Рко бесплатно для ип: Бесплатные расчетные счета для ИП и ООО открыть онлайн

Рко бесплатно для ип: Бесплатные расчетные счета для ИП и ООО открыть онлайн

Содержание

Хайс — объединили банк для ИП и банк физлиц одном приложении

Хайс — объединили банк для ИП и банк физлиц одном приложенииПОЛНЫЕ ТАРИФЫ

Ваша заявка отправлена

Произошла ошибка, попробуйте снова.

  • Скачайте приложение и зарегистрируйтесь

  • Подтвердите личность на встрече или удалённо

  • Пользуйтесь счётом ИП и Хайс-картой в одном приложении

Скачайте приложение
и зарегистрируйтесь

1 минута

Подтвердите личность
на встрече или удалённо

10 минут

Пользуйтесь счётом ИП и Хайс‑картой в одном приложении

Сколько угодно

Единый тариф за счёт ИП

и карту физлица

Бесплатно на любом тарифе

  • Уплата налогов и взносов УСН 6 %

  • Переводы контрагентам со счёта ИП
    в любые банки

  • Выпуск и обслуживание премиальной Хайс-карты

  • Уведомления об операциях

А так же

  • КШБК 2  % при тратах от 75 000 ₽ или 1 %, если траты меньше

  • Снятия в любых банкоматах по всему миру

Переводы физлицам и самозанятым

200 000 ₽ с комиссией 1 %

от 200 001 ₽ до 500 000 ₽ с комиссией 3 %

от 500 001 ₽ с комиссией 5 %

Перевод на свою Хайс-карту

200 000 ₽ бесплатно

от 200 001 ₽ с комиссией 1 %

ПРЕМИАЛЬНАЯ КАРТА ФИЗЛИЦА

Снятие наличных в любых банкоматах

50 000 ₽ бесплатно

от 50 001 ₽ 2 %, минимум 90 ₽

Переводы по номеру телефона через СБП

100 000 ₽ бесплатно

от 100 001 ₽ с комиссией 0,5 %

Переводы по номеру карты

1,5 %, мин. 30 ₽

Переводы по номеру счета в другие банки

200 000 ₽ бесплатно

от 200 001 ₽ с комиссией 1 %

СТАНДАРТ

690 ₽ 2990 ₽/мес

первые три месяца

Переводы физлицам и самозанятым

200 000 ₽ с комиссией 1 %

от 200 001 ₽ до 500 000 ₽ с комиссией 3 %

от 500 001 ₽ с комиссией 5 %

Перевод на свою Хайс-карту

600 000 ₽ бесплатно

от 600 001 ₽ с комиссией 1 %

ПРЕМИАЛЬНАЯ КАРТА ФИЗЛИЦА

Снятие наличных в любых банкоматах

100 000 ₽ бесплатно

от 100 001 ₽ 2 %, минимум 90 ₽

Переводы по номеру телефона через СБП

100 000 ₽ бесплатно

от 100 001 ₽ с комиссией 0,5 %

Переводы по номеру карты

10 000 ₽ бесплатно

от 10 001 ₽ 1,5 %, минимум 30 ₽

Переводы по номеру счета в другие банки

600 000 ₽ бесплатно

от 600 001 ₽ с комиссией 1 %

ПРЕМИУМ

9990 ₽/мес

Переводы физлицам и самозанятым

200 000 ₽ с комиссией 1 %

от 200 001 ₽ до 500 000 ₽ с комиссией 3 %

от 500 001 ₽ с комиссией 5 %

Перевод на свою Хайс-карту

1 000 000 ₽ бесплатно

от 1 000 001 ₽ с комиссией 1 %

ПРЕМИАЛЬНАЯ КАРТА ФИЗЛИЦА

Снятие наличных в любых банкоматах

500 000 ₽ бесплатно

от 500 001 ₽ 2 %, минимум 90 ₽

Переводы по номеру телефона через СБП

500 000 ₽ бесплатно

от 500 001 ₽ с комиссией 0,5 %

Переводы по номеру карты

100 000 ₽ бесплатно

100 001 ₽ 1,5 %, минимум 30 ₽

Переводы по номеру счета в другие банки

10 000 000 ₽ бесплатно

от 10 000 001 ₽ с комиссией 1 %

ПОЛНЫЕ ТАРИФЫ

Платежи юрлицам и ИП

Расчёт и уплата
налогов и взносов
для ИП на УСН 6 %

Переводы физлицам
и самозанятым

200 000 ₽

с комиссией 1 %

от 200 001 ₽ до 500 000 ₽

с комиссией 3 %

от 500 001 ₽

с комиссией 5 %

200 000 ₽

с комиссией 1 %

от 200 001 ₽ до 500 000 ₽

с комиссией 3 %

от 500 001 ₽

с комиссией 5 %

200 000 ₽

с комиссией 1 %

от 200 001 ₽ до 500 000 ₽

с комиссией 3 %

от 500 001 ₽

с комиссией 5 %

Переводы
на свою Хайс-карту

200 000 ₽

Бесплатно

от 200 001 ₽

с комиссией 1 %

600 000 ₽

Бесплатно

от 600 001 ₽

с комиссией 1 %

1 000 000 ₽

Бесплатно

от 1 000 001 ₽

с комиссией 1 %

ПРЕМИАЛЬНАЯ КАРТА ФИЗЛИЦА

КШБК в рублях
на все покупки

Максимум 15 000 ₽/мес

2 %

при тратах более 75 000 ₽

1 %

если траты меньше

2 %

при тратах более 75 000 ₽

1 %

если траты меньше

2 %

при тратах более 75 000 ₽

1 %

если траты меньше

Снятие наличных
в любых банкоматах

50 000 ₽

Бесплатно

от 50 001 ₽

2 %, минимум 90 ₽

100 000 ₽

Бесплатно

от 100 001 ₽

2 %, минимум 90 ₽

500 000 ₽

Бесплатно

от 500 001 ₽

2 %, минимум 90 ₽

Переводы
по номеру телефона
через СБП

100 000 ₽

Бесплатно

от 100 001 ₽

с комиссией 0,5 %

100 000 ₽

Бесплатно

от 100 001 ₽

с комиссией 0,5 %

500 000 ₽

Бесплатно

от 500 001 ₽

с комиссией 0,5 %

Переводы
по номеру карты

10 000 ₽

Бесплатно

от 10 001 ₽

1,5 %, минимум 30 ₽

100 000 ₽

Бесплатно

от 100 001 ₽

1,5 %, минимум 30 ₽

Переводы
по номеру счета
в другие банки

200 000 ₽

Бесплатно

от 200 001 ₽

с комиссией 1 %

600 000 ₽

Бесплатно

от 600 001 ₽

с комиссией 1 %

10 000 000 ₽

Бесплатно

от 10 000 001 ₽

с комиссией 1 %

ПОЛНЫЕ ТАРИФЫ

Станьте клиентом

уникального банка для ИП

Ваша заявка отправлена

Произошла ошибка, попробуйте снова.

СТАТЬ КЛИЕНТОМ

Откройте счёт

вашему ИП сегодня

Ваша заявка отправлена

Произошла ошибка, попробуйте снова.

Банк,

а не Super App

Ничего лишнего — это просто деньги

Банк,

а не Super App

Ничего лишнего — это просто деньги

Банк,

а не Super App

Ничего лишнего —
это просто деньги

Нужные сервисы, а не спам

Предложим расчёт налогов, а не страховку автомобиля, которого нет

Минимализм, а не яркие цвета

В приложении — функции, нужные вам, а не всему малому бизнесу

Структура, а не бардак

Дизайн не отвлекает от работы: без баннеров и рекламы

Поддержка,

а не смайлы

Дарим эмоции выполненными
задачами, а не смайликами в чате

Поддержка,

а не смайлы

Дарим эмоции выполненными задачами,
а не смайликами в чате

Чат, а не звонки

Решаем задачи текстом, а не ожиданием на линии

24/7, а не с 9 до 18

У экстренных ситуаций нет времени. Спасаем даже в полночь

Решение, а не переключения

Ответим на вопрос, а не пришлём 5 ненужных сообщений

Безопасность,

а не видимость

Устойчивый финансовый сервис —
на деле, а не на словах

Безопасность,

а не видимость

Устойчивый финансовый
сервис — на деле, а не на словах

Хайс — филиал АО КБ Модульбанк

Полноценный банк с лицензией от надежного партнёра: лицензия ЦБ РФ № 1927

Ваши деньги в безопасности

Счета и депозиты ИП и физлиц застрахованы на 1,4 млн.

Предупредим о 115 ФЗ

Предотвратим блокировку, а не будем разбираться с последствиями

Станьте

клиентом Хайса

Ваша заявка отправлена

Произошла ошибка, попробуйте снова.

Ваша заявка отправлена

Произошла ошибка, попробуйте снова.

