Шарма С., Дхар М.К. и др. (2007) Варианты PGC-1alpha Thr394Thr и Gly482Ser в значительной степени связаны с T2DM в двух популяциях Северной Индии: повторное исследование случай-контроль.Hum Genet
121: 609–614. [PubMed] [Google Scholar] 23.
Бхат А., Коул А., Шарма С., Рай Э., Бухари С.И. и др. (2007) Возможная роль вариантов мтДНК 10398A и 16189C в обеспечении восприимчивости к T2DM в двух популяциях Северной Индии: репликативное исследование. Hum Genet
120: 821–826. [PubMed] [Google Scholar] 24.
Юн К. Х., Ли Дж. Х., Ким Дж. У., Чо Дж. Х., Чой Й. Х. и др. (2006) Эпидемическое ожирение и диабет 2 типа в Азии. Ланцет
368: 1681–1688. [PubMed] [Google Scholar] 25.
Мацумото К., Мияке С., Яно М., Уэки Ю., Ямагути Ю. и др.(1997) Толерантность к глюкозе, секреция инсулина и чувствительность к инсулину у японских субъектов, не страдающих ожирением и страдающих ожирением. Уход за диабетом
20: 1562–1568. [PubMed] [Google Scholar] 26.
Розен С, Скалецкий Х (2000) Primer3 в WWW для обычных пользователей и программистов-биологов. Методы Мол Биол
132: 365–386. [PubMed] [Google Scholar] 27.
Перселл С., Нил Б., Тодд-Браун К., Томас Л., Феррейра М.А. и др. (2007) PLINK: набор инструментов для полногеномных ассоциаций и популяционного анализа сцепления. Am J Hum Genet
81: 559–575.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 28.
Dupont WD, Plummer WD (1997) Программа мощности PS и размера образца доступна бесплатно в Интернете. Контролируемые клинические испытания
18: 274. [Google Scholar] 29.
Гочхайт С., Бухари С.И., Баирва Н., Вадхера С., Дарвиши К. и др. (2007) Влияние полиморфизма нетранслируемой области BRCA2 -26G> A 5 ​​’на предрасположенность к спорадическому раку молочной железы и его модуляция полиморфизмом Arg> Pro кодона 72 p53. Рак молочной железы Res
9: R71. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 30.Canter JA, Kallianpur AR, Parl FF, Millikan RC (2005) Полиморфизм G10398A митохондриальной ДНК и инвазивный рак груди у афроамериканских женщин. Рак Res
65: 8028–8033. [PubMed] [Google Scholar] 31.
Негре-Сальвейр А., Хиртц С., Каррера Дж., Казенав Р., Троли М. и др. (1997) Роль разобщающего белка-2 как регулятора митохондриальной генерации перекиси водорода. FASEB J
11: 809–815. [PubMed] [Google Scholar] 32.
Echtay KS, Roussel D, St-Pierre J, Jekabsons MB, Cadenas S, et al. (2002) Супероксид активирует митохондриальные разобщающие белки.Природа
415: 96–99. [PubMed] [Google Scholar] 33.
Liang H, Bai Y, Li Y, Richardson A, Ward WF (2007) PGC-1alpha-индуцированные митохондриальные изменения в клетках фибробластов 3T3. Ann N Y Acad Sci
1100: 264–279. [PubMed] [Google Scholar] 34.
Оберкофлер Х, Кляйн К., Фелдер Т.К., Кремплер Ф., Патч В. (2006) Роль рецептора-гамма-коактиватора-1альфа, активируемого пролифератором пероксисом, в регуляции транскрипции гена разобщающего белка 2 человека в клетках INS-1E. Эндокринология
147: 966–976. [PubMed] [Google Scholar] 35.Сен-Пьер Дж., Дрори С., Ульдри М., Сильваджи Дж. М., Ри Дж. И др. (2006) Подавление активных форм кислорода и нейродегенерация коактиваторами транскрипции PGC-1. Клетка
127: 397–408. [PubMed] [Google Scholar]

500 — ВНУТРЕННЯЯ ОШИБКА СЕРВЕРА

Существует несколько распространенных причин этого кода ошибки, включая проблемы с отдельным сценарием, который может быть выполнен по запросу. Некоторые из них легче обнаружить и исправить, чем другие.

Владение файлами и каталогами

Сервер, на котором вы находитесь, в большинстве случаев запускает приложения очень специфическим образом.Сервер обычно ожидает, что файлы и каталоги принадлежат вашему конкретному пользователю пользователь cPanel . Если вы самостоятельно внесли изменения в право собственности на файл через SSH, пожалуйста, сбросьте владельца и группу соответствующим образом.

Разрешения для файлов и каталогов

Сервер, на котором вы находитесь, в большинстве случаев запускает приложения очень специфическим образом. Сервер обычно ожидает, что файлы, такие как HTML, изображения и другие носители, будут иметь режим разрешений 644 . Сервер также ожидает, что режим разрешений для каталогов в большинстве случаев будет установлен на 755 .

(См. Раздел о разрешениях файловой системы.)

Ошибки синтаксиса команд в файле .htaccess

В файле .htaccess вы могли добавить строки, которые конфликтуют друг с другом или являются недопустимыми.

Если вы хотите проверить конкретное правило в вашем файле .htaccess, вы можете прокомментировать эту конкретную строку в .htaccess, добавив # в начало строки. Вы всегда должны делать резервную копию этого файла, прежде чем начинать вносить изменения.