Банки Москвы — список банков, 3682 адресов отделений, кредиты и вклады 2021

Сбербанк
ВТБ
Газпромбанк
Открытие
Альфа-банк
Россельхозбанк
ЮниКредит Банк
Промсвязьбанк
Райффайзенбанк
Росбанк
Московский кредитный банк
Банк Санкт-Петербург
Банк Россия
Ак Барс Банк
Уралсиб
Ситибанк
СМП Банк
Русский Стандарт
Банк Хоум Кредит
ИНГ Банк (Евразия)
Мособлбанк
Банк Зенит
Восточный банк
Возрождение
Новикомбанк
УБРиР
Абсолют банк
Московский индустриальный банк
ОТП Банк
МТС-Банк
ВБРР
Транскапиталбанк
Кредит-Европа банк
Ренессанс Кредит
Тинькофф Банк
Азиатско-Тихоокеанский банк
ЦентроКредит
Совкомбанк
Банк ДОМ.РФ
МСП Банк
Авангард
Эйч-эс-би-си-(РР)
Инвестторгбанк
Металлинвестбанк
Росгосстрах Банк
Пересвет
СКБ
Дойче банк
Сетелем Банк
Запсибкомбанк
Центр-инвест
БНП Париба
Международный финансовый клуб
г. Москва, Покровка, 43 ст1, 1 этаж. и ещё 3 офиса.
(495)287-02-60
Креди Агриколь КИБ
Локо-банк
Союз
Интеза
СНГБ
Коммерц(Евразия)
г. Москва, Электрозаводская, 27 ст2, 1 этаж. и ещё 2 офиса.
(495)7974800
Почта банк
АйСиБиСи Банк
г. Москва, МКАД 69 км, к17, 1 этаж. и ещё 2 офиса.
(495)2378217
МЕТКОМБАНК
Национальный стандарт
Натиксис Банк
Кубань Кредит
МБА-Москва
Экспобанк
Финсервис
Таврический
Мидзухо Корпорэйт (Москва)
Банк оф Токио-мицубиси юфджей
Еврофинанс Моснарбанк
Фора-банк
Фольксваген рус
СМБСР Банк
ББР Банк
НС Банк
РН Банк
Банк Китая (Элос)
Примсоцбанк
ИПБ
СДМ-банк
Саровбизнесбанк
Севергазбанк
БыстроБанк
Агропромкредит
БКС Банк
Акибанк
Москоммерцбанк
г. Москва, Гусятников переулок, 13/3. и ещё 2 офиса.
8-800-1000-363
Морской банк
Приморье
УРАЛ ФД
Модульбанк
Тимер Банк
г. Москва, Вспольный переулок, 19, 1 этаж. и ещё 2 офиса.
8 800 100 66 77
Газэнергобанк
Кредит Свисс (Москва)
РНКБ
КБ «Солидарность»
БМВ банк
Алмазэргиэнбанк
ДЖ.П.Морган Интернешнл
Ланта-банк
Кубаньторгбанк
Чайна Констракшн Банк
Денизбанк
Энерготрансбанк
Нацинвестпромбанк
Алеф-банк
Норвик Банк
Автоторгбанк
Форштадт
г. Москва, Минская, 1г к1, цокольный этаж. и ещё 2 офиса.
8-800-100-2208
НРБанк
Держава
Генбанк
Квант Мобайл Банк
Аресбанк
Развитие-столица
Пойдём!
НК БАНК
ПСКБ
РосДорБанк
Акцепт
Гарант-Инвест
КИВИ Банк
г. Москва, Дорожная, 60Б, 313 офис; 3 этаж. и ещё 2 офиса.
(495) 231-36-45, 8-800-555-000-5
УРИ Банк
Банк Александровский
Гута Банк
Ишбанк
Прио-Внешторгбанк
г. Троицк, Школьная, 6а, 1 этаж. и ещё 2 офиса.
(4912) 200-003
Солид Банк
Ставропольпромстройбанк
Финам
МБ Банк
Русьуниверсалбанк
Славия
Эс-Би-Ай Банк
Углеметбанк
Джей Энд Ти Банк
г. Москва, Кадашёвская Набережная, 26, 1 этаж. и ещё 2 офиса.
8 (495) 662-45-45
Платина
Инбанк
Заречье
БЖФ Банк
Банк Казани
Азия-Инвест Банк
БАНК БКФ
г. Москва, Красная Пресня, 24, 1, 10 этаж. и ещё 2 офиса.
+7 495 514-08-10
Ресо кредит
г. Москва, Тверская, 28 к2, 1 этаж. и ещё 2 офиса.
+7 495 730-77-55
Промтрансбанк
г. Москва, Моховая, 11 ст13, 1 этаж. и ещё 2 офиса.
(347)2729621
КамчатПрофитБанк
Банк Оранжевый
Кремлевский
Синко-банк
Трансстройбанк
ККБ
Рфк-банк
Москомбанк
МС Банк Рус
НДБ
г. Москва, Комсомольская площадь, 2, 2 этаж; центр Казанский. и ещё 2 офиса и 3 банкомата.
+7 (495) 620-36-33
Раунд
г. Москва, Внуково аэропорт, терминал А, 2 этаж. и ещё 2 офиса.
7 (495) 980 19 24,8 (800) 550 55 00
Северный Народный Банк
Автоградбанк
Ю БИ ЭС банк
Руснарбанк
Индо Банк
Кошелев-банк
Банк Веста
Кэб Банк Рус
Юнистрим
ПроБанк
НОКССБАНК
Зираат Банк (Москва)
Тамбовкредитпромбанк
РБА
Бест Эффортс Банк
Реалист Банк
Москва-сити
Агророс
Евроальянс
Крокус-банк
Евразийский банк
г. Москва, Пресненская Набережная, 8 ст1, 6 этаж; Южная башня. и ещё 2 офиса.
8 800 500 72 00
Первый Инвестиционный Банк
Орбанк
Первый клиентский банк
г. Москва, Дербеневская, 14 к2. и ещё 3 офиса.
(495)7391055
Капитал
Владбизнесбанк
Промсельхозбанк
г. Москва, Калужское шоссе 22 км, 10, 2 этаж. и ещё 4 офиса.
(499)2451562
Унифондбанк
Система
Столичный Кредит
Чайнасельхозбанк
Россита-банк
Кросна-банк
ИК Банк
Социум-банк
ИС Банк
Икано Банк
Максима
Соколовский
Спутник
г. Москва, Садовая-Самотечная, 2/12. и ещё 8 офисов.
(495) 589-10-84
Республиканский Кредитный Альянс
Сервис-резерв
Глобус
МТИ-Банк
г. Москва, Очаковское шоссе, 32, 1 этаж. и ещё 3 офиса.
+7 (495) 739 88 00
Акрополь
Оней Банк
Национальный банк сбережений
Ноосфера
Банк Агора
г. Москва, Пришвина, 8 к2, 1 этаж. и ещё 2 офиса.
8 (495) 788-72-48
Химик
Металлург
Новый век
Банк РМП
г. Москва, Преображенская, 2 к1. и ещё 4 офиса.
+7 (495) 737-86-43, 916-28-78
Тендер-банк
Далена
Спецстройбанк
Внешфинбанк
г. Москва, Рязанский проспект, 77, цокольный этаж. и ещё 4 офиса.
8-800-234-55-10
Прокоммерцбанк
РСИ
Стандарт-кредит
Русьрегионбанк
КБ Космос
г. Москва, Красногвардейский бульвар, 7, 1 этаж. и ещё 2 офиса.
+7 (495) 792 88 92
Дружба
Банк СКС
КБ Альтернатива
г. Москва, Маршала Бирюзова, 16. и ещё 6 офисов.
(495)2239510,9163327
Эко-инвест
Рента-банк
ФФИН Банк
г. Москва, Красногвардейский 1-й проезд, 15, 1 этаж. и ещё 3 офиса и 4 банкомата.
+7 (495) 249-11-62, +7 (800) 302-92-29
Росэксимбанк
Межгосударственный банк
НКО Премиум

Банк Тинькофф и регистрация бизнеса

Если вы приняли решение открыть свой бизнес, то процедуру оформления следует доверить опытному юридическому лицу. Впоследствии не будет проблем с бюрократическими ошибками. Сегодня можно открыть ип бесплатно в Тинькофф Банке. Это может и не совсем даром, но очень выгодно. В онлайн нет очередей, где люди теряют личное время и нервы. Нужно найти несколько свободных минут для подачи заявки. При оформлении своего дела в этом банке, вы получаете партнера в лице банка, который поможет в трудной ситуации. Дистанционное оформление выгодный вариант для лиц, кто ценит свои время и деньги.

Полная регистрация бизнеса под ключ потребует от начинающего предпринимателя, предоставить два документа – паспорт и СНИЛС. Далее к ним прилагаются ИНН и квитанция оплаты регистрационных услуг банка. После регистрации бизнеса можно рассчитывать на выгодные предложения банка Тинькофф:

льготное обслуживание,

подключение функции мобильного приложения,

переход на упрощенную систему налогообложения,

помощь персонального менеджера.

При открытии счета можно получить пакет услуг расчетно-кассового обслуживания, который обойдется по разумной цене. Один звонок оператору сайта и вы узнаете все подробности связанные с открытием ИП.

Под руководством персонального менеджера, сбор документов не будет хлопотным делом. Для регистрации своего дела необходимо иметь бизнес план и устав своего предприятия. Разобраться со всеми юридическими вопросами вам также помогут специалисты банка. При оформлении заявки придется оставить свои контакты, если у сотрудников банковской структуры возникнут неожиданные вопросы.

После авторизации на сайте в личном кабинете вы получите пакет подготовленных документов, которые необходимо подать в налоговую инспекцию. Решение по вашему вопросу примут в течение недели. Открыть ИП бесплатно через банк Тинькофф – правильное решение, которое поможет открыть свое предприятие, и приступить к работе в ближайшее время. Система РКО обеспечит клиента:

технической поддержкой,

с 01:00 до 20:00 – операционный день,

кэшбэк 6 %,реквизиты счета.

При необходимости связь с Тинькофф банком в режиме онлайн. отсутствие банкоматов не проблема для клиентов банка, всегда можно внести оплату посредством другого банковского подразделения, или отправить перевод. оплату перевода выполняют на несколько дней раньше точной даты внесения суммы.

Акционерное Общество “Тинькофф Банк”
ОГРН 1027739642281
23060, город Москва, 1-Й Волоколамский проезд, 10-1.

На правах рекламы

Клиенты ВТБ увеличили спрос на пакеты услуг для бизнеса » Банки и МФО

В первом полугодии число новых пользователей пакетов услуг расчетно-кассового обслуживания ВТБ выросло на 20% по сравнению с аналогичным периодом прошлого года. Всего ими пользуются уже более 400 тысяч предпринимателей.

Наибольшей популярностью у предпринимателей пользуется пакет «Самое важное» − на него перешли более 140 тысяч клиентов среднего и малого бизнеса, что вдвое превышает показатель за шесть месяцев прошлого года. На втором месте – пакет «На старте» с бесплатным годовым обслуживанием, подходящий для начинающего бизнеса с небольшими оборотами.

В оба пакета РКО включены необходимые базовые опции: открытие и обслуживание расчетного счета в рублях, платежи и переводы, в том числе неограниченные платежи клиентам ВТБ, а для ИП – переводы на свои счета и карты физлиц. Пакет «Самое важное» с бесплатным периодом обслуживания на три месяца также предполагает выгодные условия на внесение наличных. Клиенты, подключившие любой пакет услуг, могут бесплатно оформить бизнес-карту ВТБ. С ее помощью можно самостоятельно вносить и снимать наличные в банкоматах и оплачивать бизнес-расходы в формате 24/7.

«При выборе расчетно-кассового обслуживания для начинающего и зрелого бизнеса имеют значение его простота, удобство и возможность сэкономить. Действующая линейка пакетов ВТБ максимально учитывает потребности предпринимателей. Пакеты услуг включают оптимальный объем операций для повседневной работы, а при необходимости клиенты могут подключить дополнительные опции и воспользоваться финансовыми продуктами сверх лимита на выгодных условиях. В дальнейшем мы планируем расширять наши пакеты и добавлять в них полезные сервисы от партнеров банка», − отметила Юлия Копытова, руководитель департамента анализа, координации и продуктового развития — старший вице-президент ВТБ.

В линейку РКО ВТБ входит четыре пакета услуг, рассчитанные на бизнес разного масштаба. Пакеты «Все включено» и «Большие обороты» предназначены для предприятий на этапе активного роста. Клиентам, работающим на международных рынках, доступна опция «ВЭД» со специальными условиями на расчеты с зарубежными партнерами.

По материалам Банка ВТБ

Клиенты ВТБ на 20% увеличили спрос на пакеты услуг для бизнеса

В первом полугодии число новых пользователей пакетов услуг расчетно-кассового обслуживания ВТБ выросло на 20% по сравнению с аналогичным периодом прошлого года. Всего ими пользуются уже более 400 тысяч предпринимателей.

Наибольшей популярностью у предпринимателей пользуется пакет «Самое важное» − на него перешли более 140 тысяч клиентов среднего и малого бизнеса, что вдвое превышает показатель за шесть месяцев прошлого года. На втором месте – пакет «На старте» с бесплатным годовым обслуживанием, подходящий для начинающего бизнеса с небольшими оборотами.

В оба пакета РКО включены необходимые базовые опции: открытие и обслуживание расчетного счета в рублях, платежи и переводы, в том числе неограниченные платежи клиентам ВТБ, а для ИП – переводы на свои счета и карты физлиц. Пакет «Самое важное» с бесплатным периодом обслуживания на три месяца также предполагает выгодные условия на внесение наличных. Клиенты, подключившие любой пакет услуг, могут бесплатно оформить бизнес-карту ВТБ. С ее помощью можно самостоятельно вносить и снимать наличные в банкоматах и оплачивать бизнес-расходы в формате 24/7.

«При выборе расчетно-кассового обслуживания для начинающего и зрелого бизнеса имеют значение его простота, удобство и возможность сэкономить. Действующая линейка пакетов ВТБ максимально учитывает потребности предпринимателей. Пакеты услуг включают оптимальный объем операций для повседневной работы, а при необходимости клиенты могут подключить дополнительные опции и воспользоваться финансовыми продуктами сверх лимита на выгодных условиях. В дальнейшем мы планируем расширять наши пакеты и добавлять в них полезные сервисы от партнеров банка», − отметила Юлия Копытова, руководитель департамента анализа, координации и продуктового развития — старший вице-президент ВТБ.

В линейку РКО ВТБ входит четыре пакета услуг, рассчитанные на бизнес разного масштаба. Пакеты «Все включено» и «Большие обороты» предназначены для предприятий на этапе активного роста. Клиентам, работающим на международных рынках, доступна опция «ВЭД» со специальными условиями на расчеты с зарубежными партнерами.

Подробнее с тарифами и условиями пакетов услуг РКО можно ознакомиться на сайте.

Расходный кассовый ордер (РКО)

Основным бланком, оформляемым при выдаче наличности из кассы компании, является расходный кассовый ордер (РКО). Его необходимо заполнять каждый раз, когда осуществляется расходование денег в ходе осуществления хозяйственной или иной деятельности. Порядок ведения операций по кассе разрешает не применять РКО только предпринимателям, ведущим учет в упрощенном варианте.

Оглавление статьи

Порядок применения расходника

Вступивший с 2014 года нормативный акт определяет, что применять можно не только стандартную форму КО-02, но и разработанные с учетом нужд и особенностей деятельности собственные бланки.

Расходный ордер может составляться бухгалтером, в том числе главным, кассиром, руководителем фирмы (при отсутствии на предприятии бухгалтерии) или наемным специалистом, привлеченным по договору подряда. В этом случае все необходимые подписи проставляет директор организации.

Может использоваться бланк, приобретенный в типографии, а также заполненный с помощью специализированных программ. Расходник не должен содержать никаких исправлений, в противном случае он признается недействительным. Если же ошибка допущена, документ необходимо перевыпустить в правильном варианте.

Основание для расходования денег, за исключением зарплаты, служит заявление работника, подписанное директором фирмы с указанием направления расходования.

Выписанный бланк предъявляется кассиру, который принимает его, проверяет правильность заполнения, наличие всех необходимых подписей. Далее он фиксирует его в журнале регистрации.

Перед выдачей наличных должностное лицо должно затребовать у их получателя документ, удостоверяющий личность. После сверки с ним кассир в соответствующие графы вписывает реквизиты паспорта или иного документа. Затем работник кассы передает денежные средства их получателю, которому нужно их пересчитать и при правильности суммы расписаться в расходнике.

Важно! Если выдача денег осуществляется доверенному лицу, то вместе с паспортом проверяется и доверенность, после чего ее прикладывают к РКО.

Работникам зарплата может выдаваться по расчетно-платежным или платежным ведомостям. В этом случае при их закрытии также составляются расходные ордера на итоговые суммы. Затем документ передается кассиру, который на нем ставит штамп «Оплачено». Вместе с отчетом кассира в конце дня РКО сдается в бухгалтерию.

Расходный кассовый ордер образец заполнения

Рассмотрим образец заполнения РКО.

В верхней части документа пишется название фирмы и ее код согласно справочнику ОКПО. Если бланк относится к какому-либо определенному подразделению, то его название нужно указать ниже. В противном случае здесь ставится «-».

Справа от названия документа «Расходный кассовый ордер» записывается порядковый номер и дата его оформления. Последняя должна иметь вид ДД.ММ.ГГГГ.

В следующую таблицу вносятся данные бухгалтерского учета — корреспондирующие счета по дебету и кредиту, коды структурных подразделений и аналитического учета — если они используются на предприятии. Затем записывается сумма РКО цифрами. Поле «Код целевого назначения» должно заполняться только в том случае, если на фирме разработана и используется необходимая система кодирования.

В поле «Выдать» записываются полные Ф.И.О. человека, которому отпускаются денежные средства из кассы. Не допускается сюда вписывать название предприятия.

В поле «Основание» указываются причины, по которой производится выдача денег. К примеру «Зарплата», «Сдача в банк», «Суточные» и т. д.

В поле «Сумма» записывается сумма документа прописью.

В поле «Приложение» указываются наименования документов, на основании которых производится данная операция — заявление работника, платежная ведомость, квитанция и т. д.

Затем документ подписывается руководителем компании и главным бухгалтером, которые ставят свою личную подпись.

Важно! Ниже получатель денежных средств должен написать вручную получаемую сумму прописью и без сокращений, поставить дату получения и личную подпись. Затем указываются полные реквизиты документа, удостоверяющего личность — паспорта, загранпаспорта, военного билета и т. д.

Кассовый ордер подписывает работник кассы. Далее все расходные и приходные денежные операции заносятся в кассовую книгу.

Нюансы

Если денежные средства выдаются юридическому лицу, то в поле «Выдать» указываются личные данные работника — представителя. В поле «Приложение» нужно записать реквизиты доверенности на получение денег, которая прикладывается к расходному ордеру.

При сдаче наличных средств в банк в поле «Выдать» нельзя писать «Сдача выручки», поскольку это противоречит порядку ведения кассовых операций. Там нужно указывать Ф.И.О. работника, который выполняет данное действие, он же расписывается в документе в получении денег.

При выдаче зарплаты допускается составление одного документа на всю сумму. В этом случае в поле «Выдать» записывается «Работникам предприятия», а в основании реквизиты платежной ведомости. Поля «Получил», «Подпись» и «По» остаются незаполненными.

Скачать бланк расходного кассового ордера

Расходный кассовый ордер бланк скачать Word.

Расходный ордер бланк скачать, в формате Excel.

Скачать образец заполнения расходника по форме КО-2.

Клиенты ВТБ на 20% увеличили спрос на пакеты услуг для бизнеса

В первом полугодии число новых пользователей пакетов услуг расчетно-кассового обслуживания ВТБ выросло на 20% по сравнению с аналогичным периодом прошлого года. Всего ими пользуются уже более 400 тысяч предпринимателей.

Наибольшей популярностью у предпринимателей пользуется пакет «Самое важное» − на него перешли более 140 тысяч клиентов среднего и малого бизнеса, что вдвое превышает показатель за шесть месяцев прошлого года. На втором месте – пакет «На старте» с бесплатным годовым обслуживанием, подходящий для начинающего бизнеса с небольшими оборотами.

В оба пакета РКО включены необходимые базовые опции: открытие и обслуживание расчетного счета в рублях, платежи и переводы, в том числе неограниченные платежи клиентам ВТБ, а для ИП – переводы на свои счета и карты физлиц. Пакет «Самое важное» с бесплатным периодом обслуживания на три месяца также предполагает выгодные условия на внесение наличных. Клиенты, подключившие любой пакет услуг, могут бесплатно оформить бизнес-карту ВТБ. С ее помощью можно самостоятельно вносить и снимать наличные в банкоматах и оплачивать бизнес-расходы в формате 24/7.

«При выборе расчетно-кассового обслуживания для начинающего и зрелого бизнеса имеют значение его простота, удобство и возможность сэкономить. Действующая линейка пакетов ВТБ максимально учитывает потребности предпринимателей. Пакеты услуг включают оптимальный объем операций для повседневной работы, а при необходимости клиенты могут подключить дополнительные опции и воспользоваться финансовыми продуктами сверх лимита на выгодных условиях. В дальнейшем мы планируем расширять наши пакеты и добавлять в них полезные сервисы от партнеров банка», − отметила Юлия Копытова, руководитель департамента анализа, координации и продуктового развития — старший вице-президент ВТБ.

В линейку РКО ВТБ входит четыре пакета услуг, рассчитанных на бизнес разного масштаба. Пакеты «Все включено» и «Большие обороты» предназначены для предприятий на этапе активного роста. Клиентам, работающим на международных рынках, доступна опция «ВЭД» со специальными условиями на расчеты с зарубежными партнерами.

Политика конфиденциальности — RKO Enterprises

Кто мы
Наш адрес сайта: https://rkoenterprises.com.

Какие личные данные мы собираем и почему мы их собираем

Комментарии

Когда посетители оставляют комментарии на сайте, мы собираем данные, показанные в форме комментариев, а также IP-адрес посетителя и строку пользовательского агента браузера, чтобы помочь в обнаружении спама.

Анонимная строка, созданная из вашего адреса электронной почты (также называемая хешем), может быть предоставлена ​​службе Gravatar, чтобы узнать, используете ли вы ее.С политикой конфиденциальности сервиса Gravatar можно ознакомиться здесь: https://automattic.com/privacy/. После одобрения вашего комментария ваше изображение профиля станет общедоступным в контексте вашего комментария.

СМИ

Если вы загружаете изображения на веб-сайт, вам следует избегать загрузки изображений со встроенными данными о местоположении (EXIF GPS). Посетители веб-сайта могут загружать и извлекать любые данные о местоположении из изображений на веб-сайте.

Контактные формы

Печенье

Если вы оставляете комментарий на нашем сайте, вы можете включить сохранение своего имени, адреса электронной почты и веб-сайта в файлах cookie.Это сделано для вашего удобства, чтобы вам не приходилось снова вводить свои данные, когда вы оставляете еще один комментарий. Эти файлы cookie будут храниться в течение одного года.

Если вы посетите нашу страницу входа в систему, мы установим временный файл cookie, чтобы определить, принимает ли ваш браузер файлы cookie. Этот файл cookie не содержит личных данных и удаляется при закрытии браузера.

Когда вы входите в систему, мы также настраиваем несколько файлов cookie, чтобы сохранить вашу информацию для входа и варианты отображения экрана. Файлы cookie для входа хранятся в течение двух дней, а файлы cookie для параметров экрана — в течение года.Если вы выберете «Запомнить меня», ваш логин будет сохраняться в течение двух недель. Если вы выйдете из своей учетной записи, файлы cookie для входа будут удалены.

Если вы редактируете или публикуете статью, в вашем браузере будет сохранен дополнительный файл cookie. Этот файл cookie не содержит личных данных и просто указывает идентификатор публикации статьи, которую вы только что отредактировали. Срок его действия истекает через 1 день.

Встроенный контент с других сайтов
Статьи на этом сайте могут включать встроенный контент (например, видео, изображения, статьи и т. Д.). Встроенный контент с других веб-сайтов ведет себя точно так же, как если бы посетитель посетил другой веб-сайт.Эти веб-сайты могут собирать данные о вас, использовать файлы cookie, встраивать дополнительное стороннее отслеживание и отслеживать ваше взаимодействие с этим встроенным контентом, включая отслеживание вашего взаимодействия со встроенным контентом, если у вас есть учетная запись и вы вошли на этот сайт.

Аналитика

С кем мы делимся вашими данными

Как долго мы храним ваши данные

Если вы оставите комментарий, он и его метаданные сохранятся на неопределенный срок. Это сделано для того, чтобы мы могли автоматически распознавать и одобрять любые последующие комментарии вместо того, чтобы держать их в очереди на модерацию.Для пользователей, которые регистрируются на нашем веб-сайте (если таковые имеются), мы также храним личную информацию, которую они предоставляют в своем профиле пользователя. Все пользователи могут просматривать, редактировать или удалять свою личную информацию в любое время (за исключением того, что они не могут изменить свое имя пользователя). Администраторы веб-сайта также могут просматривать и редактировать эту информацию.

Какие права у вас есть на ваши данные

Если у вас есть учетная запись на этом сайте или вы оставили комментарии, вы можете запросить получение экспортированного файла с личными данными, которые мы храним о вас, включая любые данные, которые вы нам предоставили.Вы также можете потребовать, чтобы мы удалили любые личные данные, которые мы храним о вас. Это не включает какие-либо данные, которые мы обязаны хранить в административных, юридических целях или в целях безопасности.

Куда мы отправляем ваши данные

Комментарии посетителей можно проверить с помощью автоматической службы обнаружения спама.