Например, если .htaccess выглядит как

DirectoryIndex default.html
Приложение AddType / x-httpd-php5 php

Тогда попробуйте что-нибудь вроде этого

DirectoryIndex default.html
#AddType application / x-httpd-php5 php

Примечание: Из-за способа настройки серверных сред вы не можете использовать аргументы php_value в файле .htaccess.

Превышены ограничения процесса

Возможно, эта ошибка вызвана наличием слишком большого количества процессов в очереди сервера для вашей индивидуальной учетной записи.Каждая учетная запись на нашем сервере может иметь только 25 одновременных активных процессов в любой момент времени, независимо от того, связаны ли они с вашим сайтом или другими процессами, принадлежащими вашему пользователю, такими как почта.

пс искусственный

Или введите это, чтобы просмотреть учетную запись определенного пользователя (не забудьте заменить имя пользователя фактическим именем пользователя):

ps faux | grep имя пользователя

После получения идентификатора процесса («pid») введите его, чтобы убить конкретный процесс (не забудьте заменить pid на фактический идентификатор процесса):

убить pid

Ваш веб-хостинг сможет посоветовать вам, как избежать этой ошибки, если она вызвана ограничениями процесса.Пожалуйста, свяжитесь с вашим веб-хостингом. Обязательно укажите шаги, необходимые, чтобы увидеть ошибку 500 на вашем сайте.

Ib -kaum tus neeg Lavxias npaj tau txais nyiaj hli ntawm Цифровой рубль

  • Рубль tau nkag mus rau hauv Lavxias kev ua lag luam raws li cov pej xeem muaj kev nyaujuhieb kom 909 digital xeem muaj kev nyab xviax 909 цифровой лос нтавм луб хаув паус нйядж хаув луб цайдж нплуодж зиег ксю 2020 vim tias nws yuav zoo li fiat txiaj
  • Nws tseem yuav raug siv rau kev them nyiaj thoob ntiaj tev9 luvhagtu pab cov neeg neeg Lavxias tau npaj kom tau txais nyiaj them nyiaj hauv khoos phib tawj рубли: иб nrab ntawm lawv lees tias lawv pom zoo rau tag nrho cov nyiaj hauv cov qauv no, thiab lwrab nrabe ibu rabe.Qhov no yog qhia nyob rau hauv kev ntsuam xyuas los ntawm HeadHunter (nkag tau los ntawm Известия).

    Kev xa tawm ntawm qhov kev xeem yog npaj rau hauv nruab nrab 2022. Ntawm cov cov neeg pib siv nyiaj yog Сбербанк, ВТБ, Банк Ак Барс, Альфа, Дом.рф Банк, Газпромбанк, Тинькофф, СКБ, Рос Банк, Союз Банк thiab ТКБ Банк. MKB thiab Крымский RNKB xa kev thov rau Lub Tuam Txhab Loj txog lub sijhawm los koom nrog cov pawg sim ntawm cov khoos phis tawj hauv computer.

    — Кев тшадж тавм —

    Тиб луб сиджхавм, 41% нтавм cov neeg nyob hauv qhov tsis sib thooj sib txawv los lees paub ntawm cov nyiaj Кажется nruab xyoo los ntawm cov nyiaj Кажется nruab xyoo los ntawm niabamia kev lag xv lag тиас нвс нюадж рау теб).Txog rau thaum pib ntawm Lub Xya Hli, Lub Txhab Nyiaj Txiag Nruab Nrab nthuav tawm cov rundown ntawm 12 lub tsev txhab nyiaj uas tau nco txog rau cov ntawv sim rau kev sim taw khoosu.

    Цифровой рубль qhia ib xyoo dhau los

    Nws tau teem cia tias cov khoom tshiab yuav tau sim siv kev ua khub thiab tsev neeg kev tsim kho tshiab: nrog lub koom haum ntawm kho tshiab: nrog lub koom haum ntawm uBsteg tshiát, vthavá neev тавм. Lub txhab nyiaj «Dom.rf» кев npaj rau qhov kev xaiv ua tiav los xaiv qhov kev sib sau ua ke ntawm cov neeg mob siab ntseeg siab rau kev kuaj xyuas hom nyiaj tshiab, Олег Тхау Комлик, подразделение цифровых технологий рау Известия.

    Yuav tsum tau Цифровой рубль tau txais, tag nrho cov kws tshaj lij nyiaj txiag, suav nrog tib neeg, cov koom haum, cov tswv cuab nyiaj txiag lag luam thiab cov pej xeem yuusav. Qhov tseeb xws li nyiaj thiab cov nyiaj tsis yog, рубли, lub tshuab компьютерный рубль, yuav ua si txhua qhov ntawm peb qhov ntawm cov nyiaj ntsuab: nws yuav tawm mus raws li cov txembem kexem faejn cov nqi tseem ceeb thiab lub khw muag khoom muaj txiaj ntsig.

    Lub Tuam Txhab Nruab Nrab tau pib tshuaj xyuas nrog kev ua lag luam lub sijhawm ntawm kev nthuav qhia lub khoos phis tawj hauv lub caij nplooj zeeg xyoo homm nwogia nwogia nwogia nwogia nwogia nwb qho qauv nrog nyiaj ntsuab thiab tsis txias txias nyiaj, uas tau muab tso hauv бухгалтерские книги. Txhua tus ntawm peb hom ntawm Lavxias ruble yuav tau zoo sib xws: raws li ib cov nyiaj ruble txuas ib cov nyiaj tsis-ruble, ib qib ruble yuav xwm yeem nce rau txhua tus ntawm lawv.