Ваши Контактные Данные

Дополнительная информация

Как мы защищаем ваши данные

Какие процедуры по защите данных у нас есть

От каких третьих лиц мы получаем данные

Какие автоматизированные решения и / или профилирование мы делаем с пользовательскими данными

Отраслевые нормативные требования к раскрытию информации

[скидка 30%] Точка-Банк: Промокоды и купоны РКО (ООО и ИП)

Часто задаваемые вопросы по Точка-Банку: Купоны РКО (ООО и ИП)

КупонКирин — одно из лучших мест, где можно найти лучший Точка-Банк: коды скидок РКО (ООО и ИП), промокоды и купоны на август 2021 года.Мы работаем с надежными брендами по всему миру, и теперь мы сделали за вас всю тяжелую работу, поэтому вам никогда не придется платить полную цену. Ниже приведены несколько распространенных вопросов по Точка-Банку: Коды купонов РКО (ООО и ИП).

Предлагает ли Точка-Банк: РКО (ООО и ИП) купоны?

На данный момент «КупонКирин» имеет 13 предложений для «Точка-Банк»: РКО (ООО и ИП): 2 промокода и 11 сделок. База купонов обновлена ​​18 августа 2021 года.

Какая сейчас лучшая акция для Точка-Банк: РКО (ООО и ИП)?

Точка-Банк: РКО (ООО и ИП) в среднем предлагает скидку 18%.Лучший купон, доступный на данный момент, — это скидка 30% в разделе «Скидка 30% на отдельные пакеты».

Предлагает ли Точка-Банк: РКО (ООО и ИП) коды праздничных скидок?

Точка-Банк: У РКО (ООО и ИП) потрясающие сделки круглый год. На сегодняшний день «Точка-Банк: РКО» (ООО и ИП) предлагает 8 купонов и скидок «Снова в школу». Не упустите эту удивительную возможность сэкономить свой карман.

Точка-Банк: РКО (ООО и ИП) проводит черную пятницу?

По мере приближения Черной пятницы розничные торговцы снизят цены на значительную часть имеющихся у них запасов до самой низкой цены за год.Точка-Банк: РКО (ООО и ИП) — один из тех магазинов, которые участвуют в этой феерии. Каждый год розничный торговец предлагает невероятные скидки в Черную пятницу, а также потрясающие распродажи в Киберпонедельник.

Проверены ли купоны Точка-Банк: РКО (ООО и ИП)?

CouponKirin имеет несколько сделок с Точка-Банком: РКО (ООО и ИП) из самых разных источников. Если код помечен как «Подтвержденный», это означает, что мы проверили код на couponkirin.com. На данный момент Точка-Банк: РКО (ООО и ИП) предлагает всего 0 проверенных сделок.

Предлагает ли Точка-Банк: РКО (ООО и ИП) коды складских купонов?

Это действительно отличная возможность сэкономить, пользуясь общими предложениями магазина. Поэтому мы собираем предложения по всему магазину «Точка-Банк: РКО», чтобы вы получили значительную скидку на покупку. Воспользуйтесь этими скидками на сайте couponkirin.com, чтобы сэкономить.

Предлагает ли Точка-Банк: РКО (ООО и ИП) купоны на бесплатную доставку?

Купоны на бесплатную доставку иногда требуют минимального заказа.Вот почему CouponKirin отслеживает «настоящие» купоны с бесплатной доставкой без минимальной покупки на couponkirin.com. На данный момент у «Точка-Банк: РКО» (ООО и ИП) действует 1 бесплатная доставка и скидка.

Предлагает ли Точка-Банк: РКО (ООО и ИП) студенческие скидки?

Некоторые продавцы предоставляют студентам скидки, а другие — нет. Посетите couponkirin.com, чтобы узнать, есть ли у них скидки для студентов. Тем не менее, мы можем гарантировать, что вы получите лучшую цену на CouponKirin.

Предлагает ли Точка-Банк: РКО (ООО и ИП) военные скидки?

Военные скидки — это скидки исключительно для действующих лиц, ветеранов и иждивенцев. Некоторые торговцы предоставляют военные скидки, а другие — нет. Посетите tochka.com и убедитесь в этом сами.

Предлагает ли Точка-Банк: РКО (ООО и ИП) скидки для респондентов?

Скидки для респондентов — это скидки исключительно для полиции, пожарной охраны и ЕМТ. Некоторые продавцы предоставляют скидки для респондентов, а другие — нет.Посетите tochka.com и убедитесь в этом сами.

Предлагает ли Точка-Банк: РКО (ООО и ИП) скидки для учителей?

Скидки для учителей — это скидки исключительно для Pre-K, K-12 и профессоров. Некоторые продавцы предоставляют скидки учителям, а другие — нет. Посетите tochka.com и убедитесь в этом сами.

Предлагает ли Точка-Банк: РКО (ООО и ИП) старшие скидки?

Скидки для пенсионеров — это скидки исключительно для пенсионеров (55+). Некоторые продавцы предоставляют старшие скидки, а другие — нет.Посетите tochka.com и убедитесь в этом сами.

Можно ли совмещать купоны Точка-Банк: РКО (ООО и ИП)?

Это зависит от того, какие товары вы покупаете. Убедитесь, что вы делаете покупки со скидкой и соответствуете минимальному порогу бесплатной доставки. И не забудьте подписаться на рассылку новостей Точка-Банк: РКО (ООО и ИП). Как новый клиент, вы имеете право на скидку 10-20% на свой первый заказ.

От редакции

Обратите внимание, что некоторые коды скидок «Точка-Банк: РКО» (ООО и ИП) предоставляются пользователями, срок действия которых может быть непредсказуемым или может не работать.Цены и наличие предложений могут отличаться в зависимости от магазина — и могут быть изменены без предварительного уведомления. Пожалуйста, посетите сайт tochka.com, чтобы узнать окончательную цену, доступность и удобство использования.

Индоссамент

Когда вы покупаете по ссылкам на CouponKirin, мы можем получать партнерскую комиссию. Учить больше

WWE Mayhem в App Store

#BRINGONTHEMAYHEM

WWE Mayhem больше и смелее остальных, с динамичной мобильной аркадой и невероятными движениями!

Играйте за Джона Сину, Скала, Человека-Бекки Линч, Ронду Роузи, Гробовщика, Голдберга и ВСЕХ ваших любимых легенд и суперзвезд WWE в этой динамичной аркадной игре.Поднимите своих суперзвезд WWE на новый уровень в еженедельных испытаниях WWE RAW, NXT и SmackDown Live! Соревнуйтесь на пути к Wrestlemania и приведите своих чемпионов и суперзвезд WWE к победе во вселенной WWE.

Участвуйте в эпических и чудесных схватках между WWE Legends и WWE Superstars, чтобы определить величайшего игрока всех времен, каждый из которых имеет свои собственные фирменные приемы и суперспециальные предложения.

Захватывающий список
Выберите из постоянно растущего списка суперзвезд WWE и легенд WWE, в том числе: Джона Сина, Рок, Гиганта Андре, Triple H, Ксавьера Вудса, AJ Styles, Stone Cold, Стива Остина, Романа Рейнса, Рэнди Ортона. , Стинг, Сет Роллинз, Джиндер Махал, Биг Э, Дьявол, Шарлотта Флер, Бейли, Аска, Алекса Блисс и многие другие бессмертные.

Каждая WWE Legend и WWE Superstar может похвастаться отличительным и очень стилизованным внешним видом, добавляющим к общему зрелищу и атмосфере.

Собирайте, повышайте уровень и управляйте своими командами SuperStars с умом, чтобы получать бонусы за синергию, основанные на принадлежности к команде и взаимоотношениях, взятых из вселенной и чемпионатов WWE.

6 ОТЛИЧИТЕЛЬНЫХ КЛАССОВ SUPERSTARS:
Повысьте уровень WWE Action с 6 отличительными классами персонажей. Создайте превосходный отряд суперзвезд WWE из BRAWLER, HIGH FLYER, POWERHOUSE, TECHNICIAN, WILDCARD и SHOWMAN.Каждый класс обладает уникальными сильными сторонами и боевыми преимуществами.

ТЕГОВАЯ КОМАНДА И ЕЖЕНЕДЕЛЬНЫЕ СОБЫТИЯ:
Создайте свой список могучих суперзвезд WWE и объедините силы с другими чемпионами в матчах ТЕГОВ-КОМАНД. Играйте в насыщенные событиями СОБЫТИЯ, синхронизируемые с реальными шоу WWE Live, такими как Monday Night RAW, SmackDown Live, Clash of Champions PPV и ежемесячные титульные турниры.

НИКОГДА НЕ УВИДЕТЬ ОБРАЩЕНИЯ:
Идеально рассчитайте время разворота, чтобы превратить проигрыш в выигрыш! Создайте свой особый счетчик атаки на протяжении всего столкновения и используйте его как жестокий специальный прием или ОБРАТ.Однако будьте осторожны — ваши развороты могут быть отменены!

ИГРАЙТЕ С ДРУЗЬЯМИ В ЖИВЫХ СОБЫТИЯХ И ПРОТИВ РЕЖИМА:
Создайте свою защиту с любимыми суперзвездами WWE и бросьте вызов своим друзьям в режиме Versus. Выведите свой опыт на новый уровень, добавив в свою команду дополнительных легенд и суперзвезд WWE.

СОБЫТИЯ АЛЬЯНС И АЛЬЯНС
Путешествуйте через уникальные задания и сражения по классическим захватывающим сюжетным линиям WWE.
Объединитесь со своими друзьями и другими Мэйхемерами, чтобы создать сильнейший альянс.
Разрабатывайте стратегию и сражайтесь на вершине событий альянса, чтобы заработать эксклюзивные награды альянса.

НАГРАДЫ И НАГРАДЫ:
Стремитесь получить главный приз — титул чемпиона WWE, чтобы получить драгоценные бонусные награды с каждой победой.Откройте свои чемоданы, чтобы разблокировать новые классы персонажей, золото, бусты, специальные призы и даже суперзвезды WWE высокого уровня!

WWE Mayhem доставит вам адреналин, острые ощущения и азарт настоящего матча WWE!

Испытайте чистые эмоции WWE Action Now — СКАЧАТЬ WWE MAYHEM!

Эта игра совершенно бесплатна для загрузки и использования. Однако некоторые предметы можно приобрести в игре за реальные деньги. Вы можете ограничить внутриигровые покупки в настройках своего магазина.

Рекомендуемое оборудование: iPhone 5 и выше, iPod Touch 6 и выше, iPad 4 и выше, iPad Mini 2 и выше.Требуется iOS 8 или новее

Поставьте нам лайк на Facebook — https://www.facebook.com/WWEMayhemGame/
Подпишитесь на наш Youtube — https://www.youtube.com/c/wwemayhemgame
Подпишитесь на нас в Twitter — https : //twitter.com/wwe_mayhem
Следуйте за нами в Instagram — https://www.instagram.com/wwemayhem/
Присоединяйтесь к сообществу — https://reddit.com/r/WWEMayhem/
https: // www. wwemayhemgame.com/

Подростков из Флориды обвинили в попытке принять участие в реслинге «RKO» на директоре школы

Учащийся средней школы Флориды был арестован за попытку реслинга на директора своей школы.

Студент якобы попробовал «RKO», фирменный нокаутирующий прием, названный в честь суперзвезды WWE Рэнди Ортона. «RKO» означает «Рэнди Кейт Ортон».

Но у директора этого не было. Он заткнул студенту хедлок, пока тот ждал полиции, после чего подросток был арестован.

Студент, 18 лет. годовалую Джанни Сосу обвинили в избиении школьного работника и вмешательстве в деятельность образовательного учреждения.

Следующая остановка для ученицы была перед судьей округа Майами-Дейд, который не мог поверить в то, что она слышала. .

«Он пытался бороться?» — спросил судья в четверг.

«Он буквально делает это с парнем; он его даже не держит. Он буквально делал это, и все », — сказал адвокат студента. «Он должен был быть заключен под стражу, а не арестован».

Студент сказал WSVN, что перед инцидентом он и его директор поигрались.

«До того, как это случилось, мы с директором дрались, играли, — сказал он WSVN в пятницу утром.

Судья нашел, вероятно, повод для обвинений Сосы. Однако судья освободил студента без внесения залога в размере 750 долларов.

Брат и сестра Сосы сказали CBS, что наказание слишком суровое.

«Такое ощущение, что его обвиняют в чем-то, чего он не заслуживает. «Мой брат — хороший парень, и все, что он хотел, — это поиграть и сделать людей счастливыми», — сказал Майк Соса CBS4.

«Это не могло быть насильственным действием.Я имею в виду, что он весит 135 фунтов, и он никак не мог сделать такой шаг, который вы видите в WWE », — добавила Камила Соса.

Школы Майами-Дейд опубликовали заявление о ситуации в четверг.

«Государственные школы округа Майами-Дейд усердно работают над созданием безопасной учебной и рабочей среды для учащихся и сотрудников», — говорится в заявлении. «Очень жаль, что кто-то спровоцирует ситуацию для саморекламы, которая может нанести вред другим. Случаи деструктивного и угрожающего поведения будут незамедлительно устранены, что приведет к серьезным последствиям.Помимо ареста, непредставление студента повлечет за собой дисциплинарные взыскания в соответствии с нашим Кодексом поведения студентов ».

СВЯЗАННЫЕ ИСТОРИИ

Отчетливый клеточный метаболизм кальция в радиационно-чувствительных клетках колоректального рака человека RKO

Korean J Physiol Pharmacol. 2014 Dec; 18 (6): 509–516.

, 1, 2 , 1 , 1 , 3 и 1

Юн Тай Ким

1 Кафедра физиологии и биофизики, Медицинский колледж Инчхонского университета 401, Инчхонский медицинский колледж 401 -751, Корея.

2 Исследовательская группа пищевых продуктов, Корейский научно-исследовательский институт пищевых продуктов, Соннам 463-746, Отдел пищевой биотехнологии, Корейский университет науки и технологий, Тэджон 305-350, Корея.

Су Шин Джо

1 Кафедра физиологии и биофизики, Медицинский колледж Университета Инха, Инчхон 401-751, Корея.

Young Jun Park

1 Кафедра физиологии и биофизики, Медицинский колледж Университета Инха, Инчхон 401-751, Корея.

Myung Za Lee

3 Отделение радиационной онкологии, Медицинский колледж Университета Ханян, Сеул 133-791, Корея.

Chang Kook Suh

1 Кафедра физиологии и биофизики, Медицинский колледж Университета Инха, Инчхон 401-751, Корея.

1 Кафедра физиологии и биофизики, Медицинский колледж Университета Инха, Инчхон 401-751, Корея.

2 Исследовательская группа пищевых продуктов, Корейский научно-исследовательский институт пищевых продуктов, Соннам 463-746, Отдел пищевой биотехнологии, Корейский университет науки и технологий, Тэджон 305-350, Корея.

3 Отделение радиационной онкологии, Медицинский колледж Университета Ханян, Сеул 133-791, Корея.

Автор, ответственный за переписку: Chang Kook Suh. Кафедра физиологии и биофизики, Медицинский колледж Университета Инха, 253 Yong-hyun dong, Nam-gu, Incheon 402-751, Korea. (Тел.) 82-32-890-0921, (Факс) 82-32-884-5997, rk.ca.ahni@huskc

Поступила 21 июля 2014 г .; Пересмотрено 13 октября 2014 г .; Принято 13 октября 2014 г.

© Корейское физиологическое общество и Корейское общество фармакологии, 2014 г.org / licenses / by-nc / 3.0 /), которая разрешает неограниченное некоммерческое использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии правильного цитирования оригинальной работы. Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Лучевая терапия различных солидных опухолей человека использует механизм гибели клеток после повреждения ДНК, вызванного радиацией. В ответ на повреждение ДНК цитохром c высвобождается из митохондрий путем активации проапоптотических белков семейства Bcl-2, а затем вызывает массовое высвобождение Ca 2+ из ER, что приводит к гибели клеток.Было также высказано предположение, что облучение может вызывать нарушение регуляции гомеостаза Ca 2+ , запускать запрограммированную гибель клеток и регулировать гибель специфических ферментов. Таким образом, в этом исследовании мы исследовали, как клеточный метаболизм Ca 2+ в клетках RKO по сравнению с радиационно-устойчивыми клетками A549 был изменен гамма (γ) -облучением. В облученных клетках RKO приток Ca 2+ через активацию обратного режима NCX был усилен, а снижение [Ca 2+ ] i через прямой режим было ускорено.Количество Ca 2+ , высвобождаемое из ER в клетках RKO в результате активации рецептора IP 3 , также увеличивалось при облучении. Увеличение [Ca 2+ ] i через SOCI было усилено в облученных клетках RKO, тогда как в клетках A549 было снижено. Эти результаты предполагают, что γ-облучение вызывает усиление клеточного метаболизма Ca 2+ в чувствительных к облучению клетках RKO, вызывая запрограммированную гибель клеток.

Ключевые слова: клетки A549, инозитол-1,4,5-трифосфатные рецепторы, Na + -Ca 2+ обменник, клетки RKO, магазинный Ca 2+ приток

ВВЕДЕНИЕ

Излучение Терапия является одним из общепринятых методов лечения различных солидных опухолей человека.Апоптоз играет важную роль в гибели клеток после повреждения ДНК, вызванного радиацией. В ответ на повреждение ДНК, вызванное облучением, р53 (белок 53 кДа) активирует различные гены [1,2,3]. Белковые продукты проапоптотических членов семейства гена Bcl-2 вызывают высвобождение цитохрома с из митохондрий в цитозоль, а высвобожденный цитохром с активирует каспазный каскад [4,5,6]. Участие митохондрий в апоптозе может зависеть от сигналов, исходящих из других внутриклеточных компартментов. А именно, Ca 2+ , высвобождаемый из эндоплазматического ретикулума (ER), может индуцировать и / или играть стимулирующую роль в апоптотических изменениях [7,8,9].

Смерть клеток всегда считалась одним из многочисленных клеточных событий, запускаемых увеличением внутриклеточного Ca 2+ , вызванным физиологическими или патологическими стимулами. Роль внутриклеточной активности Ca 2+ ([Ca 2+ ] i ) в апоптозе была оценена недавно [10]. Сообщалось, что экспрессия и / или локализация Bcl-2 может модулировать потоки Ca 2+ в ходе гибели клеток [11,12,13].

Увеличение внутриклеточного Ca 2+ , вызывающее апоптоз, может происходить из различных источников.Механизмы увеличения [Ca 2+ ] i включают проникновение внеклеточного Ca 2+ через каналы Ca 2+ (потенциал-зависимые каналы, опосредованные рецептором каналы) и канал транзитного рецепторного потенциала хранилища управляемый приток Ca 2+ (SOCI) или высвобождение сохраненного Ca 2+ из внутриклеточных хранилищ через IP 3 рецепторы и рецепторы рианодина во внутриклеточных хранилищах Ca 2+ [14,15,16,17] . Как только Ca 2+ выполняет свою сигнальную функцию, [Ca 2+ ] i снижается до уровней покоя для поддержания внутриклеточного гомеостаза Ca 2+ .Ca 2+ секвестрируется во внутриклеточные хранилища насосами, такими как саркоплазматическая / эндоплазматическая Ca 2+ -АТФаза (SERCA), или экструдируется во внеклеточную среду с помощью транспортеров, таких как Na + -Ca 2+ обменник (NCX) и плазматическая мембрана Ca 2+ -АТФаза (PMCA) [14,15,17]. Митохондрии также уменьшают внутриклеточный Ca 2+ через митохондриальный унипортер, расположенный во внутренней митохондриальной мембране [18], хотя их роль в регулировании внутриклеточных уровней Ca 2+ , по-видимому, заключается в очищении Ca 2+ в ограниченных микродоменах, таких как микросреда рецепторных каналов IP 3 [19].

Роль Ca 2+ в стимулировании пролиферации и гибели клеток рассматривается как контрольные точки передачи сигналов при раке, которые определяют, как эти процессы перестраиваются при раке [20]. Во многих исследованиях сообщается, что большой приток Ca 2+ , запускающий апоптоз в раковых клетках, обеспечивается притоком Ca 2+ , опосредованным хранилищами входных каналов Ca 2+ , что предполагает ключевую роль SOCI в апоптозе. и прогрессирование рака [21]. Более того, антиапоптотический белок Bcl-2, который обычно разрушается при раке, по-видимому, модулирует активность канала Ca 2+ рецептора IP 3 в отношении ER Ca 2+ магазинов [10,22,23] .Также сообщалось, что снижение ER означает, что высвобождение Ca 2+ недостаточно для развития апоптоза [10,24]. Все эти результаты предполагают, что нарушение регуляции клеточного гомеостаза Ca 2+ , вызванное нефизиологическими условиями, такими как облучение, может вызывать гибель клеток и определять чувствительность раковых клеток к лучевой терапии. Было также высказано предположение, что перенос ионов может способствовать внутренней радиорезистентности и выживанию опухолевой клетки, контролируя клеточный цикл, метаболические адаптации или репарацию ДНК [25].В этом исследовании, чтобы изучить роль клеточного метаболизма Ca 2+ в чувствительности опухолевых клеток к радиации, влияние гамма (γ) -излучения на клеточный метаболизм Ca 2+ в радиочувствительных клетках колоректального рака человека RKO и Были исследованы клетки рака легких человека A549, одной из известных радиационно-устойчивых клеток.

МЕТОДЫ

Культура клеток и облучение культур клеток

Использовали клетки рака прямой кишки человека RKO и клетки рака легкого человека A549.Клетки выращивали в среде DMEM с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки и 1% пенициллина / стрептомицина. Клетки культивировали в 25 см пластиковых колбах для тканевых культур 2 при 37 ° C в атмосфере увлажненного воздуха с 5% CO 2 /95%. Когда клетки находились в фазе экспоненциального роста при плотности клеток 3 × 10 6 клеток / 25 см колбы 2 , клетки облучали гамма-лучами 10 Гр при мощности дозы 5,0 Гр / мин с излучением 137 Облучатель Cs (Cis biointernational IBL437C, Франция).

Измерения [Ca

2+ ] i

Внутриклеточную концентрацию свободного Ca 2+ измеряли, как описано ранее [26]. Клетки промывали PBS и инкубировали в 2 мл буфера (0,05% трипсина и 0,02% EDTA). Затем клетки ресуспендировали в растворе Тироде (в мМ: 140 NaCl, 4 KCl, 2 CaCl 2 , 1 MgCl 2 , 1 NaH 2 PO 4 , 5 HEPES, 5,5 глюкозы и pH 7,4) и инкубировали при 37 ℃ с 3 мкМ fura-2 AM (Molecular Probe, Юджин, Орегон, США) в течение 30 минут и переносили в записывающую камеру на эпифлуоресцентном инвертированном микроскопе (Nikon Diaphot 300, Токио, Япония).Экспериментальные растворы переливали со скоростью 2 мл / мин. Интенсивность флуоресценции измеряли с помощью охлаждаемой CCD-камеры (Photometrics PXL37, Tucson, Arizona, USA) и обрабатывали с помощью Axon Imaging Workbench v.2.2 (Axon Instrument, Foster city, CA, USA). [Ca 2+ ] i представляли как отношение интенсивностей флуоресценции (R 340/380 ), возбуждаемых переменным освещением 340 нм и 380 нм. Интенсивность флуоресценции через фильтр с длиной волны 510 нм регистрировали с помощью охлаждаемой цифровой камеры CCD (PXL-37, Photometrics, Tucson, AZ, США).Эксперименты проводились при 37 ℃.