    Цифровой рубль muaj lub neej tom ntej ci

    Qhab Meem teb, uas yog nyob ze rau kev npaj kho rau Kev Tsim Kev Lag Luam Dawb los ntawm Евразийский экономический союз, xa cov nyiaj qiv nyiaj hauha.

    Ib txoj hauv kev zoo ib yam li nyiaj thiab tsis rub nyiaj, nws yuav siv cov nyiaj rub los them nyiaj rau kev ua haujlwm thiab cov khoom lag luam, ua kev teeb koom xom muse raum muaj nyiaj txiag txav, их nyiaj rau kev sib pauv nrog cov txiaj ntsig thiab cov peev txheej siab.

    Cov cuab yeej cuab tam hauv cov ntawv sau hauv tshuab компьютерный рубль yuav rov los ntawm nyiaj txiag lossis tshuav nyiaj hauv tuam txhab nyiaj ib yam li nyiaj ntsuab. Txhua hom рубли (nyiaj ntsuab, tsis yog nyiaj txiag, siv computer) yuav dhau los ua ib tus. Raws li kev khwv nyiaj txiag txav ntawm lub vev xaib, cov ntawv siv nyiaj hauv computer yuav yog txoj hmoo ntawm cov nyiaj txiag, li tuhia los ntawm Lavxias covy, el tahia los ntawm Lavxias covyus taby.

    Муадж иб кхо юав цум тау уа ком нравм, цим хо ков каув йудж йим, тиаб луб тэб чавс хаув туам тхаб нйядж тсиаг хаув луб тэб чавс туадж йеем сау тау люб кеу куба хов луб хау луб хайва хау луб тау-луб хау хов хов луб хов Рой Сиб Там.

    Москва тау цхай тавм дайм нтавв саблай нтаум ков тххией тххим рубль сиаб таум Луб Каум Хли, тиаб хав ком муадж каув уа нтей нпадж тиав сяу 2021. Тус квс сим тсим тсав тибе цейб хлэ хл , Набиуллина тау хаис.

    Qhov ntawd yuav yog qhov kev txhawj xeeb rau Asmeskas, raws li ib tus neeg dhau los ntawm Asmeskas Cov Neeg Muag Khoom, Michael Greenwald. Lub teb chaws txhab nyiaj hauv koos pis tawj ntawv cov nyiaj tsis sib piv rau cov txiaj ntsig digital, piv txwv li, bitcoin. Lawv tau muab thiab txwv los ntawm cov kws tshaj lij, thiab cov nqi ntawm ib qib ruble yuav nce mus rau ib pob nyiaj, rub Bank of Russia tau tsaib no.

    Криптографический cov nyiaj raug txhaum cai hauv tebchaws Россия txog xyoo tas los, thiab tseem tsis tuaj yeem siv coj los ua pob.Ntau lub teb chaws cov tsev txhab nyiaj thoob plaws hauv lub ntiaj teb tab tom tsim cov qauv nyiaj txiag hauv cov nyiaj txiag, uas cov neeg txhawb nqa tau hais tias kevom kuajia yeja ua tau hais tias kevom kuajia yeja uja ua tau hais tias kevom kuajia yeja ua паув хлоов йудж йим дуа.

    Tau qhov twg los: https://www.thecoinrepublic.com/2021/07/28/one- kaum-russians-ready-to-receive-salary-via-digital-ruble /

    One Year On, Крым Празднует аннексию России, но многие крымчане недовольны

    СИМФЕРОПОЛЬ, Крым. В это прохладное утро понедельника около 200 человек собрались на площади перед зданием местного парламента в столице Крыма.В толпе раздались аплодисменты, когда местные музыканты заявили о своей преданности России со сцены, возвышающейся над волной синих, красных и белых флагов.

    «У меня слезы, глядя на это. Мы наконец-то вернулись домой после стольких лет. Спасибо России, спасибо Путину », — сказала 78-летняя Валентина Решетникова, хвастаясь повышением пенсии в период правления России. Решетникова прервалась, чтобы подбодрить группу местных сил самообороны, которая только что закончила петь о том, как в феврале прошлого года они изгнали украинских «фашистов» с Крымского полуострова.

    Атмосфера резко контрастировала со сценой за пределами того же здания чуть более года назад, когда изгнание президента Украины Виктора Януковича в Киеве 23 февраля 2014 г. и сепаратистские разговоры в парламенте Крыма вызвали столкновения между сторонниками украинского движения. Евромайдан и местные пророссийские группы. Эти события ознаменовали начало двух бурных недель, когда немаркированные воинские контингенты из Москвы захватили полуостров, а кульминацией стало то, что его жители проголосовали за союз с Россией на поспешно организованном и осужденном международным сообществом референдуме.

    Через два дня после объявления Москвой результатов (97 процентов за союз с Россией) президент России Владимир Путин принял лидеров нового парламента Крыма в Кремле, чтобы подписать аннексию полуострова Россией.

    Euphoria Lost

    Празднества в Симферополе в понедельник открыли неделю мероприятий, посвященных годовщине этого голосования. Но прошло 12 месяцев, и чувство эйфории, царившее на улицах в начале 2014 года, в значительной степени исчезло.

    Заметный рост стоимости жизни наряду с резким ростом цен на недвижимость и арендную плату привел к 30-процентному снижению количества посетителей, что нанесло удар по региону, сильно зависящему от туризма. Международные санкции против России прервали транспортное сообщение с Крымом из любого места, кроме Москвы, и заблокировали транзакции Visa и MasterCard, остановив попытки восполнить финансовый вакуум, оставшийся после ухода украинских банков.