Растворы

Состав раствора Тирода: 140 мМ NaCl, 2,5 мМ CaCl 2 , 5 мМ KCl, 1 мМ MgCl 2 , 1 мМ NaH 2 PO 4 , 5 мМ N- [2 -гидроксиэтил] пиперазин-N ‘[2-этаносульфоновая кислота] (HEPES) и 5,5 мМ глюкозы при pH 7,4. В растворе 0 мМ Na + / 2,5 мМ Ca 2+ (раствор без Na + ) NaCl изосмотически заменяли N-метил-D-глюкамином (NMDG). Раствор 140 мМ Na + /0 мМ Ca 2+ (раствор без Ca 2+ ) был получен путем исключения CaCl 2 .Чтобы изолировать активность NCX от других путей Ca 2+ , 1 мкМ тапсигаргин (ингибитор ER Ca 2+ -АТФазы), 5 мМ кофеин (ингибитор рианодинового рецептора) и 250 мкМ La 3+ (плазматическая мембрана Ca . 2+ (ингибитор -АТФазы) добавляли к растворам для суперфузии. Раствор Ca 2+ , который использовали для опустошения внутренних хранилищ Ca 2+ , также содержал 0,1 мМ EGTA и 1 мкМ тапсигаргин.

Статистический анализ

Все данные выражены как среднее ± стандартное отклонение.Статистический анализ проводился с помощью независимого t -теста с р <0,05 в качестве критерия значимости.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Базальный уровень внутриклеточной активности Ca

2+

Базальные уровни внутриклеточной активности Ca 2+ в RKO-клетках, облученных гамма-лучами, сравнивали с таковыми в необлученных контрольных клетках (). Когда клетки инкубировали в течение различной продолжительности до 48 часов после облучения, базальные уровни R 340/380 в клетках RKO не колебались как в контрольных, так и в облученных клетках.И не наблюдали разницы в R 340/380 между контрольными и облученными клетками. Даже когда базальные уровни R 340/380 отклонялись больше всего, например, в клетках, инкубированных в течение 48 часов (0,81 ± 0,05 против 0,84 ± 0,11), статистической значимости не наблюдалось (p = 0,14). На основании этих результатов были проведены дальнейшие эксперименты с клетками, которые инкубировали в течение 48 часов после облучения гамма-лучами.

Таблица 1

Влияние гамма-облучения на базальный уровень R 340/380 в клетках RKO

Физиологическая активность NCX

Когда клетки подвергались суперфузии с 0 мМ Na + /2.Раствор 5 мМ Ca 2+ , как описано в «МЕТОДАХ», R 340/380 в клетках RKO увеличился до значения плато (с 0,85 ± 0,01 до 1,65 ± 0,03), как показано на рис. Последующая суперфузия раствора 140 мМ Na + /0 Ca 2+ снизила R 340/380 до уровня покоя со скоростью изменений R 340/380 -0,17 ± 0,05 / мин (и). В клетках RKO, облученных гамма-лучами, R 340/380 увеличилось до плато (с 0,92 ± 0,10 до 1,66 ± 0,20) и дополнительно увеличилось до 1.87 ± 0,40. Последующая суперфузия раствора 140 мМ Na + /0 мМ Ca 2+ снизила R 340/380 до уровня покоя со скоростью изменений R 340/380 -0,25 ± 0,10 / мин (и). Распад до базального уровня R 340/380 в облученных клетках завершился быстрее, чем в контрольных клетках (230 с против 290 с) (p <0,001).

Эффекты γ-облучения на NCX в клетках RKO и A549. Активность NCX в клетках измеряли в режиме, обратном NCX, индуцированному суперфузией 0 мМ Na + /2.Раствор 5 мМ Ca 2+ , содержащий 1 мкМ тапсигаргина (Thapsi), 5 мМ кофеина (CAF) и 250 мкМ La 3+ и в прямом режиме NCX 140 мМ Na + /0 мМ Ca 2+ раствор. (A) В контрольных ячейках RKO R 340/380 увеличиваются при обратном режиме NCX и уменьшаются при прямом режиме. (B) В клетках RKO, облученных гамма-лучами, наблюдался второй пик. Наклон изменения R 340/380 прямым режимом NCX был увеличен в клетках, облученных гамма-лучами.(C) В контрольных ячейках A549 R 340/380 изменены, как в (A). (D) В клетках A549, облученных гамма-лучами, крутизна изменений R 340/380 в прямом режиме NCX была увеличена, подтверждая, что активность NCX увеличивалась в результате гамма-облучения (p <0,0001). Кривые от (A) до (D) представляют средние значения R 340/380 .

Таблица 2

Сравнение NCX-опосредованных изменений R 340/380 в клетках RKO и A549

В клетках A549 R 340/380 увеличился до плато (с 0.73 ± 0,06 до 1,21 ± 0,12). Последующая суперфузия раствора 140 мМ Na + /0 мМ Ca 2+ снизила R 340/380 до уровня покоя со скоростью изменений R 340/380 -0,13 ± 0,06 / мин (и). В клетках A549, облученных гамма-лучами, R 340/380 увеличилось до значений плато (с 0,73 ± 0,06 до 1,11 ± 0,12). Последующая суперфузия раствора 140 мМ Na + /0 мМ Ca 2+ снизила R 340/380 до уровня покоя со скоростью R 340/380 изменений -0.24 ± 0,05 / мин (а). Распад до базального уровня R 340/380 также завершился быстрее, чем у контрольных клеток (p <0,0001).

Ca

2+ приток через SOCI

Ca 2+ приток через SOCI измеряли путем суперслияния клеток с нормальным раствором Тироде после опустошения внутренних хранилищ Ca 2+ . Когда клетки были перенесены с раствором 0 Ca 2+ , содержащим 0,1 мМ EGTA с 1 мкМ тапсигаргина, который выводит Ca 2+ из ER, R 340/380 увеличивался и, следовательно, снижался ниже контрольного уровня, как показано на а также .В ячейках RKO R 340/380 увеличилось намного больше, чем в ячейках A549 (). В клетках, облученных гамма-лучами, значительных изменений этих пиков не наблюдали ни в одной из клеток. После того, как внутренние запасы Ca 2+ были опорожнены, суперфузия 2,5 мМ раствора Ca 2+ Tyrode повысила R 340/380 с 0,76 ± 0,09 до 1,14 ± 0,14 в клетках RKO. В клетках RKO, облученных гамма-лучами, при суперфузии 2,5 мМ раствора Ca 2+ Tyrode R 340/380 увеличилось с 0.74 ± 0,09 до 1,60 ± 0,44, а приращения R 340/380 были намного больше, чем у контрольных клеток (0,86 ± 0,44 против 0,38 ± 0,14) (p <0,0001), как показано на рис. Области под ответом SOCI, которые приблизительно соответствуют количеству Ca 2+ , поступившего с помощью SOCI, были увеличены гамма-облучением с 213 ± 112 до 576 ± 304 со статистической значимостью (p <0,0001), как показано на рис.

Действие γ-облучения на SOCI в клетках RKO и A549. (A) Когда контрольные клетки RKO были слиты с раствором Тирода, включающим 2 мМ Ca 2+ , после истощения внутриклеточного запаса Ca 2+ , R 340/380 увеличивался за счет притока Ca 2+ через SOCI.(B) Приток Ca 2+ через SOCI был увеличен в клетках RKO, облученных гамма-лучами, по сравнению с контрольными клетками ( *** p <0,0001). (C) В контрольных клетках A549 R 340/380 был увеличен за счет притока Ca 2+ через SOCI, как в (A). (D) Приток Ca 2+ через SOCI был снижен в клетках A549, облученных гамма-лучами, по сравнению с (C) ( * p <0,05). (E) В клетках RKO области под ответом SOCI, которые приблизительно соответствуют количеству Ca 2+ , поступившего через SOCI, были увеличены за счет облучения гамма-лучами ( *** p <0.0001). В клетках A549 площади под ответом SOCI были уменьшены с помощью γ-облучения ( * p <0,05). Прирост площадей под ответом SOCI в клетках RKO после γ-облучения значительно отличался от такового в клетках A549, который уменьшался при γ-облучении ( ### p <0,0001). Кривые от (A) до (D) представляют средние значения R 340/380 .

Таблица 3

Сравнение индуцированных SOCI изменений R 340/380 в клетках RKO и A549

Когда клетки A549 были слиты с 2.5 мМ Ca 2+ Раствор Тирода, R 340/380 увеличился с 0,77 ± 0,06 до 1,26 ± 0,30 (). В клетках A549, облученных гамма-излучением, R 340/380 увеличилось с 0,77 ± 0,12 до 1,10 ± 0,24, как показано на рис. Приращения R 340/380 в клетках A549, облученных гамма-лучами, были меньше, чем в контрольных клетках (0,33 ± 0,24 против 0,49 ± 0,30) (p <0,05). Области под ответом SOCI были уменьшены с помощью γ-облучения с 221 ± 116 до 164 ± 95 со статистической значимостью (p <0,05). Увеличение площадей под ответом SOCI в клетках RKO при облучении гамма-лучами значительно отличалось от такового в клетках A549, которое уменьшалось при облучении гамма-лучами, как показано на (p <0.0001).

АТФ-индуцированное высвобождение Ca

2+ из ER

Высвобождение Ca 2+ из ER измеряли путем внеклеточного применения АТФ, который активирует IP 3 рецепторных каналов в ER (и). Когда раствор Тироде, содержащий 100 мкМ АТФ, применялся в течение 10 секунд, R 340/380 в клетках RKO временно увеличивался, от 0,83 ± 0,05 до 1,72 ± 0,29, и медленно возвращался к базальному уровню (). В клетках RKO, облученных гамма-лучами, R 340/380 увеличилось с 0.84 ± 0,05 до 2,02 ± 0,35. Разница между пиковым и базальным значениями для R 340/380 в контрольных клетках (n = 24) составила 0,89 ± 0,29, а в клетках, облученных гамма-излучением (n = 25), составила 1,18 ± 0,35 (p <0,0001). ;).

Эффекты γ-облучения на АТФ-индуцированные изменения [Ca 2+ ] i в клетках RKO и A549. (A) Применение 100 мкМ АТФ-индуцированных временных изменений в R 340/380 (АТФ-индуцированные ответы Ca 2+ ) в контрольных клетках RKO. (B) В клетках RKO, облученных гамма-лучами, временные изменения в R 340/380 были усилены по сравнению с контрольными клетками (1.18 ± 0,07 против 0,89 ± 0,06; р <0,0001). (C) В контрольных клетках A549 временные изменения в R 340/380 вызывались применением 100 мкМ АТФ. (D) В клетках A549, облученных гамма-лучами, временные изменения R 340/380 существенно не отличались от таковых в контрольных клетках. (E) В более чем 60% измеренных клеток A549 наблюдались множественные временные изменения в R 340/380 при однократном применении АТФ. (F) Частота множественных переходных изменений была увеличена в облученных гамма-лучами клетках A549 (см.).Кривые от (A) до (F) представляют средние значения R 340/380 .