    Сторонники возвращения в Россию хвалят то, что в народе называют Крымской весной, за то, что она обратила вспять то, что они считают исторической несправедливостью 1954 года, когда тогдашний советский лидер Никита Хрущев передал полуостров Украине в рамках того, что тогда было чисто административным урегулированием Внутренние границы СССР.Однако, помимо такой символики, у немногих жителей Крыма есть повод для радости.

    «С референдума ничего не изменилось. Дороги по-прежнему плохие, и все те, кто был у власти при Януковиче, все еще у власти », — сказал Павел Мельник, коренной украинец, переехавший в Крым в детстве.

    Как и большинство жителей Крыма, Мельник, который считает прошлогодний референдум фарсом, теперь имеет двойное гражданство. Прошлым летом он неохотно подал прошение о российском паспорте, зная, что без него он не сможет легально работать в Крыму и достичь цели — продать свою квартиру на окраине Симферополя и переехать в центр города.Спустя несколько месяцев он все еще не может найти покупателя, которого не смущает стремительный рост ставок по ипотечным кредитам.

    Хотя затруднительное положение Мельника не является чем-то необычным, не все в столице Крыма разделяют его тревогу. Катя Покровская и ее муж Дмитрий проголосовали за то, чтобы присоединиться к России в марте прошлого года, и, несмотря на то, что на них повлиял переходный период, они по-прежнему уверены, что союз предлагает более радужные перспективы.

    «Киев отказался от экономики Крыма за последние 20 лет. Одновременно происходила ползучая украинизация.Все перешло на украинский язык, от дубляжа в кинотеатрах до инструкций по медицине », — сказал Дмитрий.

    Катя признала, что они с Дмитрием пострадали от экономического кризиса в России. Посещаемость курсов фотографии, которые они проводят в Симферополе, упала на 25 процентов, а аренда помещения для мастерской выросла вдвое.

    «Жить стало тяжелее, но мы адаптируемся. Если один магазин или сервис закроется, мы найдем альтернативу. Мы знали, что при Украине не будет никаких изменений, но, по крайней мере, с Россией есть шанс.Мы голосовали только за этот шанс », — сказала она.

    В понедельник вечером гулянья в Симферополе продолжились большим концертом на городской площади Ленина, на котором присутствовали премьер-министр Крыма Сергей Аксенов и другие представители правительства. Долгожданный визит Путина не состоялся, хотя накануне вечером российский лидер появился на телеэкранах страны, впервые намекнув на то, что аннексия Крыма была заранее спланированной операцией.

    Татары Нацелены

    Поскольку празднование длилось до раннего утра и толпы подвыпивших местных жителей бродили по улицам центра города в ожидании ночного фейерверка, 25-летний Эмир сидел в небольшом подземном кафе курит кальян со своим другом Мустафой.

    Крымский татарин, Эмир принадлежит к этнической группе, которая была массово депортирована с полуострова в 1944 году в соответствии с политикой сталинских карательных перемещений. Вернувшись в большом количестве после распада Советского Союза, крымские татары сейчас составляют около 12 процентов жителей полуострова. После событий прошлого марта их резкое противодействие возвращению российского правления сделало их главной целью подавления властями инакомыслия. Ни Эмир, ни Мустафа не хотели, чтобы его фамилия была опубликована.

    «Когда Крым был частью Украины, антипатия к крымским татарам всегда была скрытой. После аннексии России эти скрытые чувства больше не подавляются », — сказал Эмир.

    Эмир родился в депортации в Узбекистане, позже вместе с родителями переехал в Симферополь. Свободно говорящий по-английски, он работал в Программе развития парламентаризма, осуществляемой USAID, агентством государственной помощи США, до его закрытия в Крыму в 2013 году. Сегодня он является бизнес-консультантом в RNKB, банке, на который в августе прошлого года были введены санкции Запада, и одним из единственные действующие банки в Крыму на сегодняшний день.

    3 мая Эмир был среди примерно 3000 крымских татар, которые приехали к границе полуострова с Украиной, чтобы встретиться с лидером крымскотатарского национального движения Мустафой Джемилевым, который возвращался из Киева на машине после того, как ему ранее отказали во въезде, когда он приземлился в Симферопольский аэропорт.

    «Мы перебрались в Украину, чтобы присоединиться к Джемилеву. Когда мы вернулись на границу, нас встретили сотни русских вооруженных охранников. Они позволили нам вернуться только после долгих переговоров », — сказал он.Джемилев остался в Украине, получив пятилетний запрет на въезд в Крым.

    Тяжелое положение крымских татар было много документированной проблемой еще до аннексии России. Новостные сообщения, предупреждающие об опасности их возвращения, сопровождали их репатриацию в период советской перестройки и на протяжении 1990-х годов. Большинство крымских татар, опрошенных в Симферополе, говорили приглушенным тоном, опасаясь, что их подслушают, и опасаясь, что о них доложат властям.

    «За последний год здесь сблизились украинцы и крымские татары.Но я не скучаю по Украине. Чего я скучаю, так это возможности свободно говорить », — сказал Эмир.

    Наутро после торжеств неожиданная метель накрыла улицы в центре Симферополя, скрывая любые признаки вчерашнего гуляния под толстым слоем снега. Жители города вернулись к работе, больше озабоченные тем, чтобы заработать на жизнь, чем возобновлением праздничных мероприятий, объявленных на следующий день.

    «Не понимаю. Год назад эти люди рисовали синие и желтые полосы на лицах и ходили смотреть футбол (футбол) », — сказал Мельник, имея в виду национальные цвета Украины, сидя в кафе с видом на центральную улицу Карла Маркса.«Столько всего из того, что они сделали, стало возможным благодаря Украине. Я иногда спрашиваю людей:« Если вам не нравилась Украина раньше, почему вы не пошли и не протестовали? »»

    SeatGuru Карта мест Azores Airlines

    1 А Нет Нет питания Сиденье 1 A — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой, расположенное на переборке. Напольное хранилище для личных вещей недоступно для использования во время взлета и посадки.Близость к камбузу и уборной может быть неприятной.
    1 С Нет Нет питания Сиденье 1 C — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой, расположенное на переборке. Напольное хранилище для личных вещей недоступно для использования во время взлета и посадки. Близость к камбузу и уборной может быть неприятной.
    10 А Нет Нет питания Место 10 A — стандартное место эконом-класса.Наклон спинки сиденья ограничен из-за выходного ряда, расположенного прямо позади него.
    10 Б Нет Нет питания Место 10 B — стандартное место эконом-класса. Наклон спинки сиденья ограничен из-за выходного ряда, расположенного прямо позади него.
    10 С Нет Нет питания Место 10 C — стандартное место эконом-класса.Наклон спинки сиденья ограничен из-за выходного ряда, расположенного прямо позади него.
    10 D Нет Нет питания Место 10 D — стандартное место эконом-класса. Наклон спинки сиденья ограничен из-за выходного ряда, расположенного прямо позади него.
    10 E Нет Нет питания Место 10 E — стандартное место эконом-класса.Наклон спинки сиденья ограничен из-за выходного ряда, расположенного прямо позади него.
    10 ф. Нет Нет питания Место 10 F — стандартное место эконом-класса. Наклон спинки сиденья ограничен из-за выходного ряда, расположенного прямо позади него.
    11 А Нет Нет питания Место 11 A — стандартное место эконом-класса, расположенное в выходном ряду.Наклон спинки сиденья ограничен из-за того, что сзади находится другой выходной ряд. Однако есть дополнительное пространство для ног и дополнительное личное пространство из-за ограничения наклона переднего сиденья.
    11 Б Нет Нет питания Место 11 B — стандартное место эконом-класса, расположенное в выходном ряду. Наклон спинки сиденья ограничен из-за того, что сзади находится другой выходной ряд.Однако есть дополнительное пространство для ног и дополнительное личное пространство из-за ограничения наклона переднего сиденья.
    11 С Нет Нет питания Место 11 C — стандартное место эконом-класса, расположенное в выходном ряду. Наклон спинки сиденья ограничен из-за того, что сзади находится другой выходной ряд. Однако есть дополнительное пространство для ног и дополнительное личное пространство из-за ограничения наклона переднего сиденья.
    11 D Нет Нет питания Место 11 D — стандартное место эконом-класса, расположенное в выходном ряду. Наклон спинки сиденья ограничен из-за того, что сзади находится другой выходной ряд. Однако есть дополнительное пространство для ног и дополнительное личное пространство из-за ограничения наклона переднего сиденья.
    11 E Нет Нет питания Место 11 E — стандартное место эконом-класса, расположенное в выходном ряду.Наклон спинки сиденья ограничен из-за того, что сзади находится другой выходной ряд. Однако есть дополнительное пространство для ног и дополнительное личное пространство из-за ограничения наклона переднего сиденья.
    11 ф. Нет Нет питания Место 11 F — стандартное место эконом-класса, расположенное в выходном ряду. Наклон спинки сиденья ограничен из-за того, что сзади находится другой выходной ряд.Однако есть дополнительное пространство для ног и дополнительное личное пространство из-за ограничения наклона переднего сиденья.
    12 А Нет Нет питания Место 12 A — стандартное место эконом-класса, расположенное в выходном ряду. Есть дополнительное пространство для ног и дополнительное личное пространство за счет ограничения наклона переднего сиденья.
    12 B Нет Нет питания Место 12 B — стандартное место эконом-класса, расположенное в выходном ряду.Есть дополнительное пространство для ног и дополнительное личное пространство за счет ограничения наклона переднего сиденья.
    12 С Нет Нет питания Место 12 C — стандартное место эконом-класса, расположенное в выходном ряду. Есть дополнительное пространство для ног и дополнительное личное пространство за счет ограничения наклона переднего сиденья.
    12 D Нет Нет питания Место 12 D — стандартное место эконом-класса, расположенное в выходном ряду.Есть дополнительное пространство для ног и дополнительное личное пространство за счет ограничения наклона переднего сиденья.
    12 E Нет Нет питания Место 12 E — стандартное место эконом-класса, расположенное в выходном ряду. Есть дополнительное пространство для ног и дополнительное личное пространство за счет ограничения наклона переднего сиденья.
    12 ф. Нет Нет питания Место 12 F — стандартное место эконом-класса, расположенное в выходном ряду.Есть дополнительное пространство для ног и дополнительное личное пространство за счет ограничения наклона переднего сиденья.
    13 А Нет Нет питания Место 13 A — стандартное место эконом-класса.
    13 Б Нет Нет питания Место 13 B — стандартное место эконом-класса.
    13 С Нет Нет питания Сиденье 13 C — стандартное место эконом-класса.
    13 Д Нет Нет питания Место 13 D — стандартное место эконом-класса.
    13 E Нет Нет питания Место 13 E — стандартное место эконом-класса.
    13 ф. Нет Нет питания Сиденье 13 F — стандартное место эконом-класса.
    14 А Нет Нет питания Место 14 A — стандартное место эконом-класса.
    14 Б Нет Нет питания Место 14 B — стандартное место эконом-класса.
    14 С Нет Нет питания Место 14 C — стандартное место эконом-класса.
    14 D Нет Нет питания Место 14 D — стандартное место эконом-класса.
    14 E Нет Нет питания Место 14 E — стандартное место эконом-класса.
    14 ф. Нет Нет питания Место 14 F — стандартное место эконом-класса.
    15 А Нет Нет питания Место 15 A — стандартное место эконом-класса.
    15 Б Нет Нет питания Место 15 B — стандартное место эконом-класса.
    15 С Нет Нет питания Место 15 C — стандартное место эконом-класса.