Таблица 4

Сравнение АТФ-индуцированных изменений R 340/380 в клетках RKO и A549

Когда клетки A549 были слиты с раствором Тирода, содержащим 100 мкМ АТФ, в течение 10 секунд, R 340/380 временно увеличивалось и вернулся к базовому уровню, вызывая единичный переходный процесс Ca 2+ , как показано на, в 50 клетках из 154 измеренных клеток (32%) (). В других клетках A549 наблюдались множественные переходные процессы Ca 2+ (и).Амплитуды переходных процессов Ca 2+ , различия между пиковыми и базовыми значениями R 340/380 , существенно не различались между контрольными клетками и клетками, облученными гамма-излучением (). Однако частота множественных переходных процессов была увеличена в клетках, облученных гамма-излучением ().

Таблица 5

Изменения R 340/380 , индуцированные АТФ в клетках A549

ОБСУЖДЕНИЕ

Всплеск внутриклеточного Ca 2+ , вызывающий гибель клеток, может происходить из различных источников.[Ca 2+ ] i может быть увеличен за счет поступления внеклеточного Ca 2+ через SOCI или высвобождения сохраненного Ca 2+ из ER через IP 3 рецепторы и рецепторы рианодина в мембранах ER [14,15,16,17]. Приток Ca 2+ через обратный режим NCX также способствует увеличению [Ca 2+ ] i [17,27,28].

Путем γ-облучения клетки RKO начинают выходить из состояния остановки G2 / M и переходить к апоптозу через 24 часа после облучения. Только небольшие фракции клеток остаются в фазе G2 / M к 48 часам, что означает, что постмитотический апоптоз наступает через 48 часов после облучения [29].В течение этого периода времени базальный уровень [Ca 2+ ] i в клетках RKO оставался относительно неизменным (), хотя облучение вызывало увеличение жизнеспособных клеток (данные не показаны). Таким образом, эксперименты проводились с клетками, инкубированными в течение 48 часов после облучения гамма-лучами.

Изменение [Ca 2+ ] i посредством обратного режима NCX может быть измерено путем блокирования других клеточных путей Ca 2+ , как сообщалось ранее [26,27]. Облучение, по-видимому, не влияет на способность NCX импортировать Ca 2+ в цитозоль как клеток RKO, так и клеток A549 ().Прямой режим NCX играет важную роль в выведении Ca 2+ из цитозоля и может быть измерен по снижению [Ca 2+ ] i , как показано на. Интересно, что облучение имеет тенденцию ускорять накачивающую активность прямого режима NCX в обеих клетках (). Неясно, играет ли индуцированная облучением насосная активность какую-либо физиологическую роль в клеточном метаболизме. Между тем, чтобы понять причину дополнительного увеличения [Ca 2+ ] i через NCX в области плато, необходима дополнительная информация об изменениях текучести мембран, вызванных облучением, поскольку наблюдалось увеличение клеток под действием облучения. (данные не показаны).

Истощение или снижение содержания Ca 2+ из ER может сигнализировать о долгосрочных клеточных ответах, таких как экспрессия генов и запрограммированная гибель клеток или апоптоз [30,31], и обеспечивает сигнал, который активирует вход Ca 2+ через Каналы SOCI [32,33]. Повышение проникновения Ca 2+ через SOCI в клетки RKO с помощью облучения, как показано на фиг., Может способствовать ускорению гибели клеток. Повышение активности SOCI может быть следствием других клеточных изменений, вызванных облучением, таких как опорожнение ER после повышенного высвобождения Ca 2+ при облучении ().Облучение может вызывать прямые эффекты на SOCI-модулирующие белки, такие как STIM, и синергическое взаимодействие SOCI с другими клеточными компонентами, как сообщалось в исследованиях индуцированного облучением взаимодействия BAX с SOCI [34,35].

Данные несут косвенную информацию о содержании ЭР Ca 2+ . Предварительное опорожнение ER для индукции притока Ca 2+ через SOCI позволяет оценить размер высвобождаемого пула Ca 2+ . Результаты и предполагают, что содержание Ca 2+ в ER клеток RKO намного больше, чем у клеток A549.Количество Ca 2+ , высвобождаемое из ER под действием АТФ, также имеет тот же характер: клетки RKO высвобождают большее количество Ca 2+ , чем клетки A549 (). Интересно, что γ-облучение клеток A549 вызывало уменьшение содержания ER Ca 2+ и притока Ca 2+ через SOCI, тогда как γ-облучение клеток RKO приводило к усилению притока Ca 2+ через SOCI (). Эти результаты, наряду с повышенным высвобождением Ca 2+ из ER под действием АТФ в клетках RKO, как показано на, могут обеспечить возможное объяснение явных различий в гибели клеток между клетками RKO и A549.Предполагая, что поток Ca 2+ из ER способствует гибели клеток [20], усиленное высвобождение Ca 2+ из ER в клетках RKO с помощью γ-облучения может объяснить радиочувствительность клеток RKO. Неизмененное высвобождение Ca 2+ из ER может быть одним из возможных механизмов радиационной стойкости клеток A549. Эти наблюдения хорошо подтверждаются другими сообщениями, в которых говорится, что Ca 2+ , высвобождаемый в результате снижения ER, недостаточен для возникновения апоптоза [10,24].

Неудивительно, что было обнаружено, что активность транспортеров Ca 2+ клеток A549, исследованных в этом исследовании, не подвергалась такому влиянию γ-облучения, как активность радиочувствительных клеток RKO.Однако γ-облучение увеличивало частоту появления множественных пиков Ca 2+ в клетках A549, что позволяет предположить, что механизм высвобождения Ca 2+ , индуцированный Ca 2+ , был активирован γ-облучением (). Чтобы прояснить участие этого механизма высвобождения Ca 2+ , индуцированного Ca 2+ , в радиационно-индуцированной дерегуляции Ca 2+ , необходимы дальнейшие исследования с помощью иммунохимических и молекулярно-биологических методов [36]. Однако оставшиеся значения [Ca 2+ ] i не увеличивались за счет многократных переходных процессов Ca 2+ ().Результаты, а также подтверждают идею о том, что γ-облучение не влияет на внутриклеточный метаболизм Ca 2+ клеток A549, и в этих клетках может не задействоваться клеточный процесс гибели клеток, активируемый Ca 2+ . В заключение, эти результаты предполагают, что γ-облучение усиливает клеточный метаболизм Ca 2+ в чувствительных к облучению клетках RKO и вызывает запрограммированную гибель клеток. Результаты этого исследования могут обеспечить дальнейшее понимание роли Ca 2+ в содействии гибели клеток и возможностей терапевтического вмешательства при раке.

БЛАГОДАРНОСТИ

Это исследование было поддержано грантом Университета Инха.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

9069Мияшита Т, Рид Дж. Супрессор опухоли p53 является прямым активатором транскрипции гена bax человека. Клетка. 1995; 80: 293–299. [PubMed] [Google Scholar] 2. Oda E, Ohki R, Murasawa H, Nemoto J, Shibue T, Yamashita T., Tokino T, Taniguchi T, Tanaka N. Noxa, член только Bh4 семейства Bcl-2 и кандидат в посредники p53-индуцированного апоптоза. Наука. 2000; 288: 1053–1058. [PubMed] [Google Scholar] 3. Накано К., Вусден К. PUMA, новый проапоптотический ген, индуцируется p53. Mol Cell. 2001. 7: 683–694. [PubMed] [Google Scholar] 4.Li P, Nijhawan D, Budihardjo I, Srinivasula SM, Ahmad M, Alnemri ES, Wang X. Цитохром c и dATP-зависимое образование комплекса Apaf-1 / каспаза-9 запускает каскад апоптотических протеаз. Клетка. 1997. 91: 479–489. [PubMed] [Google Scholar] 5. Адамс Дж. М., Кори С. Семейство белков Bcl-2: арбитры выживания клеток. Наука. 1998. 281: 1322–1326. [PubMed] [Google Scholar] 6. Хенгартнер МО. Биохимия апоптоза. Природа. 2000; 407: 770–776. [PubMed] [Google Scholar] 7. Hajnóczky G, Csordás G, Madesh M, Pacher P.Контроль апоптоза с помощью кальциевых сигналов, управляемых IP (3) и рианодиновыми рецепторами. Клеточный кальций. 2000. 28: 349–363. [PubMed] [Google Scholar] 8. Pinton P, Ferrari D, Rapizzi E, Di Virgilio F, Pozzan T, Rizzuto R. Роль кальция в действии Bcl-2? Биохимия. 2002; 84: 195–201. [PubMed] [Google Scholar] 9. Грин Д.Р., Кремер Г. Патофизиология гибели митохондриальных клеток. Наука. 2004. 305: 626–629. [PubMed] [Google Scholar] 10. Пинтон П., Риццуто Р. Гомеостаз Bcl-2 и Ca 2+ в эндоплазматическом ретикулуме.Смерть клетки отличается. 2006; 13: 1409–1418. [PubMed] [Google Scholar] 11. Баффи Дж., Мияшита Т., Уильямсон-младший, Рид Дж. Апоптоз, вызванный выведением интерлейкина-3 (ИЛ-3) из линии ИЛ-3-зависимых гемопоэтических клеток, связан с перераспределением внутриклеточного кальция и блокируется усиленной продукцией онкобелка Bcl-2. J Biol Chem. 1993; 268: 6511–6519. [PubMed] [Google Scholar] 12. Pinton P, Ferrari D, Magalhães P, Schulze-Osthoff K, Di Virgilio F, Pozzan T, Rizzuto R. Снижение загрузки внутриклеточных хранилищ Ca 2+ и подавление емкостного притока Ca 2+ при сверхэкспрессии Bcl-2 клетки.J Cell Biol. 2000; 148: 857–862. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 13. Фойузи-Юссефи Р., Арнодо С., Борнер С., Келли В.Л., Чопп Дж., Лью Д.П., Деморекс Н., Краузе К.Х. Bcl-2 снижает концентрацию свободного Ca 2+ в эндоплазматическом ретикулуме. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2000; 97: 5723–5728. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 14. Берридж MJ, Lipp P, Bootman MD. Универсальность и универсальность кальциевой сигнализации. Nat Rev Mol Cell Biol. 2000; 1: 11–21. [PubMed] [Google Scholar] 15.Carafoli E, Santella L, Branca D, Brini M. Генерация, контроль и обработка сигналов клеточного кальция. Crit Rev Biochem Mol Biol. 2001; 36: 107–260. [PubMed] [Google Scholar] 16. Trebak M, Bird GS, McKay RR, Putney JW., Jr. Сравнение человеческих TRPC3-каналов в режимах, активируемых рецептором, и режимах, управляемых магазином. Дифференциальная чувствительность к блокаторам каналов предполагает принципиальные различия в составе каналов. J Biol Chem. 2002; 277: 21617–21623. [PubMed] [Google Scholar] 17. Берридж MJ, Bootman MD, Родерик HL.Передача сигналов кальция: динамика, гомеостаз и ремоделирование. Nat Rev Mol Cell Biol. 2003; 4: 517–529. [PubMed] [Google Scholar] 18. Киричок Ю., Крапивинский Г., Клэпхэм Д.Е. Митохондриальный унипортер кальция представляет собой высокоселективный ионный канал. Природа. 2004. 427: 360–364. [PubMed] [Google Scholar] 19. Риццуто Р., Поццан Т. Микродомены внутриклеточного Ca 2+ : молекулярные детерминанты и функциональные последствия. Physiol Rev.2006; 86: 369-408. [PubMed] [Google Scholar] 20. Родерик Х.Л., Повар SJ. Ca 2+ сигнальные контрольные точки при раке: ремоделирование Ca 2+ для пролиферации и выживания раковых клеток.Нат Рев Рак. 2008; 8: 361–375. [PubMed] [Google Scholar] 21. Скрыма Р., Мариот П., Бурхис XL, Коппенол Ф. В., Шуба Ю., Ванден Абил Ф., Легран Дж., Хумес С., Бойли Б., Преварская Н. Истощение запасов и ток Са2 +, управляемый магазином, в клетках LNCaP рака простаты человека: участие в апоптозе. J Physiol. 2000. 527 (Pt 1): 71–83. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 22. Чен Р., Валенсия I, Чжун Ф., Макколл К.С., Родерик Х.Л., Бутман, доктор медицины, Берридж М.Дж., Конвей С.Дж., Холмс А.Б., Миньери Г.А., Велес П., Дистелхорст К.В.Bcl-2 функционально взаимодействует с рецепторами инозитол-1,4,5-трифосфата, регулируя высвобождение кальция из ER в ответ на инозитол-1,4,5-трифосфат. J Cell Biol. 2004. 166: 193–203. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 23. Чжун Ф., Дэвис М.С., Макколл К.С., Дистелхорст С.В. Bcl-2 по-разному регулирует сигналы Ca 2+ в соответствии с силой активации рецептора Т-клеток. J Cell Biol. 2006. 172: 127–137. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 24. Риццуто Р., Пинтон П., Феррари Д., Чами М., Сабадкай Г., Магальяйнс П.Дж., Ди Вирджилио Ф., Поццан Т.Кальций и апоптоз: факты и гипотезы. Онкоген. 2003; 22: 8619–8627. [PubMed] [Google Scholar] 25. Хубер С.М., Бутц Л., Стеген Б., Клумпп Д., Браун Н., Рут П., Эккерт Ф. Ионизирующее излучение, перенос ионов и радиорезистентность раковых клеток. Front Physiol. 2013; 4: 212. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 26. Пак С.И., Пак Э.Дж., Ким Н.Х., Пэк В.К., Ли Ю.Т., Ли СиДжей, Сух СК. Гипоксия задерживает внутриклеточный клиренс Ca 2+ обменником Na + -Ca 2+ в сердечных миоцитах взрослого человека.Йонсей Мед Дж. 2001; 42: 333–337. [PubMed] [Google Scholar] 27. Ким Ю.Т., Пак Ю.Дж., Чон С.Ю., Со В.С., Сух СК. Влияние активности обменника Na + -Ca 2+ на индуцированный альфа-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изоксазолон-пропионатом приток Ca 2+ в нейроны Пуркинье мозжечка. Неврология. 2005; 131: 589–599. [PubMed] [Google Scholar] 28. Сонг М, Чен Д, Ю. ИП. Блокатор TRPC-каналов SKF 96365 подавляет рост клеток глиобластомы за счет усиления обратного режима обменника Na + / Ca 2+ и увеличения внутриклеточного Ca 2+ Br J Pharmacol.2014; 171: 3432–3447. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 29. Пак HJ, Lyons JC, Ohtsubo T, Song CW. Развитие клеточного цикла и апоптоз после облучения в кислой среде. Смерть клетки отличается. 2000. 7: 729–738. [PubMed] [Google Scholar] 30. Берридж MJ. Эндоплазматический ретикулум: многофункциональная сигнальная органелла. Клеточный кальций. 2002. 32: 235–249. [PubMed] [Google Scholar] 31. Рао Р.В., Эллерби Х.М., Бредесен ДЕ. Связь стресса эндоплазматического ретикулума с программой гибели клеток. Смерть клетки отличается.2004. 11: 372–380. [PubMed] [Google Scholar] 32. Эллиотт AC. Последние разработки в области поступления кальция в невозбудимые клетки. Клеточный кальций. 2001; 30: 73–93. [PubMed] [Google Scholar] 33. Путни Дж. У., младший, Броуд Л. М., Браун Ф. Дж., Ливремонт Дж. П., Птица Г. С.. Механизмы емкостного поступления кальция. J Cell Sci. 2001; 114: 2223–2229. [PubMed] [Google Scholar] 34. Скоррано Л., Оукс С.А., Опферман Дж. Т., Ченг Э. Х., Сорчинелли, доктор медицины, Поццан Т., Корсмейер С. Дж. BAX и BAK регуляция эндоплазматического ретикулума Ca 2+ : контрольная точка апоптоза.Наука. 2003. 300: 135–139. [PubMed] [Google Scholar] 35. Урасима Т., Ван К., Адельштейн С.Дж., Кассис А.И. Активация различных путей апоптоза посредством (125) IdUrd и гамма-фотонного воздействия. Int J Radiat Biol. 2004. 80: 867–874. [PubMed] [Google Scholar] 36. Ким Н.Х., Парк К.С., Сон Дж. Х., Йе Б.И., Ко СМ, Конг ИД. Функциональная экспрессия рецепторов P2Y в клетках ретинобластомы WERI-Rb1. Корейский J Physiol Pharmacol. 2011; 15: 61–66. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