    15 D Нет Нет питания Место 15 D — стандартное место эконом-класса.
    15 E Нет Нет питания Место 15 E — стандартное место эконом-класса.
    15 ф. Нет Нет питания Сиденье 15 F — стандартное место эконом-класса.
    16 А Нет Нет питания Сиденье 16 A — стандартное место эконом-класса.
    16 Б Нет Нет питания Место 16 B — стандартное место эконом-класса.
    16 С Нет Нет питания Сиденье 16 C — стандартное место эконом-класса.
    16 D Нет Нет питания Сиденье 16 D — стандартное место эконом-класса.
    16 E Нет Нет питания Место 16 E — стандартное место эконом-класса.
    16 F Нет Нет питания Сиденье 16 F — стандартное место эконом-класса.
    17 А Нет Нет питания Место 17 A — стандартное место эконом-класса.
    17 Б Нет Нет питания Место 17 B — стандартное место эконом-класса.
    17 С Нет Нет питания Сиденье 17 C — стандартное место эконом-класса.
    17 D Нет Нет питания Сиденье 17 D — стандартное место эконом-класса.
    17 E Нет Нет питания Место 17 E — стандартное место эконом-класса.
    17 ф. Нет Нет питания Сиденье 17 F — стандартное место эконом-класса.
    18 А Нет Нет питания Место 18 A — стандартное место эконом-класса.
    18 Б Нет Нет питания Место 18 B — стандартное место эконом-класса.
    18 С Нет Нет питания Место 18 C — стандартное место эконом-класса.
    18 D Нет Нет питания Место 18 D — стандартное место эконом-класса.
    18 E Нет Нет питания Место 18 E — стандартное место эконом-класса.
    18 F Нет Нет питания Сиденье 18 F — стандартное место эконом-класса.
    19 А Нет Нет питания Место 19 A — стандартное место эконом-класса.
    19 Б Нет Нет питания Место 19 B — стандартное место эконом-класса.
    19 С Нет Нет питания Сиденье 19 C — стандартное место эконом-класса.
    19 Д Нет Нет питания Сиденье 19 D — стандартное место эконом-класса.
    19 E Нет Нет питания Место 19 E — стандартное место эконом-класса.
    19 ф. Нет Нет питания Сиденье 19 F — стандартное место эконом-класса.
    2 А Нет Нет питания Сиденье 2 A — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой.
    2 С Нет Нет питания Сиденье 2 C — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой.Близость к камбузу и уборной может быть неприятной.
    2 Д Нет Нет питания Сиденье 2 D — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой, расположенное на переборке. Напольное хранилище для личных вещей недоступно для использования во время взлета и посадки. Близость к камбузу и уборной может быть неприятной.
    2 E Нет Нет питания Сиденье 2 E — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой, расположенное на переборке.Напольное хранилище для личных вещей недоступно для использования во время взлета и посадки. Близость к камбузу и уборной может быть неприятной.
    2 ф. Нет Нет питания Сиденье 2 F — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой, расположенное на переборке. Напольное хранилище для личных вещей недоступно для использования во время взлета и посадки.Близость к камбузу и уборной может быть неприятной.
    20 А Нет Нет питания Место 20 A — стандартное место эконом-класса.
    20 Б Нет Нет питания Место 20 B — стандартное место эконом-класса.
    20 С Нет Нет питания Место 20 C — стандартное место эконом-класса.
    20 D Нет Нет питания Место 20 D — стандартное место эконом-класса.
    20 E Нет Нет питания Место 20 E — стандартное место эконом-класса.
    20 ф. Нет Нет питания Сиденье 20 F — стандартное место эконом-класса.
    21 А Нет Нет питания Место 21 A — стандартное место эконом-класса.
    21 Б Нет Нет питания Место 21 B — стандартное место эконом-класса.
    21 С Нет Нет питания Сиденье 21 C — стандартное место эконом-класса.
    21 Д Нет Нет питания Место 21 D — стандартное место эконом-класса.
    21 E Нет Нет питания Место 21 E — стандартное место эконом-класса.
    21 ф. Нет Нет питания Сиденье 21 F — стандартное место эконом-класса.
    22 А Нет Нет питания Место 22 A — стандартное место эконом-класса.
    22 Б Нет Нет питания Место 22 B — стандартное место эконом-класса.
    22 С Нет Нет питания Место 22 C — стандартное место эконом-класса.
    22 Д Нет Нет питания Место 22 D — стандартное место эконом-класса.
    22 E Нет Нет питания Место 22 E — стандартное место эконом-класса.
    22 ф. Нет Нет питания Сиденье 22 F — стандартное место эконом-класса.
    23 А Нет Нет питания Место 23 A — стандартное место эконом-класса.
    23 Б Нет Нет питания Место 23 B — стандартное место эконом-класса.
    23 С Нет Нет питания Место 23 C — стандартное место эконом-класса.
    23 Д Нет Нет питания Место 23 D — стандартное место эконом-класса.
    23 E Нет Нет питания Место 23 E — стандартное место эконом-класса.
    23 ф. Нет Нет питания Сиденье 23 F — стандартное место эконом-класса.
    24 А Нет Нет питания Сиденье 24 A — стандартное место эконом-класса.
    24 Б Нет Нет питания Место 24 B — стандартное место эконом-класса.
    24 С Нет Нет питания Сиденье 24 C — стандартное место эконом-класса.
    24 Д Нет Нет питания Сиденье 24 D — стандартное место эконом-класса.
    24 E Нет Нет питания Место 24 E — стандартное место эконом-класса.
    24 ф. Нет Нет питания Сиденье 24 F — стандартное место эконом-класса.
    25 А Нет Нет питания Место 25 A — стандартное место эконом-класса.
    25 Б Нет Нет питания Место 25 B — стандартное место эконом-класса.
    25 С Нет Нет питания Место 25 C — стандартное место эконом-класса.
    25 D Нет Нет питания Место 25 D — стандартное место эконом-класса.
    25 E Нет Нет питания Место 25 E — стандартное место эконом-класса.
    25 ф. Нет Нет питания Сиденье 25 F — стандартное место эконом-класса.
    26 А Нет Нет питания Место 26 A — стандартное место эконом-класса.
    26 Б Нет Нет питания Место 26 B — стандартное место эконом-класса.
    26 С Нет Нет питания Сиденье 26 C — стандартное место эконом-класса.
    26 D Нет Нет питания Сиденье 26 D — стандартное место эконом-класса.
    26 E Нет Нет питания Место 26 E — стандартное место эконом-класса.
    26 ф. Нет Нет питания Сиденье 26 F — стандартное место эконом-класса.
    27 А Нет Нет питания Место 27 A — стандартное место эконом-класса.
    27 Б Нет Нет питания Место 27 B — стандартное место эконом-класса.
    27 С Нет Нет питания Место 27 C — стандартное место эконом-класса. Близость к камбузу и уборной может быть неприятной.
    27 D Нет Нет питания Место 27 D — стандартное место эконом-класса.Близость к камбузу и уборной может быть неприятной.
    27 E Нет Нет питания Место 27 E — стандартное место эконом-класса.
    27 ф. Нет Нет питания Сиденье 27 F — стандартное место эконом-класса.
    28 А Нет Нет питания Место 28 A — стандартное место эконом-класса, расположенное в последнем ряду салона самолета. Наклон спинки сиденья может быть ограничен из-за стены, расположенной прямо за ним. Кроме того, если спинка переднего сиденья откинута назад, личное пространство будет меньше. Близость к камбузу и уборной может быть неприятной.
    28 Б Нет Нет питания Место 28 B — стандартное место эконом-класса, расположенное в последнем ряду салона самолета. Наклон спинки сиденья может быть ограничен из-за стены, расположенной прямо за ним. Кроме того, если спинка переднего сиденья откинута назад, личное пространство будет меньше. Близость к камбузу и уборной может быть неприятной.
    28 С Нет Нет питания Сиденье 28 C — стандартное кресло эконом-класса, расположенное в последнем ряду салона самолета. Наклон спинки сиденья может быть ограничен из-за стены, расположенной прямо за ним. Кроме того, если спинка переднего сиденья откинута назад, личное пространство будет меньше. Близость к камбузу и уборной может быть неприятной.
    28 D Нет Нет питания Сиденье 28 D — стандартное кресло эконом-класса, расположенное в последнем ряду салона самолета. Наклон спинки сиденья может быть ограничен из-за стены, расположенной прямо за ним. Кроме того, если спинка переднего сиденья откинута назад, личное пространство будет меньше. Близость к камбузу и уборной может быть неприятной.
    28 E Нет Нет питания Место 28 E — стандартное место эконом-класса, расположенное в последнем ряду салона самолета. Наклон спинки сиденья может быть ограничен из-за стены, расположенной прямо за ним. Кроме того, если спинка переднего сиденья откинута назад, личное пространство будет меньше. Близость к камбузу и уборной может быть неприятной.
    28 ф. Нет Нет питания Сиденье 28 F — стандартное кресло эконом-класса, расположенное в последнем ряду салона самолета. Наклон спинки сиденья может быть ограничен из-за стены, расположенной прямо за ним. Кроме того, если спинка переднего сиденья откинута назад, личное пространство будет меньше. Близость к камбузу и уборной может быть неприятной.
    3 А Нет Нет питания Сиденье 3 A — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой.
    3 С Нет Нет питания Сиденье 3 C — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой.
    3 D Нет Нет питания Сиденье 3 D — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой.
    3 E Нет Нет питания Сиденье 3 E — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой.
    3 ф. Нет Нет питания Сиденье 3 F — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой.
    4 А Нет Нет питания Сиденье 4 A — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой.
    4 К Нет Нет питания Сиденье 4 C — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой.
    4 D Нет Нет питания Сиденье 4 D — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой.
    4 E Нет Нет питания Сиденье 4 E — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой.
    4 ф. Нет Нет питания Сиденье 4 F — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой.
    5 А Нет Нет питания Сиденье 5 A — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой.
    5 С Нет Нет питания Сиденье 5 C — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой.
    5 D Нет Нет питания Сиденье 5 D — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой.
    5 E Нет Нет питания Сиденье 5 E — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой.
    5 ф. Нет Нет питания Сиденье 5 F — стандартное кресло бизнес-класса с откидной спинкой.
    6 А Нет Нет питания Сиденье 6 A — стандартное сиденье эконом-класса, расположенное у перегородки в виде штор.Размещение перегородки в виде занавеса может быть неудобным.
    6 Б Нет Нет питания Сиденье 6 B — стандартное сиденье эконом-класса, расположенное у перегородки в виде штор. Размещение перегородки в виде занавеса может быть неудобным.
    6 D Нет Нет питания Сиденье 6 D — стандартное сиденье эконом-класса, расположенное у перегородки в виде штор.Размещение перегородки в виде занавеса может быть неудобным.
    6 E Нет Нет питания Сиденье 6 E — стандартное сиденье эконом-класса, расположенное у перегородки в виде штор. Размещение перегородки в виде занавеса может быть неудобным.
    6 ф. Нет Нет питания Сиденье 6 F — стандартное сиденье эконом-класса, расположенное у перегородки в виде штор.Размещение перегородки в виде занавеса может быть неудобным.
    7 А Нет Нет питания Место 7 A — стандартное место эконом-класса.
    7 B Нет Нет питания Место 7 B — стандартное место эконом-класса.
    7 С Нет Нет питания Сиденье 7 C — стандартное кресло эконом-класса с дополнительным пространством для ног из-за отсутствия переднего сиденья. Однако из-за расположения в проходе пассажира могут столкнуть пассажиры и экипаж, проходящие спереди самолета. Столик-поднос установлен в неподвижном подлокотнике, поэтому ширина сиденья немного уменьшена.Напольное хранилище для личных вещей недоступно для использования во время взлета и посадки.
    7 D Нет Нет питания Место 7 D — стандартное место эконом-класса.
    7 E Нет Нет питания Место 7 E — стандартное место эконом-класса.
    7 ф. Нет Нет питания Сиденье 7 F — стандартное место эконом-класса.
    8 А Нет Нет питания Место 8 A — стандартное место эконом-класса.
    8 B Нет Нет питания Место 8 B — стандартное место эконом-класса.
    8 С Нет Нет питания Место 8 C — стандартное место эконом-класса.
    8 D Нет Нет питания Место 8 D — стандартное место эконом-класса.
    8 E Нет Нет питания Место 8 E — стандартное место эконом-класса.
    8 F Нет Нет питания Сиденье 8 F — стандартное место эконом-класса.
    9 А Нет Нет питания Место 9 A — стандартное место эконом-класса.
    9 Б Нет Нет питания Место 9 B — стандартное место эконом-класса.
    9 С Нет Нет питания Место 9 C — стандартное место эконом-класса.
    9 D Нет Нет питания Место 9 D — стандартное место эконом-класса.
    9 E Нет Нет питания Место 9 E — стандартное место эконом-класса.
    9 ф. Нет Нет питания Сиденье 9 F — стандартное место эконом-класса.