VPN для iPhone и iPad | Скачать бесплатную пробную версию

iOS VPN, созданная специально для вас

Защитите свою конфиденциальность, защитите свои личные данные и получите доступ ко всему необходимому контенту с помощью приложения iOS VPN, которое легко интегрируется с вашим iPhone и iPad.С помощью всего одной учетной записи вы можете защитить до пяти устройств одновременно.

С Avast SecureLine VPN на вашем iPhone и iPad вы получите:

Все, что вы хотите

Независимо от того, находитесь ли вы в ловушке блокировки контента или путешествуете за границу и пропускаете любимые шоу из дома, Avast SecureLine VPN дает вам возможность получить доступ ко всему контенту, который вы хотите.

Мгновенная конфиденциальность

Avast SecureLine VPN для iOS настолько удобен, насколько это возможно.Всего одним нажатием на наше приложение Apple VPN вы скроете свой IP-адрес и станете анонимным в Интернете, чтобы сбить с толку рекламодателей и веб-трекеры.

Безопасность, одобренная Apple, в любой сети

Превратите любую сеть — даже незащищенные общедоступные сети Wi-Fi — в высокозащищенное зашифрованное соединение с помощью приложения VPN для iPhone, используя одобренную Apple безопасность IPSec.

Никаких ограничений на пропускную способность

Транслируйте всю музыку и демонстрируйте, что вы любите, и играете в свои любимые игры в течение всего дня с безлимитным VPN для iPhone и iPad.Подключитесь к одному из наших серверов, оптимизированных для потоковой передачи, и забудьте о прерываниях буферизации.

Защитите свою конфиденциальность и безопасность в любой сети и верните себе свободу в Интернете с помощью ведущего приложения VPN для iOS. Начните 7-дневную бесплатную пробную версию сегодня.

ИНФОРМАЦИЯ О ЛИЦЕНЗИИ CLIP & STILL

Если вы хотите использовать клип, кадр или плакат от Warner Bros.Entertainment Inc., Turner Entertainment Co. (включая фильмы, выпущенные до 1986 года MGM и RKO), Castle Rock Entertainment, New Line Cinema (включая Picturehouse и Fine Line) или библиотеки художественных фильмов Hanna Barbera, теле- или анимационные библиотеки, все запросы должны быть отправлены письменно по электронной почте или факсу.

Заполните и отправьте форму заявки на лицензирование клипов и фотографий & nbspWBEI или отправьте отдельно:

  1. Тип и цель создания или публикации, в которые вы предлагаете включить материал.
  2. Подробная информация, описывающая, как именно будет использоваться наш материал.
  3. Для использования наших материалов в художественных фильмах, телевизионных постановках, включая документальные, пожалуйста, включите краткий обзор производства и включите соответствующие страницы сценария, иллюстрирующие, как будет использоваться материал.
  4. Для использования в публикации, пожалуйста, включите связанный текст, в котором обсуждается наш фильм, и отношение материала к нему.
  5. Название (а) и дата запрашиваемого (ых) фильма (ов), телевизионного имущества (ов) или мультфильма (ов).
  6. Количество клипов, которые вы хотите использовать, с письменным описанием и длиной каждого клипа в секундах.
  7. Распространение вашей продукции, включая СМИ, территорию, продолжительность, дату трансляции и т. Д.
  8. Имя и адрес правообладателя на вашу продукцию или публикацию, если они отличаются от вашей компании.
  9. Контактная информация, включая адрес электронной почты.

Лицензионные сборы устанавливаются в соответствии с использованием. Физические элементы или фрагменты отснятого материала или цифровых фотографий не будут подготовлены до тех пор, пока не будет подписано Лицензионное соглашение. Плата за лабораторию будет применяться, если мы предоставим материал.

ПОЖАЛУЙСТА, ОБРАТИТЕ ВСЕ ДЛЯ ПЕРЕПИСКИ НА:

ДЖУЛИ ХИТ

Вице-президент Департамента лицензирования клипов и фотографий — Warner Bros. Entertainment, Inc.

электронная почта: [email protected] и [email protected]

ДЛЯ НАШИХ ДРУГИХ КОМПАНИЙ, ОБРАТИТЕ ВНИМАНИЕ:

HBO заголовки отправьте по электронной почте на адрес: cliplicensing @ hbo.com

DC COMICS (комиксы) отправить по электронной почте: [email protected]

WARNER BROS. ИНТЕРАКТИВНЫЕ РАЗВЛЕЧЕНИЯ (наши ИГРЫ) отправьте по электронной почте: [email protected]

CNN для получения информации о лицензировании: https://collection.cnn.com/pages/licensing

КОММЕРЧЕСКОЕ / РЕКЛАМНОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ:

Если вы хотите использовать материал в коммерческой или печатной рекламе, отправьте запрос через следующий веб-сайт: http: // www.wblicensedadvertising.com

ТЕКУЩИЕ ЗАПРОСЫ ДЛЯ ОБЩЕСТВЕННОСТИ:

Зарегистрируйтесь и отправьте запрос по адресу: http://press.warnerbros.com/login

НЕТЕАТРАЛЬНОЕ / ТЕАТРАЛЬНОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ:

Если вы хотите полностью просмотреть наш материал вне театра, за пределами распространения (например, в музее, школе, кинофестивале, отеле, круизном лайнере и т. Д. Для одноразового использования) в пределах США , пожалуйста, свяжитесь с нашим уполномоченный представитель: SWANK MOTION PICTURES — http: // www.swank.com/ Если вы находитесь в пределах Canada , свяжитесь с нашим уполномоченным представителем: http: //www/criterionpic.com

Если вы хотите показать один из наших полнометражных художественных фильмов, мультфильмов или короткометражек в США или Канаде, зарегистрируйтесь и отправьте свой запрос по адресу: https://wbclassics.warnerbros.com

За пределами США и Канады, пожалуйста, свяжитесь с нашим уполномоченным представителем: FILMBANK DISTRIBUTORS Ltd .: www.filmbankmedia.com

Если вы хотите запросить общую лицензию на весь фильм на годовой основе, пожалуйста, свяжитесь с нашим уполномоченным представителем: MOTION PICTURE LICENSING — http: // www.mplc.org/index/worldwide

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОТРЕБИТЕЛЬСКИХ ТОВАРОВ:

Для использования в продукте или для лицензирования продукта, который содержит наши материалы, электронная почта: WBCPInquiries@warnerbros.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

2025 © Все права защищены.
Клетки RKO Клетки колоректального рака человека RKO
[Ca 2+ ] i внутриклеточный Ca 2+

внутриклеточная активность Ca 2+

-Ca 2+ Теплообменник
IP 3 Инозитол-1,4,5-трифосфат
SOCI Магазинный Ca 2+ приток
плазматическая мембрана Ca 2+ -ATPase
SERCA саркоплазматический / эндоплазматический Ca 2+ -ATPase
ER эндоплазматический ретикулум