    【欧洲 杯 下注 网站】 — 欧洲 杯 下注 网站

    欧洲 杯 下注 网站 概念 股票 有 ： 欧洲 杯 app 、 今晚 足球 比赛 、 美洲 杯 官方 网站
    欧洲 杯 下注 网站 ： Испытание вызвало всеобщее осуждение, в результате чего Совет Безопасности ООН единогласно принял новые санкции, в том числе ограничение поставок нефти из КНДР
    На фотографии, сделанной 14 июня 2017 г., показано место для переселения с целью снижения уровня бедности в уезде Лейбо автономной префектуры Ляншань Йи, провинция Сычуань на юго-западе Китая
    http: // www.zjfukeda.com/images/952664.jpg
    «Он хотел поехать во внутренние провинции, и он имел некоторые знания об Аньхой, поэтому он выбрал Хэфэй в качестве пункта назначения», — сказал Чо
    Ли, следуя в июне 1992 года, рассказывая о своих страданиях. который начался в возрасте 16 лет.
    «Кроме того, конголезское правительство может принять самые строгие стандарты по загрязнению окружающей среды для китайских компаний, а китайские инвесторы будут сознательно следовать правилам и нормам, установленным конголезским правительством», — сказал он.
    сдвиг с тех пор, как этот вопрос был задан в последний раз в 2015 году
    На лице скульптуры изображена Ким Хаксун, кореянка, насильно задержанная в 17 лет японскими солдатами и помещенная в «станцию ​​комфорта»
    «Я сказал ему, что мы только начали здесь, и мы должны провести по крайней мере пять лет в городе, прежде чем решить, стоит ли нам переехать в другое место », — сказал Чо
    Он изо всех сил старался достичь того, что он обещал сделать
    Опрос, опубликованный в сентябре 21 носил заголовок, в котором говорилось, что люди на Филиппинах по-прежнему отдают предпочтение Соединенным Штатам, а не Китаю, но этот разрыв сокращается.
    С момента прихода к власти его исследовательский центр опубликовал серию академических статей в крупных научных журналах, в том числе в Nature, что помогло повысить Международный профиль Шанхайского университета
    Считаете ли вы, что опыт или практика Китая могут быть использованы для решения насущных глобальных проблем? Многие страны находятся в положении, в котором был Китай 40 лет назад, и уроки, извлеченные здесь, в Китае, безусловно, подходят им.

    No related posts.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *